Name: Determinación rápida del umbral nociceptivo térmico en ratas diabéticas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 45 s
Description: Aprende a determinar el umbral nociceptivo térmico en ratas diabéticas usando una placa caliente incremental. Este método permite evaluar la sensibilidad al dolor con mínimo estrés en los animales.

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Este trabajo fue financiado por la Asociación Americana de Diabetes (ADA), Grant JF1-10-14 (MDiF). Nos gustaría agradecer al personal del Laboratorio de Recursos Animales en WSU. Los autores agradecen la asistencia con el análisis estadístico de los datos de Neil Paton, Ph.D.

TNTS de ratones y ratas se determinan mediante el incremento de la placa caliente analgesia metros [iHPAM, CITI Inc. Ciencias de la Vida (Woodland Hills, CA)]. El equipo consta de varios componentes: una placa de aluminio (10 x 20 cm) con el sistema de calefacción por debajo y una cámara de observación por encima de plexiglás, una unidad de control de calor, el software de adquisición de datos (serie CITI Parte # Soft 8), una PC (personal ordenador) y un pedal de arranque a control remoto, detener o reiniciar el control de la unidad. El sistema de calefacción también permite el inicio / parada / reposición del proceso de calentamiento de forma manual a través de un teclado en frente del equipo. El iHPAM se puede configurar para diferentes velocidades de calentamiento, en espera / de corte de las temperaturas. 1. Instalación del equipo <ol><li> Antes de los animales de prueba, una inspección visual de la unidad para corroborar las tasas de calentamiento elegido (por ejemplo, 6 ° C / min), las temperaturas iniciales y finales en espera de corte (por ejemplo, 28 ° C y 55 ° C, respectivamente). </li><li> Verifique todas las conexiones. Para conservar una copia electrónica de los resultados, la unidad debe estar conectada a un ordenador con software de la serie 8. Por otra parte, las copias impresas de los resultados se pueden imprimir a través del puerto serie de la unidad. </li><li> Pruebe el equipo. Pulse el pedal una vez para asegurarse de que el Software Series 8 registros de datos: las temperaturas iniciales de reserva, de corte final y el tiempo en segundos requerido para alcanzar la temperatura de corte. </li><li> Como una prueba de control adicional, los investigadores que participan en los experimentos puede ser necesario experimentar el dispositivo en sí mismos. Retiro de la mano de la placa de metal en el momento de la percepción del dolor (46-48 ° C) no debe causar daño a la piel ni produce ninguna molestia posterior. </li><li> Una vez que la unidad se ha establecido y se registrarán los resultados de las medidas 1.3 y 1.4 se pueden comparar. Esto es útil para detectar problemas potenciales que podrían invalidar el uso de la unidad. Por ejemplo, las discrepancias entre la formación inicial de espera / final de corte Tempeperaturas y la lectura real de la unidad, y / o diferencias entre las temperaturas mostradas por la unidad y la temperatura de la placa real requerido para la retirada de la mano. </li></ol> 2. Prueba de los animales normales Ya sea joven o adulto ratas Wistar [post-parto (p) Edad 21-25 días], o los ratones (P21-25) de cualquier fondo genético o de género se puede utilizar. Los ratones usados ​​en nuestros experimentos son de la cepa C57BL/6J. <ol><li> La noche antes de los experimentos a realizar, aclimatar a los animales mediante la colocación de sus jaulas en el banco donde se encuentra el iHPAM. Dos horas antes de la realización de las pruebas, encienda el iHPAM para familiarizar a los animales con el ruido de fondo de la unidad. En este punto, el iHPAM se puede configurar y probados para verificar el correcto funcionamiento (consulte los pasos 1). Alimentos y el agua se proporcionaron ad libitum durante toda la prueba, excepto cuando el animal se encuentra en la cámara de observación (ver Paso 2.1). Nota: Es importante no asumir que las condiciones de laboratorio en experimentos de comportamiento son controlados de forma predeterminada. Se debe prestar especial atención a los factores genéticos y ambientales que pueden influir en los resultados de los estudios de comportamiento (revisado en 7). </li><li> Suavemente colocar un ratón normal / rata en la cámara de observación plexiglás en la parte superior de la placa de calentamiento de la unidad. Deje