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Neurociencia
0 vistas • 2:15 min • June 17th, 2025
Comience con las células de Schwann o SC, células gliales mielinizantes del sistema nervioso periférico, cultivadas en medios.
Transfiera las celdas a un plato colorimétrico equipado con electrodos en ambos lados.
Coloque el plato en un dispositivo de campo eléctrico pulsado de nanosegundos o nsPEF y establezca la intensidad de campo eléctrico deseada.
Aplique pulsos nsPEF girando cuidadosamente los electrodos hasta que aparezcan chispas.
Inmediatamente después de la estimulación, separe los electrodos y continúe cultivando las células.
nsPEF interrumpe las membranas SC, creando nanoporos transitorios que permiten la entrada de calcio. Las membranas finalmente se vuelven a sellar.
El calcio intracelular activa las proteínas de unión al calcio, desencadenando vías de señalización que regulan al alza los genes involucrados en la progresión del ciclo celular.
La señalización sostenida de calcio también activa los factores de transcripción que impulsan la desdiferenciación de los SC en un fenotipo de reparación, seguido de proliferación.
Además, aumenta la secreción de factores neurotróficos que apoyan la supervivencia y el crecimiento neuronal.
El modelo ahora está listo para estudiar el papel de los SC estimulados por nsPEF en la regeneración de los nervios periféricos después de la lesión.
Para comenzar, vuelva a suspender las células RSC96 cultivadas en 1 mililitro de medio de cultivo DMEM y transfiéralas a placas colorimétricas con electrodos en ambos lados. Encienda el interruptor de encendido del instrumento y gire la perilla para configurar las intensidades del campo eléctrico. Con cuidado, gire los electrodos hasta que aparezcan chispas, permitiendo que las celdas reciban 5 pulsos de campos eléctricos pulsados de nanosegundos de acuerdo con las intensidades de intensidad de campo preestablecidas. Separe inmediatamente los dos electrodos después del tratamiento.