Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:23 min. • June 17th, 2025
Tome un cocultivo de glía de envoltura olfativa humana inmortalizada, o células OEG, y neuronas ganglionares de retina de rata axotomizadas, o RGN, en un cubreobjetos.
Las células OEG exhiben propiedades neurorregenerativas que facilitan la regeneración axonal en RGN.
Los RGN están inmunomarcados para que sus somas, o cuerpos celulares, emitan fluorescencia roja mientras que sus axones fluorescentes son verdes.
Con el medio de montaje, monte el cubreobjetos que contiene las celdas.
Utilice un microscopio de epifluorescencia para capturar múltiples imágenes de RGN.
Abra una imagen en el software de imágenes.
Cuantificar el porcentaje de neuronas con los axones en relación con el número total de RGN.
A continuación, trace un axón desde el soma hasta el final y comience el seguimiento de axones para determinar las longitudes de todos los axones.
Cuantifique el índice de regeneración axonal dividiendo la suma de todas las longitudes axonales por el número total de RGN.
Monte los cubreobjetos con medio de montaje y manténgalos a 4 grados centígrados. Utilice un objetivo de 40 veces de un microscopio de epifluorescencia para cuantificar la regeneración axonal. Cuantificar el porcentaje de neuron
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