que el animal se adapte a la superficie caliente (fijado en 28 ° C) hasta que el animal muestra un comportamiento confortable. Nota: En estas condiciones las ratas normales adultas muestran un comportamiento exploratorio inicial, en ocasiones de pie hacia la tapa de la cámara de observación, mientras que oler. Después de unos minutos, las ratas pueden presentar episodios ocasionales de aseo personal y un comportamiento relajado. A veces, las ratas se acostó con una postura corporal relajada (extensión de decúbito prono), mientras que casualmente olfatear los alrededores. Los ratones normales son generalmente más activos que las ratas. Sin embargo, los ratones muestran un comportamiento exploratorio, relajado después de unos minutos in la cámara de observación. Es excepcionalmente raro observar tanto las conductas de escape (por ejemplo, saltar, tratando de escapar de la cámara de observación) o actitudes defensivas (por ejemplo, chillando). Es también importante observar que los ratones pueden comunicar el dolor de un ratón a otro 8. Por lo tanto, puede ser importante para los ratones de prueba colocados en jaulas separadas. </li><li> Colocar espejos en la parte posterior de la cámara de observación, para permitir observaciones en todos los ángulos. Un trípode que sostiene una cámara de vídeo digital puede ser de gran ayuda para determinar el momento exacto en el que nocifensive (evitar el dolor) la conducta que había ocurrido. </li><li> Una vez que el animal está cómodo en el calor de la cámara de observación de la placa presionando el pedal. Cuando la temperatura de la placa se calienta a una velocidad de 6 ° C / min, los animales normales presentan un comportamiento nocifensive estén implicados tanto la pata trasera-* Por lo general las temperaturas que rabian 46 a 48 ° C 3,5,9,10. Por lo tanto, el animal es la forma típica eliminado la observablesción cámara después de aproximadamente 3 minutos. Nota: Para la respuesta típica de un nocifensive es decir, la rata o el ratón, pata posterior paliza, mientras se agita y / o de elevación, es suficiente para terminar el estímulo térmico. Esto se consigue presionando el pedal. En este momento, el software registra la temperatura de la placa y la placa inmediatamente se enfría hasta la temperatura de espera (28 ° C) se alcanza (~ 0,5 min). Esto es decir, la temperatura, la que evoca cualquier reacción nocifensive es considerado como el umbral de calor nocivo (TNT) de la normal (control) de los animales. * A veces, particularmente en los ratones, el comportamiento a la temperatura nocifensive nocivo primero se puede observar en una o ambas patas delanteras (por ejemplo, lamiendo mientras está sentado), segundos antes traseras de las patas. Sin embargo, la pata delantera se lame es un componente normal de la conducta de aseo. Por lo tanto, sólo pata posterior se evalúan las reacciones. En ocasiones, los ratones pueden preparar a sus patas traseras también. Sin embargo, la preparación normal de hacer not duran más de unos pocos segundos, no implica intensiva lamer y por lo general termina después de la limpieza de sus garras. </li><li> Retire con cuidado el animal de la placa y colocarla en su jaula correspondiente. La medición del umbral de calor se repite entonces para el control de otras (normal) de los animales. Nota: TNTS se puede determinar en un solo animal a intervalos de 1-2 minutos sin retirar el animal de la cámara de observación. Determinaciones de TNT en ratas o ratones puede repetirse varias veces durante varios días. Esto es particularmente útil para determinar la media de TNT de un animal individual, así como su variación con la edad. </li><li> El TNT de los animales de control se expresa como la media de tres o más umbrales ± SEM. </li><li> El análisis estadístico de los datos obtenidos se realizó para comparar los diferentes grupos de tratamiento de los ratones o ratas. Procedimientos paramétricos, incluyendo análisis de la varianza puede ser utilizado apropiadamente en donde los datos se distribuyen normalmente y donde los grupos de tratamiento son homoskedastic, cuando estas condiciones se han cumplido los siguientes criterios pueden ser aplicados. Análisis de varianza seguido por la prueba de Newman-Keuls para detectar diferencias en las mediciones múltiples, es decir, que se repiten TNTS individuales con / sin tratamiento o en diferentes puntos de tiempo (por ejemplo, datos de