Entrega de genes subpiales en la médula espinal del ratón para evaluar la expresión génica
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 5:12 min. • August 7th, 2025
Tome un ratón anestesiado, aféitese la espalda y desinfecte la piel.
Haga una incisión en la piel, separe los músculos de las vértebras y retírelos con pinzas.
Perfore las láminas vertebrales para crear grietas, luego retire los fragmentos óseos para exponer la duramadre, la membrana externa de la médula espinal.
Con una aguja, cree una abertura dural y perfore la piamadre subyacente para ingresar al espacio subpial para acceder directamente al tejido espinal.
Tome una aguja de administración que contenga una suspensión de virus adenoasociado recombinante que lleva un gen que expresa proteínas fluorescentes e inyecte la suspensión.
Retire la aguja, sutura los músculos y la piel y deje que el ratón se recupere.
El virus se une a los receptores de las neuronas y las células gliales y se endocita.
Una vez dentro del núcleo, el virus desencadena la expresión génica para producir proteínas fluorescentes.
El modelo de administración de genes subpiales ahora está listo para evaluar la expresión génica diana en la médula espinal.
Comience por anestesiar adecuadamente al animal para la cirugía. Aquí se usa isoflurano. Asegúrese de que no haya una respuesta de pellizco de la pata antes de continuar.
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