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Comience con una rata despierta y restringida en una plantilla experimental, con la cabeza firmemente fijada en su lugar.
Abra la cámara de grabación previamente implantada y retire la cubierta de gel de silicona.
Elimine cualquier tejido que haya vuelto a crecer para acceder al cerebro.
Agrega una gota de solución salina para mantener la hidratación.
A continuación, conecte una pipeta de grabación precargada que contenga colorante azul de Chicago a un micromanipulador.
Baje la pipeta a la cámara de grabación hasta que llegue a la región cerebral objetivo.
La pipeta hace contacto con la neurona y registra las señales de la neurona sin penetrarla.
Escuche estas señales neuronales como clics audibles y luego envíe pulsos eléctricos a través de la pipeta.
Estos pulsos inyectan el tinte adyacente a la neurona, lo que permite una tinción precisa de la región cerebral objetivo.
Estas técnicas de grabación y tinción yuxtacelular visualizan con precisión el sitio de registro y permiten un mapeo preciso de la actividad neuronal a la anatomía del cerebro.
Coloque la rata en el calcetín de tela y transfiera el calcetín de tela a un tubo rígido en una plantilla experimental apropiada. Fije la placa de sujeción de la cabeza de la rata a la pieza correspondiente de la plantilla. A continuación, coloque una tuerca 832 en el perno de sujeción de la cabeza que se implanta en la rata.
Posteriormente, atornille una varilla roscada de acero inoxidable al perno de cabeza. Después de eso, abra la cámara de grabación y retire el gel de silicona. Limpie la craneotomía con fórceps finos si el tejido ha vuelto a crecer en la craneotomía. Use anestesia con isoflurano durante este proceso, si es necesario.
A continuación, conecte la pipeta al micromanipulador motorizado. Mueva la pipeta a la ubicación de registro deseada en los ejes lateral anterior, posterior y medial. A continuación, avance la pipeta ventralmente a través de la duramadre hasta que esté aproximadamente a 500 micrómetros dorsales de la ubicación de registro prevista. Avance lentamente la pipeta mientras escucha los eventos de picos en un monitor de audio del voltaje amplificado registrado. Una vez identificados los eventos de pico, continúe moviendo la pipeta de 0 a 100 micrómetros hasta que las desviaciones de voltaje positivo sean superiores a aproximadamente 500 microvoltios.
Para etiquetar el sitio de grabación, configure la fuente de corriente en 4 microamperios negativos con dos pulsos de segundo al 50% del ciclo de trabajo. Y pase la corriente durante cuatro minutos para inyectar iontoforético Chicago Sky Blue a través de la pipeta.