JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociencia
0 vistas • 3:58 min • August 7th, 2025
Asegure un ratón anestesiado con un tumor implantado en un marco estereotáctico.
Retire las grapas de la cirugía anterior, desinfecte la piel y haga una incisión a lo largo de la herida anterior para exponer el cráneo.
Localice el orificio de la cirugía anterior para acceder al cerebro.
Coloque el sistema de resección mínimamente invasivo, o MIRS, sobre el orificio de la rebaba.
El sistema consiste en una cánula con una ventana giratoria que utiliza succión para extraer el tejido objetivo y una cuchilla cilíndrica en la abertura para extirpar el tejido.
Inserte la cánula en la región objetivo e inicie la resección.
La succión tira de pequeñas secciones del tumor a través de la ventana, mientras que la cuchilla extirpa el tejido.
La ventana giratoria permite una resección controlada mediante succión y corte continuos.
Los fragmentos extirpados viajan a través de un tubo estéril hasta la cámara de recolección de muestras.
Retire la cánula, cierre la herida y deje que el ratón se recupere.
Comience el experimento evaluando la sedación del ratón pellizcando el dedo del pie. Aplicar ungüento oftálmico en los ojos para evitar la sequedad de la córnea. Luego, coloque el mouse en un marco estereotáctico. Retire la grapa de la cirugía anterior y desinfecte la piel con ciclos alternos de un exfoliante a base de clorhexidina o betadine y alcohol. Luego cree una incisión longitudinal de 1 centímetro en la línea media a lo largo de la cicatriz quirúrgica anterior con un bisturí estéril. Conecte la pieza de mano MIRS al brazo estereotáctico a través del adaptador de platina.
Para configurar la máquina MIRS, inserte el cable de alimentación del panel trasero en el receptáculo del cable de alimentación. Encienda o apague la alimentación del sistema alternando entre 0 y 1. Inserte un extremo de la manguera de nitrógeno en el accesorio macho en el panel trasero de la consola. Gire la tuerca de conexión en el sentido de las agujas del reloj para apretarla. Asegúrese de que la presión de suministro no exceda los 100 PSIG y conecte la manguera al suministro de nitrógeno.
Selle la tapa del puerto de vacío para evitar fugas. Verifique que la perilla de aspiración en la parte frontal de la consola esté configurada en 100, pero que no haya fugas en el sistema de aspiración y que la presión de suministro de entrada de nitrógeno sea correcta. Inserte el conector gris del pedal en su receptáculo gris hasta que haga clic. De la misma manera, inserte el conector azul de la pieza de mano en su receptáculo azul. Prepare cada pieza de mano aspirando líquido estéril en la abertura a través del tubo y la pieza de mano, y luego en el recipiente para asegurarse de que el interior del tubo y la pieza de mano estén lubricados.
Seleccione el modo de aspiración en el panel frontal de la consola e inicie el uso del pedal. Inserte la cánula MIRS de 23G en el pozo a una profundidad de 2,5 milímetros. Inicie el proceso de resección presionando el pedal conectado a la cánula. Realice ciclos completos de resección con la perilla de control de la pieza de mano. Después del proceso de resección, retire la cánula MIRS de calibre 23 y agregue 5 mililitros de 1x PBS para enjuagar el tubo y desalojar cualquier residuo residual. Luego cierre la herida con una grapadora y retire el mouse del marco estereotáctico. Regrese el ratón a la almohadilla térmica para recuperarse de la anestesia antes de volver a colocarlo en su jaula.