Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:15 min. • June 17th, 2025
Comience con un explante de retina de ratón posnatal vivo montado en un filtro de membrana y colocado en una cámara de incubación bajo un microscopio confocal.
La retina se transfecta para expresar una proteína fluorescente en las membranas de las interneuronas amacrinas con brotes estelares.
Coloque un peso de muestra prehumedecido sobre la retina para estabilizarla.
Llene la cámara con tampón.
Mantenga el flujo y la temperatura óptimos del amortiguador en la cámara para preservar la viabilidad neuronal.
Coloque un objetivo de inmersión en agua en la cámara de imágenes.
Comience las imágenes de epifluorescencia.
La luz láser, dirigida a través del objetivo, excita la proteína fluorescente en las células amacrinas.
La fluorescencia emitida se captura a través del mismo objetivo, lo que permite la visualización de las células amacrinas marcadas.
Identifique una célula brillantemente fluorescente para obtener imágenes.
Establezca los parámetros de imagen.
Capture imágenes en múltiples planos Z para lograr una visualización 3D de la morfología dendrítica completa.
Realice imágenes de lapso de tiempo para rastrear los cambios en la morfología dendrítica a lo largo del tiempo.
Ensamble la cámara de
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos