Imágenes multiespectrales de reflectancia difusa del flujo sanguíneo cerebral y la estructura tisular de ratas

Comience con una rata anestesiada preparada con una ventana craneal que exponga los vasos sanguíneos y el tejido cortical.

Coloque la rata en una etapa de imágenes, asegurándose de que permanezca conectada a una boquilla que administra anestesia y una mezcla de gases para regular los niveles de oxígeno.

Enfoca la cámara en la superficie del cerebro. Pase la luz de banda ancha a través de un filtro para aislar longitudes de onda específicas.

Una guía de luz y una lente colectora dirigen la luz filtrada hacia el tejido cortical.

Dentro del tejido, la luz es absorbida por la hemoglobina, dependiendo de su estado de oxigenación, y dispersada por las células, produciendo reflectancia difusa.

Capture esta luz dispersa con la cámara, optimizando el brillo ajustando el tiempo de integración.

Repita las imágenes en múltiples longitudes de onda con una rueda de filtros giratoria para recopilar datos espectrales.

Finalmente, bloquee la trayectoria de la luz para capturar una imagen oscura, luego réstela de las imágenes espectrales para eliminar el ruido.

Estas imágenes procesadas revelan el flujo sanguíneo cerebral, la oxigenación y la estructura del tejido.

Comience colocando suavemente la rata en el escenario y ajuste lentamente el nivel del escenario para que la cámara pueda enfocar la superficie del cerebro de la rata. Dentro del software de adquisición de imágenes, seleccione el comando Guardar en el menú Archivo para guardar una imagen en un archivo, nombrándola según la muestra y la longitud de onda.

Luego cambie la ubicación del filtro girando la rueda de filtros. Repita la adquisición de imágenes en cada una de las nueve longitudes de onda. A continuación, apague la fuente de luz de la lámpara halógena. Bloquee la ruta de la luz hacia el sistema de cámara monocromático del dispositivo de carga acoplada mediante una placa de protección. Por último, seleccione el comando Guardar en el menú Archivo y elija un nombre de archivo que identifique el ejemplo.