la Figura 3). El Student para datos apareados t-test se puede utilizar para comparar dos grupos de datos es decir, antes de TNTS después del tratamiento contra las drogas, el unpaired t-test se puede utilizar para determinar las diferencias en los cambios de TNT en tratados con el fármaco frente a animales tratados con vehículo (por ejemplo, , datos de la Figura 4). </li></ol> 3. Prueba de los animales diabéticos La estreptozotocina (STZ) inducida rata diabética es el modelo animal más utilizado para estudiar los mecanismos de PDN y evaluar fármacos analgésicos y terapias 11,12. Las ratas hechas diabéticas por una sola dosis intraperitoneal de STZ (60 mg / kg) puede be la prueba de la hiperalgesia térmica durante la 3 ª semana después de la aparición de la diabetes 11. Es importante tener en cuenta que no todas las ratas diabéticas desarrollar PDN. Sin embargo, los animales que se desarrollan hiperalgesia (~ 50%) pueden ser fácilmente identificados. De hecho, sus TNTS son inferiores a lo normal *. * Para determinar TNTS de STZ ratas diabéticas, una temperatura de la placa de partida de 15 ° C en lugar de 28 ° C se utiliza. La razón de estos cambios es que los animales diabéticos con más PDN se espera que sean hiperalgésico 2,11. Por lo tanto, tendrán más bajos que los umbrales normales de calor nocivos (por ejemplo, &lt;45 ° C). <ol><li> Una rata diabética se coloca en la cámara de observación en la parte superior del aparato de ensayo. El animal se le permite aclimatarse a la superficie de la placa hasta que el animal muestra un comportamiento confortable. Nota: Por lo general, una rata diabética no muestra gran parte del comportamiento normal. Las ratas diabéticas suelen ser hipoactivo, letárgico, a menudo mostrandomovimientos restringidos y aseo lento. Es raro observar la clasificación hacia la tapa de la cámara de observación. Después de unos minutos, las ratas diabéticas con calma pueden permanecer en un rincón de la cámara con ocasional inhalación de los alrededores. </li><li> Una vez que el animal diabético es cómodo en la cámara de observación, la placa se calienta hasta que en la Etapa 2,3 la rata diabética pueden mostrar un comportamiento nocifensive implica ya sea trasera / delantera de la pata. Esto suele ocurrir a temperaturas de la placa no nocivos (por ejemplo, &lt;45 ° C), o después de no más de 5 minutos en la cámara con el aumento de la temperatura de 6 ° C / min. Nota: La respuesta nocifensive de una rata adulta joven diabético no difiere de la de una rata normal. Sin embargo, la temperatura más baja que evoca tal comportamiento se redujo significativamente. </li><li> Vea el Paso 2.4 </li><li> La media de más de tres umbrales en el día del experimento expresado como ° C ± SEM se considera el umbral de calor nocivo de la diabetic animal. Nota: Un paradigma similar a la explicada para las ratas normales o diabéticas se pueden seguir para determinar la eficiencia térmica de lucha contra la nocifensive efecto de los analgésicos en los umbrales de calor. </li></ol> 4. Las pruebas de analgesia Las propiedades anti-nociceptivos de fármacos (por ejemplo, analgésicos), así como la determinación de los parámetros farmacológicos tales como la dosis mínima efectiva puede ser fácilmente obtenido mediante los pasos explicados anteriormente. Se prevé que las dosis apropiadas de un analgésico administrado a ratas o ratones incrementaría significativamente sus TNTS. Esto es particularmente sensible en los animales con hiperalgesia térmica 3. Sin embargo, para evitar el sesgo en la interpretación de los resultados, los investigadores involucrados en la observación del comportamiento de un grupo de animales que no debe saber o conocer si los animales habían sido tratados o no. Además, los medicamentos a ser inyectados por el observador se pueden preparar por otro investigador y etiquetadosA, B, C, etc dosificación se proporciona en una copia impresa, listando dosis individuales por animal identificado. Dependiendo del fármaco sometido a ensayo, diferentes dosis de un analgésico potencial puede ser administrado a los animales normales o diabéticos 5-15 min comportamiento pruebas anteriores. Los controles apropiados deben ser incluidos (es decir, solo emparejados por edad los animales inyectados con vehículo y / o ratas diabéticas sin PDN) y probada usando condiciones idénticas (por ejemplo, misma temperatura de partida de la placa). Los efectos crónicos de drogas se puede probar también. 