Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:00 min. • June 17th, 2025
Comience con un plato que contenga cortes de cerebro cortical de embriones de ratón transgénicos en medios suplementados con luciferina.
La región cortical contiene células madre neurales que expresan proteínas fluorescentes verdes o GFP y un gen de interés fusionado con un gen indicador de luciferasa.
Coloque el plato en la platina del microscopio para mediciones de fluorescencia y luminancia.
Capture imágenes de prueba de fluorescencia GFP, centrándose en las regiones de interés.
Durante la diferenciación neuronal, las células madre comienzan a expresar el gen de interés y producen proteínas fusionadas con la enzima luciferasa.
La luciferina interactúa con las enzimas luciferasas, generando bioluminiscencia que refleja directamente la expresión del gen de interés durante la diferenciación.
Capture una imagen de fluorescencia para identificar regiones específicas de actividad, una imagen de bioluminiscencia para monitorear la expresión génica dinámica y una imagen de campo claro para proporcionar información morfológica.
Adquiera estas imágenes tridimensionales de lapso de tiempo para visualizar la expresión génica durante la diferenciación neuronal dentro del entorno del tejido nativo.
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