Obtención de imágenes de mitocondrias neuronales mediante un microscopio electrónico de barrido de cara de bloque en serie
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:25 min. • May 29th, 2025
Tome una sección de tejido cerebral de ratón recortada e incrustada en resina que contiene el hipocampo.
La sección se tiñe con metales pesados para mejorar el contraste bajo un microscopio electrónico.
Monte la sección en un pasador de aluminio con pegamento de cianoacrilato.
Cubra los lados del bloque con pasta de plata coloidal para crear un camino conductor hacia el pasador de aluminio.
Examine el bloque de tejido con un microscopio electrónico de barrido de cara de bloque en serie (SBFSEM).
Dentro del SBFSEM, el ultramicrotomo corta secuencialmente el bloque en capas ultrafinas mientras un haz de electrones de bajo voltaje escanea la superficie expuesta.
Un detector de electrones retrodispersados captura imágenes 2D de alta resolución, revelando las mitocondrias y las estructuras celulares circundantes.
Usando el software adecuado, ajuste el brillo y el contraste para mejorar la claridad de la imagen.
Alinee las imágenes secuenciales para reconstruir un volumen 3D del tejido cerebral. Esta reconstrucción 3D permite un mapeo preciso de la morfología mitocondrial, la distribución espacial y sus relaciones dentro de los compartimentos neuronales.
Recorte las muestras en el área de in
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