5. Los resultados representativos La temperatura más baja de la placa que evoca reacciones nocifensive, ya sea en la pata trasera de jóvenes adultos normales no tratados ratas o ratones se determinaron los pasos siguientes 2-1 a 2-6. Como se muestra en la Figura 1, TNT de ratas normales y ratones adultos jóvenes fueron 47,2 ± 0,2 ° C y 47,5 ± 0,5 ° C, respectivamente. Tenemos OBSErved ni variación significativa diaria de TNTS individuo (Figura 2A), ni cambios significativos de TNTS entre los individuos de la misma edad (Figura 2B). Diferencias TNT, debido a los géneros no se observaron (no mostrado). TNTS de jóvenes adultos STZ-ratas diabéticas se determinaron de manera similar a la de las ratas normales (Pasos 3.1 a 3.3). Sin embargo, la temperatura de la placa de partida se fijó a 15 ° C en lugar de 28 ° C. El comportamiento nocifensive de STZ-ratas diabéticas se evaluó al menos tres veces en un individuo y de manera diaria a partir once días después de la inyección de STZ. Como se muestra en la Figura 3, una disminución significativa (p &lt;0,01) en el TNT de STZ-ratas diabéticas se hace evidente dos semanas después de la inyección de STZ. La media de TNT de STZ-ratas diabéticas fue de 45,6 ± 0,1 ° C (n = 16, los valores combinados de 14-23 días). Las ratas diabéticas que presentan significativamente más baja que la norma TNTl se considera que tienen PDN. Estas ratas se utilizaron para probar las agudas antinociceptivos propiedades de un analgésico (compuesto A). TNTS se determinaron en ratas normales y diabéticas inyectados con una dosis única del compuesto o vehículo solo cinco minutos antes de la prueba. Como se muestra en la Figura 4, una sola dosis intraperitoneal del compuesto aumentó significativamente TNTS de ratas diabéticas, en comparación con ratas tratadas con el vehículo solo (45,6 ° C frente a 47,6 ° C, respectivamente). El efecto anti-nocifensive del compuesto A también se observó en las ratas normales, aunque significativa (p &lt;0,01), fue menos pronunciada (47,4 ° C frente a 48,0 ° C, respectivamente). <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig1.jpg" /> Figura 1. Determinación de TNTS de ratas adultas jóvenes normales y ratones: Los TNTS de ratas adultas jóvenes (p21-24) o ratones (P20-21) fueron probados en el iHPAM siguiendo los pasos descritos ABOve. Un total de 12 ratas y ratones fueron probados 25. Las mediciones se realizaron durante varios días y los resultados se agruparon. Los resultados se expresan como media ± SEM. El mínimo y el máximo de los valores registrados en TNT estas ratas fue de 46,2 ° C y 48,6 ° C respectivamente. En el caso de los ratones, los valores máximo y mínimo de TNT registrados fueron 48,8 ° C y 44,9 ° C, respectivamente. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig2.jpg" /> Figura 2. Edad-dependencia de TNTS en ratas y ratones: Un Plotted) son los TNTS de cuatro ratas normales (n = 4) de 21 días de edad determinados por lo menos tres veces al día durante 5 días B) TNTS de ratones littermates determinarse una vez al indicado. las edades. Los números en la parte superior de cada determinación del punto representa el número de camada utilizados. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig3.jpg" /> Figura 3. Las ratas diabéticas se hiperalgésico 3 noseks después de la aparición de la diabetes: TNTS de seis (n = 6) años de edad encontrados adultos jóvenes STZ-ratas diabéticas se determinaron todos los días desde 11 días después de la inducción de la diabetes. Se muestran los promedios diarios de TNT (media ± SEM). TNTS diabéticos determinadas entre 11-13 días después de la inyección de STZ se encontraban dentro del rango normal (línea roja). Dos semanas después de la inyección de STZ TNTS disminuyó significativamente a 45,1 ± 0,4 ° C, (p &lt;0,05). <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig4.jpg" /> Figura 4. Agudas contra nocifensive efectos del compuesto B en ratas diabéticas STZ. Ratas jóvenes adultos normales (azul grupo de n = 12) y la edad coincide con STZ-ratas diabéticas (verde hiperalgésicas grupo n = 6) fueron probados en el iHPAM después de la inyección intraperitoneal de vehículo (barras oscuras) o un compuesto. (barras claras) La media de TNT ± SEM para cada tratamiento (control del vehículo o el compuesto A-tratada) se muestran. Los asteriscos indican diferencias estadísticas(P &lt;0,05).

