Imágenes de células vivas de la migración nuclear glial de Müller durante la regeneración de la retina del pez cebra
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 5:50 min. • June 17th, 2025
Comience con un explante retiniano dorsal incrustado en agarosa de un pez cebra transgénico, montado en un plato fluorado con medios.
La retina exhibe daño fotorreceptor inducido por la luz y contiene células gliales de Muller o MGC con núcleos que expresan GFP.
Coloque el plato en una cámara de microscopio multifotónico.
Usando iluminación de campo claro, concéntrese en la retina.
Cambie al modo de fluorescencia para localizar los MGC.
Configure una pila z desde la capa de células ganglionares o GCL hasta la capa nuclear externa u ONL.
Iniciar imágenes en vivo.
Los fotorreceptores dañados liberan TNF-α, activando las MGC.
Los núcleos MGC migran basalmente dentro de la capa nuclear interna o INL para replicar su ADN.
Luego, los núcleos migran apicalmente a la ONL para sufrir mitosis, produciendo progenitores neuronales.
Después de la mitosis, los núcleos y progenitores de MGC migran basalmente de regreso al INL.
Los progenitores proliferan, migran al sitio de la lesión y se diferencian en fotorreceptores, lo que permite la regeneración de la retina.
Analice las imágenes capturadas para visualizar la migración nuclear.
En el software de adquisición de imágenes, abra las ventanas A1 MP GUI, TiPa
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