Una técnica para la aspiración y el procesamiento percutáneo de espermatozoides del epidídimo

Comience con un paciente masculino con azoospermia, una afección en la que el semen carece de gametos masculinos o espermatozoides.

La zona genital se desinfecta y se cubre con un paño para exponer solo el escroto, el órgano que alberga los testículos, que producen los espermatozoides.

Ilumina la región e identifica el epidídimo, una estructura responsable de la maduración y el almacenamiento de los espermatozoides.

Inserte una jeringa que contenga una solución de cultivo especializada para gametos en el tejido epididimario.

Aplique presión negativa mientras perfora el tejido para extraer el líquido epididimario que contiene espermatozoides.

Transfiera el líquido recolectado a un recipiente que contenga la solución de cultivo para preservar la viabilidad de los espermatozoides.

Con un microscopio, cuente los espermatozoides maduros y sanos que exhiben motilidad.

Transfiera la solución a un tubo, luego centrifugue para separar los espermatozoides y eliminar el sobrenadante.

Vuelva a suspender las células en una solución de cultivo fresca.

Los espermatozoides aislados ahora están listos para su uso en procedimientos de tratamiento de infertilidad.

Para comenzar, reúna un paquete de instrumentos quirúrgicos, dos jeringas, solución desinfectante, guantes de goma estériles y vendaje adhesivo. Examine el paquete de instrumentos quirúrgicos que se sometió a esterilización por vapor a alta presión en busca de daños. Coloque el paquete sobre la mesa de instrumentos y abra la capa exterior. Luego, pida a los andrólogos que se pongan guantes de goma estériles.

Abra la capa interna del paquete de instrumentos quirúrgicos y verifique que la cinta indicadora de esterilización esté correctamente esterilizada. Luego, prepare dos jeringas de 5 mililitros equipadas con agujas de 0,7 mililitros para anestesia y cirugía. Abra la ampolla que contiene la inyección de lidocaína. Use una jeringa estéril de 5 mililitros para aspirar la solución de lidocaína y eliminar las burbujas de aire de la jeringa.

Ahora, coloque al paciente preparado en la mesa de operaciones en posición de litotomía. Después de quitarse los pantalones, asegure la prenda superior por encima del ombligo para exponer completamente el perineo y la parte inferior del abdomen debajo del ombligo. Luego, ajuste el ángulo de la lámpara sin sombras para iluminar el escroto del paciente.

Use fórceps ovalados para agarrar una bola de gasa estéril. Sumerja la bola de gasa completamente en una solución desinfectante. Y desinfecte la piel, comenzando por la parte inferior del abdomen y avanzando hacia la parte delantera e interna de los muslos, el área perineal, el pene y el escroto. Luego, coloque una toalla cuadrada estéril debajo de las nalgas del paciente. Extienda una toalla de sujeción estéril alrededor del área quirúrgica, exponiendo completamente el escroto en toda el área.

Con una pipeta Pasteur estéril, transfiera aproximadamente 2 mililitros de solución de cultivo G-MPOS-PLUS a la placa de cultivo. Después de cerrar la tapa, entregue el plato a la enfermera en el quirófano a través de la ventana de transferencia. Ahora, coloque la placa de cultivo sobre la toalla estéril sobre la mesa de instrumentos y abra la tapa.

Con otra jeringa de 5 mililitros, aspire aproximadamente 0,2 mililitros de solución de cultivo G-MPOS-PLUS y elimine las burbujas de aire. Luego, sostenga el escroto del paciente con la mano izquierda, asegurando el epidídimo que requiere punción. Palpar el epidídimo con la mano derecha para confirmar la ubicación de la punción quirúrgica.

A continuación, con una jeringa de 5 mililitros que contiene la solución de cultivo G-MPOS-PLUS en la mano derecha, punción perpendicular a la piel en el tejido epididimario. Mientras mantiene la presión negativa, perfore repetidamente el tejido del epidídimo para permitir que el líquido ingrese a través de la aguja, luego retire la aguja de punción.

Inyecte el líquido epididimario extraído en la placa de cultivo. Después de eso, aspire la solución de cultivo G-MPOS-PLUS cercana para enjuagar la jeringa y maximizar la cantidad de líquido epididimario recolectado. Ahora, transfiera la placa de cultivo que contiene el líquido de cultivo G-MPOS-PLUS y el líquido del epidídimo al técnico de laboratorio de embriones a través de la ventana de transferencia.

Coloque la placa de cultivo en la platina de un microscopio óptico invertido y asegúrela. Encienda el interruptor de encendido del microscopio y ajuste la intensidad de la luz adecuadamente. Luego, gire el convertidor del microscopio óptico invertido. Seleccione la lente del objetivo de 10 veces y gire las espirales de enfoque grueso y fino para ajustar la distancia focal.

Una vez localizados los espermatozoides del epidídimo, obsérvelos con un aumento de 40 veces para evaluar el número y la calidad. Con una pipeta Pasteur estéril, transfiera el líquido de la placa de cultivo a un tubo de centrífuga de 15 mililitros después de observar suficientes espermatozoides activos. Coloque el tubo de centrífuga en la bandeja de equilibrio y use un tubo de centrífuga de la misma especificación que contenga agua estéril para nivelar.

Luego abra la puerta de la centrífuga. Coloque los tubos en la ranura para tarjetas simétricamente y cierre la puerta. Presione el botón Inicio para iniciar el proceso de centrifugación. Una vez completado el proceso, retire el tubo que contiene el líquido epididimario de la centrífuga. A continuación, aspire suavemente el sobrenadante con una pipeta Pasteur estéril y deseche el sobrenadante extraído.

Con una pipeta Pasteur estéril, transfiera el sedimento del fondo del tubo de centrífuga a un nuevo tubo de centrífuga que contenga aproximadamente 2 mililitros de solución de cultivo G-IVF Plus. Pipetea suavemente la solución para volver a suspender completamente el sedimento. Transfiera aproximadamente 0,5 mililitros de solución de cultivo G-IVF Plus al tubo de centrífuga. Sople suavemente los espermatozoides del epidídimo en la parte inferior para que queden completamente suspendidos y utilícelos para el procedimiento ICSI.