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Hemos decidido no revelar la identidad del analgésico utilizado en estos experimentos. Parte de los resultados que se muestran aquí se ha presentado en las Sesiones 71 ª Científica de la Asociación Americana de Diabetes (San Diego, CA) y la 47 Reunión Anual de la Asociación Europea para el Estudio de la Diabetes (Lisboa, Portugal).

Al igual que en la prueba de la placa clásico caliente para cuantificar la hiperalgesia térmica 4,13, el ensayo de la nocicepción aquí descrito permite una manera rápida y fiable para cuantificar el comportamiento nocifensive en ratas y ratones. Sin embargo, contrariamente a prueba clásica, el incremento de la placa caliente método es no invasivo y prácticamente libre de estrés. Aunque algunos frenar es necesario realizar la prueba (es decir, el animal debe estar en la cámara de observación), las rat...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td></tr><tr><td> Incremento de la placa caliente Analgesia Meter </td><td> CITI Inc. Ciencias de la Vida </td><td> Parte # PE34 </td></tr><tr><td> Serie suave 8 </td><td> CITI Inc. Ciencias de la Vida </td><td> Parte # Series8 </td></tr><tr><td> Estreptozotocina </td><td> Calbiochem </td><td> 572201 </td></tr></tbody></table>

determinación rápida del umbral nociceptivo térmico en ratas diabéticas

Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats

La neuropatía diabética dolorosa (PDN) se caracteriza por la hiperalgesia, es decir, mayor sensibilidad a los estímulos nocivos, y la alodinia, es decir, hipersensibilidad a estímulos inocuos normalmente 1. Hiperalgesia y alodinia se han estudiado en muchos diferentes modelos de roedores de la diabetes mellitus tipo 2. Sin embargo, según lo declarado por Bölcskei et al, la determinación de &quot;dolor&quot; en modelos animales es un reto debido a su naturaleza subjetiva 3. Por otra parte, los métodos tradicionales utilizados para determinar las respuestas de comportamiento a los estímulos térmicos nocivos por lo general carecen de reproducibilidad y la sensibilidad farmacológica 3. Por ejemplo, utilizando el método de la placa caliente de Ankier 4, estremecerse, la retirada y / o de cualquiera de lamer traseros y / o patas delanteras se cuantifica como los reflejos en las latencias de constantes estímulos térmicos de alta (52-55 ° C). Sin embargo, los animales que son hiperalgésico al estímulo térmico no reproducible muestran diferencias en la reflex latencias que se utilicen los umbrales de temperaturas supra-3,5. Como el método descrito recientemente de Bölcskei et al. 6, los procedimientos descritos aquí permite la determinación rápida, sensible y reproducible de los umbrales térmicos nociceptivos (TNTS) en ratones y ratas. El método utiliza estímulo aumentando lentamente térmico aplicado principalmente a la piel de la superficie de ratón / rata plantar. El método es especialmente sensible para estudiar la lucha contra la nocicepción durante los estados hiperalgésicas como PDN. Los procedimientos descritos abajo se basan en los publicados en detalle por Almási et al 5 y Bölcskei et al 3. Los procedimientos aquí descritos han sido aprobados el Cuidado de Animales de Laboratorio y el empleo (LACUC), Wright State University.

