Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:07 min. • May 29th, 2025
Comience con una placa de múltiples pocillos que contenga esferoides tumorales, un agregado tridimensional de células cancerosas.
Colóquelo en una etapa de tomografía de coherencia óptica o de imágenes OCT, asegurándose de que esté estabilizado para obtener imágenes precisas.
Ajuste la lente para un enfoque de luz óptimo, configure los parámetros de escaneo e inicie la captura de imágenes con el tiempo.
A medida que la luz interactúa con las células, se refleja a diferentes intensidades según las estructuras celulares y las profundidades.
OCT captura estas intensidades de luz reflejada y construye imágenes transversales bidimensionales de alta resolución en diferentes planos.
Mueva la placa para adquirir las imágenes de los esferoides tumorales de todos los pocillos.
Usando software, alinee estas imágenes y procéselas para crear un modelo esferoide tridimensional, revelando sus características morfológicas, incluido el tamaño, la forma y la estructura.
Con el tiempo, las células del esferoide mueren y sus estructuras dañadas aumentan la dispersión de la luz, reduciendo la intensidad de la luz reflejada.
Esto diferencia las células viables de las no viables, lo que permite el seguimiento de las condiciones fisiológicas.
El día de la obtención de imágenes de los esferoides tumorales, retire la placa de pocillos múltiples de la incubadora. Transfiéralo al sistema de imágenes OCT y colóquelo en el adaptador de placa. Para ajustar la altura de la placa, muévala a lo largo de la dirección z de la etapa de traslación. En el software de imágenes personalizadas, establezca un rango de exploración OCT deseado para cubrir todo el esferoide tumoral, según sus etapas de desarrollo, y haga clic en Guardar parámetros para guardar la configuración.
Luego, muestre las vistas previas optimizadas de OCT xz e yz de los esferoides tumorales. Adquiera imágenes OCT 3D de esferoides tumorales uno por uno para todos los pocillos de la placa que contiene esferoides. Para ver la imagen de vista previa, haga clic en el botón Vista previa. Y para adquirir la imagen OCT, haga clic en el botón adquirir. Registre el proceso general de movimiento de la etapa de adquisición de datos OCT.
- Para garantizar la calidad de imagen óptima para todos los esferoides tumorales, el adaptador de placa debe ajustarse con precisión y el volumen medio debe ser el mismo.
- Utilice un código de procesamiento de C++ personalizado para procesar conjuntos de datos de OCT 3D de esferoides tumorales para generar imágenes estructurales de OCT. Utilice imágenes OCT 2D en 3 planos transversales xy, xz e yz a través del centroide del esferoide para generar el collage de imágenes esferoides.