Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:47 min. • August 7th, 2025
Coloque un ratón anestesiado con una pata trasera afeitada bajo un microscopio quirúrgico.
Haga una incisión en la piel de la pierna afeitada, luego corte las capas de tejido conectivo para exponer los músculos subyacentes.
Usando retractores, separe los músculos para exponer el nervio peroneo común.
El nervio contiene neuronas motoras, cuyas terminales axonales se conectan con las fibras musculares para formar uniones neuromusculares o NMJ.
Localice la intersección del nervio con el tendón del músculo gastrocnemio en la rodilla.
Sostenga el nervio con fórceps y aplique presión para inducir la lesión.
Un sitio de lesión translúcido indica daño axonal, lo que conduce a un deterioro de la NMJ.
Asegúrese de que la capa externa del epineuro del nervio esté intacta para guiar la regeneración axonal.
Retire los retractores y vuelva a alinear los músculos. Sutura el sitio de la incisión y deja que el ratón se recupere.
Las señales de los axones dañados reclutan macrófagos para eliminar los desechos axonales, lo que apoya la regeneración axonal y el restablecimiento de las NMJ.
Coloque el mouse en la tabla quirúrgica y confirme la falta de respuesta al pellizco del dedo del pie. Alinee las extremidades dentro de las restricciones, con la extremidad trasera objetivo en una posición anatómicamente natural y la articulación de la rodilla ligeramente extendida sin rotación interna o externa.
Luego transfiera al animal bajo un microscopio quirúrgico. Y ajuste la tabla hasta que la articulación ósea de la rodilla y la cresta entre el tibial anterior y los músculos gastrocnemio sean visibles a través del objetivo. Con un bisturí y fórceps, haga una incisión de aproximadamente tres centímetros a través de la piel perpendicular al curso subyacente del nervio peroneo común. Continúe la incisión a través de la fascia superficial, exponiendo los músculos bíceps femoral y vasto lateral, seguida de una incisión de 1 a 2 centímetros a través de la fascia profunda de conexión para separar los músculos.
A continuación, use retractores mecánicos para retroceder el músculo bíceps femoral caudalmente para revelar el nervio peroneo común. Trazar el nervio proximalmente hasta encontrar su intersección con el tendón de la cabeza lateral del músculo gastrocnemio. Luego use una pinza fina para agarrar el nervio, alineando las puntas paralelas al borde lateral del tendón del gastrocnemio. Y aplique una presión concentrada constante durante 5 segundos para aplastar el nervio peroneo común.
Sosteniendo las pinzas perpendiculares a la fibra, agarre el tejido con el área justo detrás de la punta de las pinzas. Y aplique una presión firme pero suave para un aplastamiento limpio y lineal del nervio a lo largo del borde del tendón.
Inspeccione visualmente el nervio a través del microscopio quirúrgico para confirmar un aplastamiento completo del tejido. El nervio aparecerá translúcido en el sitio de la lesión. Si el nervio se ha dañado lo suficiente, retire los retractores. Y realinear los músculos en sus posiciones anatómicas. Luego use suturas de seda 6-0 para cerrar el sitio de la incisión con una a tres suturas simples e interrumpidas y coloque el ratón sobre una almohadilla térmica en una jaula limpia con monitoreo hasta que se recupere por completo.