Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:00 min. • June 17th, 2025
Tome una rebanada de cerebro de ratón fijada químicamente en una placa de pocillos múltiples.
El tejido contiene axones rodeados de vainas de mielina ricas en lípidos. Los cuerpos celulares contienen cuerpos de Nissl compuestos por retículo endoplásmico rugoso y ribosomas.
Incubar en una solución de permeabilización que contenga una tinción fluorescente de Nissl. La solución permeabiliza las membranas celulares, lo que permite que la tinción se una al ARN ribosómico dentro de los cuerpos de Nissl y marque los cuerpos celulares.
Coloque el tejido bajo un microscopio confocal con un sistema de imágenes coherente de espectroscopia Raman anti-Stokes, o CARS.
Bomba sincronizada directa y rayos láser Stokes sobre el tejido, sintonizados para excitar los enlaces moleculares en la vaina de mielina rica en lípidos.
Introduzca un rayo láser de sonda para interactuar con los enlaces excitados y producir una señal anti-Stokes específica para la mielina.
Un fotodetector captura la señal para generar una imagen específica de mielina.
Utilice imágenes confocales para capturar señales de las carrocerías Nissl etiquetadas.
Superponga las imágenes confocales y CARS para visualizar la arquitectura neuronal.
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