Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:54 min. • May 29th, 2025
Asegure una Drosophila transgénica inmovilizada con la cabeza expuesta en una cámara de registro en una platina de microscopio de fluorescencia.
El cuerpo del hongo de la mosca comprende neuronas que expresan una proteína de fusión bioluminiscente sensible al calcio, que es activada por un cofactor precargado.
Conecte un tubo de perfusión a la cámara. Localice los cuerpos fluorescentes de los hongos, centrándose en el cáliz y los lóbulos mediales. Confirme el drenaje con tampón.
Establezca los parámetros de imagen y concéntrese en el cáliz y los lóbulos mediales. En la oscuridad, adquiera imágenes de fluorescencia de referencia de los cuerpos de los hongos antes de la exposición a estimulantes.
Perfunda la nicotina en un tampón que contiene calcio para activar los receptores nicotínicos de acetilcolina, lo que desencadena la entrada de calcio y la emisión de luz bioluminiscente.
Lavar con tampón para restaurar las condiciones basales.
Perfundir cloruro de potasio para despolarizar las neuronas, desencadenando la liberación de calcio intracelular y la emisión de señales bioluminiscentes.
Lavar con tampón para restaurar las condiciones basales.
Analizar imágenes para evaluar la actividad
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