A continuación, describimos un procedimiento rápido fiable y sencillo para determinar la temperatura más baja en la que las ratas o ratones muestran un comportamiento nocifensive,<em&gt; Es decir,</em&gt; El<em&gt; Umbral nociceptivo térmica</em&gt; (TNT). Este método se aplica un estímulo térmico aumentando lentamente permitiendo una estimación precisa y reproducible de TNTS con un mínimo, en su caso, la tensión a los animales.

Determinación rápida del umbral nociceptivo térmico en ratas diabéticas

La neuropatía diabética dolorosa (NDP) se caracteriza por la hiperalgesia, es decir, un aumento de la sensibilidad a los estímulos nocivos, y la alodinia, es decir, una hipersensibilidad...

El objetivo general de este procedimiento es determinar el umbral de nocicepción térmica en ratas control y diabéticas. El primer paso consiste en colocar un animal sobre la placa caliente incremental y el analgesímetro. A continuación, la temperatura de la placa caliente se incrementa gradualmente mientras la superficie se calienta.Se observa al animal en busca de comportamientos ofensivos. Cuando se observa este comportamiento, se detiene el calentamiento y se registra la temperatura de la placa en ese momento. Finalmente, se pueden obtener resultados que muestren cambios en el umbral nociceptivo térmico en animales tratados con analgésicos o que padecen neuropatía diabética dolorosa.La principal ventaja de esta técnica frente a métodos existentes como la placa caliente, que normalmente se ajusta a una temperatura supraliminar, es que nuestros métodos aumentan gradualmente la temperatura de la placa, permitiendo la determinación precisa del umbral nociceptivo térmico. El umbral nociceptivo térmico o TNT se determina mediante el analgesímetro de placa caliente incremental, o IH pam. Los componentes de este sistema incluyen una cámara de observación de plexiglás, una placa de aluminio con control de temperatura, un teclado para programación y un interruptor de pedal para el control remoto del equipo.Los datos se recopilan mediante software personalizado en una computadora cercana. Alternativamente, se pueden imprimir copias físicas utilizando un puerto serial ubicado en el equipo. Coloque un espejo detrás de la cámara de plexiglás para aumentar la visibilidad del comportamiento del animal.A continuación, configure las velocidades de calentamiento deseadas, así como las temperaturas iniciales de espera y finales de corte. Presione el interruptor de pedal para iniciar y detener el sistema. Confirme que se registren las temperaturas iniciales de espera y finales de corte, así como el tiempo que tarda en alcanzar la temperatura final.Si se desea, el investigador puede probar el sistema en sí mismo. Retirar la mano de la placa metálica en el momento del dolor. La percepción no debe causar daño a la piel ni producir molestias posteriores.Comience la aclimatación la noche anterior colocando las jaulas sobre el banco donde se realizará la prueba. Dos horas antes de la prueba, encienda la bandeja de IH para familiarizar a los animales con el ruido de fondo del equipo.En este momento, se puede configurar y probar el sistema como se mostró anteriormente. Después de que los animales se hayan aclimatado al entorno, coloque suavemente una rata en la cámara de plexiglás sobre la superficie cálida. Permita que el animal explore la cámara durante unos minutos.Comience la prueba. Una vez que el animal parezca cómodo para iniciar el ensayo, presione el interruptor de pedal para comenzar a calentar la placa. Observe el comportamiento del animal mientras la placa se calienta.Generalmente, las personas nuevas en este método tendrán dificultades porque la identificación de comportamientos ofensivos masivos no siempre es sencilla y requiere práctica. No se caracteriza ningún comportamiento ofensivo por el lamido, sacudida o elevación de cualquiera de los poros posteriores. Es útil tener en cuenta que el primer comportamiento observado puede ser el lamido de los cuatro poros, seguido de una reacción por parte de los poros posteriores.Cuando se observa un comportamiento muy ofensivo, presione el interruptor de pedal para finalizar el ensayo y devuelva al animal a su jaula de alojamiento. La temperatura que provoca este comportamiento se considera el umbral térmico de nocicepción o TNT del animal control. Se limpia la unidad y se repite la prueba con el siguiente animal.A continuación se presentan los umbrales térmicos de nocicepción en ratas y ratones jóvenes adultos normales. Los datos aquí mostrados indican que el UMT de las ratas no varió cuando se evaluaron durante un período de cuatro días. De manera similar, el UMT de los ratones fue constante entre diferentes edades.En este ejemplo, se midieron repetidamente los TN TS de ratas diabéticas inducidas con STZ en edad adulta joven. Se puede observar una disminución constante en los umbrales nociceptivos térmicos a partir de dos semanas después de la inducción de la diabetes. Aquí, se utilizó la IH pam para evaluar las propiedades antinociceptivas agudas del compuesto analgésico.A, el compuesto produjo un efecto analgésico leve en animales control en comparación con aquellos que recibieron vehículos. Sin embargo, la analgesia fue más pronunciada en animales diabéticos que recibieron el compuesto en comparación con los controles tratados con vehículo. Al intentar este procedimiento, es muy importante recordar monitorear continuamente el comportamiento del animal, particularmente los eventos que ocurren cerca del cept T del animal.

