Tratamiento intracerebroventricular con resiniferatoxina para la desensibilización a TRPV1 en el cerebro del ratón

Tome una microjeringa llena de resiniferatoxina, un agonista de alta afinidad de los receptores TRPV1, canales iónicos sensibles al dolor expresados en las neuronas sensoriales.

Pase la aguja a través de un tubo de metal, exponiendo un extremo corto de la punta para una orientación ventricular precisa.

Coloque un ratón anestesiado boca abajo y desinfecte su cabeza con alcohol. Sostenga la cabeza firmemente para estabilizar el cráneo.

Mueva la aguja lateralmente sobre el cuero cabelludo hasta que se enganche en la sutura sagital.

Mueva la aguja hacia la derecha, luego muévase rostralmente para engancharse a la sutura coronal.

Inserte la aguja en el ventrículo lateral derecho, luego inyecte el RTX lentamente.

Sostenga la aguja brevemente para permitir la difusión RTX, luego retírela lentamente para evitar el reflujo.

RTX se une a los canales TRPV1 en las neuronas sensoriales del cerebro, lo que provoca una afluencia sostenida de calcio y una despolarización neuronal prolongada.

Esto desencadena la desensibilización de TRPV1 mediada por fosforilación, seguida de la internalización de TRPV1 y la degradación lisosomal, lo que reduce la capacidad de respuesta neuronal a los estímulos dolorosos.