Inyección de vectores adenoasociados recombinantes en un modelo de ratón con atrofia muscular espinal y bulbar
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:44 min. • August 7th, 2025
Comience con un ratón restringido con atrofia muscular espinal y bulbar o afectado por SBMA.
Limpia su cola y caliéntala para dilatar la vena.
La SBMA es causada por un receptor de andrógenos mutado o gen AR que produce ARNm mutante.
Este ARNm sintetiza proteínas tóxicas en las neuronas motoras que afectan la transmisión de señales y provocan debilidad muscular.
A continuación, tome una jeringa que contenga virus adenoasociados recombinantes o vectores AAV con un plásmido que codifique microARN terapéutico.
Inserte la aguja en la vena de la cola e inyecte la solución.
Ahora, aplique presión para detener el sangrado, luego regrese al ratón a su jaula.
Una vez en circulación, el vector viral llega a las neuronas motoras que controlan la función muscular.
El virus ingresa a la célula a través de la endocitosis, liberando el plásmido.
El plásmido produce microARN maduro con secuencias complementarias al ARNm AR mutante.
Estos microARN se unen a los ARNm de AR, desencadenando su degradación.
Esto inhibe la acumulación de proteínas tóxicas y ayuda a mejorar la función neuromuscular.
Divida el stock de plásmidos de microARN AAV en alícuotas de 100 a 200 microlitros, que contienen una carga viral de
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