Entrega intranasal de ARNip al cerebro del ratón mediante un dispositivo de posicionamiento
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:05 min. • August 8th, 2025
Comience con ratones anestesiados colocados en un dispositivo de posicionamiento con la espalda paralela al respaldo de la silla y perpendicular al asiento.
Los ratones se colocan en una postura de cabeza hacia abajo y hacia adelante y se aseguran con cinturones de silla.
Usando una micropipeta cargada con un complejo péptido-ARNip dirigido a neuronas, coloque una gota cerca de una fosa nasal, permitiendo que el ratón inhale la solución de forma natural.
Presione suavemente la cabeza del ratón hacia abajo durante la inhalación para evitar que la solución drene hacia los pulmones.
Haga una breve pausa y luego repita la administración en la otra fosa nasal.
Repita el procedimiento para los ratones restantes.
El complejo penetra en la mucosa nasal, desde donde ingresa a los nervios olfativo y trigémino y viaja a través de ellos para llegar al cerebro.
Dentro del cerebro, el complejo se une a los receptores neuronales, sufre endocitosis y facilita la administración intracelular de ARNip.
El ARNip se convierte en parte del complejo RISC, que, al unirse al ARNm diana, induce el silenciamiento génico.
Para comenzar este procedimiento, evalúe el nivel de anestesia del reflejo bípedo de los ratones
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