Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:13 min. • August 7th, 2025
Comience con un ratón anestesiado y aplique un agente dilatador de la pupila.
Bajo un microscopio, abra el párpado y sobresalga ligeramente el ojo para exponer el lugar de la inyección.
Aplique una gota de solución viscoelástica oftálmica, luego coloque un cubreobjetos para visualizar la retina.
Con una aguja fina, cree un orificio detrás de la unión córnea-esclerótica, evitando dañar los vasos sanguíneos y el cristalino.
A través de este orificio preperforado, inserte una jeringa roma tangencialmente en el espacio subretiniano cerca del epitelio pigmentario de la retina o EPR, que sostiene las neuronas de la retina.
Inyecte el vector lentiviral que transporta genes diana en el espacio subretiniano.
Observe la formación de una ampolla subretiniana debido a la acumulación de líquido, lo que confirma la administración exitosa del vector.
Cierre suavemente el párpado para cubrir el lugar de la inyección y permitir que el ratón se recupere.
El lentivirus ingresa al EPR a través de la endocitosis, libera su material genético y lo convierte en el ADN correspondiente, que se integra con el genoma del huésped, lo que permite la expresión génica.
Primero, prepare una jeringa de microlitros con una
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