Imágenes in vivo del cerebro de larvas de pez cebra para visualizar neuronas cerebelosas

0 visualizaciones • 3:06 min. • June 17th, 2025

Comience con larvas de pez cebra transgénicas anestesiadas en una cámara de montaje que contenga un tampón fisiológico oxigenado bajo un microscopio estereoscópico.

El cerebelo en el cerebro contiene neuronas de Purkinje modificadas genéticamente que expresan proteínas citoplasmáticas fluorescentes.

Retire el exceso de medio, luego agregue agarosa fundida para inmovilizar las larvas para obtener imágenes estables.

Oriente las larvas dorsal hacia arriba para visualizar el cerebelo.

Una vez solidificado, recorte el exceso de agarosa. Con una aguja de vidrio, extirpe la piel pigmentada que recubre el cerebro para exponerla.

Voltee el bloque de agarosa en una cámara de imágenes que contenga agarosa fundida para obtener imágenes bajo un microscopio invertido.

Agregue el tampón fisiológico para preservar la función neuronal.

Coloque la cámara debajo de un microscopio confocal invertido. Aplique luz de excitación para excitar las proteínas fluorescentes, lo que permite la visualización de las neuronas marcadas.

Las células pigmentadas de la piel, si no se eliminan, dispersan y absorben la luz de excitación, reduciendo la intensidad de la fluorescencia.

La eliminación de la piel mejora la penetraci

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