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Neurociencia

Algoritmos de evaluación de los umbrales de dolor mecánico y el calor en la piel inflamada forma experimental los sujetos de estudio humanos se muestran. Los dos paradigmas dolor prueba independiente examine el procesamiento nociceptivo por las dos principales poblaciones periféricas de fibras nerviosas de la transmisión del dolor, es decir, no mielinizadas fibras C y pequeñas mielinizadas fibras A-delta.

Determinar el calor y el umbral de dolor mecánico en la piel inflamada de los sujetos humanos

Debido a la simplicidad de la cirugía y el resultado del comportamiento robusto, constricción crónica del nervio ciático es uno de los modelos animales de pre-eminentes de dolor neuropático. Dentro de las 24 horas siguientes a la cirugía, la hipersensibilidad del dolor se establece y se puede medir cuantitativamente utilizando una de von Frey aesthesiometer (ensayos mecánicos) y el medidor de la analgesia plantar (ensayo térmico).

La constricción crónica del nervio ciático y pruebas de hipersensibilidad dolor en ratas

Se describe un protocolo para examinar el desarrollo de la hiperalgesia y la tolerancia en ratones inducida por opioides. Sobre la base de la medición de las respuestas nociceptivas térmicas y mecánicas de los animales no tratados previamente y tratados con morfina, que permite cuantificar el aumento en la sensibilidad al dolor (hiperalgesia) y disminuir en la analgesia (tolerancia) asociada con la administración de opiáceos crónica.

Evaluación de la hiperalgesia inducida por la morfina y analgésicos Tolerancia en ratones utilizando térmicas y mecánicas Modalidades nociceptivos

Este trabajo presenta la metodología de la aplicación de ultrasonido enfocado intensidad alta para bloquear los potenciales de acción de nervios neuropáticos diabéticos.

Instrumento ultrasónico para la conducción del nervio bloquear en modelos de rata diabética

Aquí se proporciona un protocolo que detalla los pasos para establecer un modelo animal de dolor crónico post-isquemia (CPIP). Este es un modelo bien reconocido que imita el síndrome de dolor regional complejo humano tipo I. Se evalúan más a fondo las hipersensibilidades mecánicas y térmicas, así como los comportamientos nocifensos inducidos por la capsaicina observados en el modelo de rata CPIP.

Modelo de dolor crónico post-ischemia para el síndrome de dolor regional complejo tipo I en ratas

La cirugía modificada es un método simplificado para el modelo de lesión nerviosa sin nervios en ratones o ratas que requiere solo una ligadura y un corte para lesionar los nervios peroneo y sural comunes.

Modelo modificado de cirugía de lesión nerviosa preservada del dolor neuropático en ratones

Para desarrollar nuevas intervenciones terapéuticas para la prevención y el tratamiento del dolor de espalda, se requieren modelos animales para examinar los mecanismos y la efectividad de estas terapias desde una perspectiva traslacional. El presente protocolo describe la prueba BMS, un método estandarizado para evaluar la sensibilidad mecánica de la espalda en la rata.

Evaluación de la sensibilidad mecánica de la espalda en la rata para la investigación mecanicista del dolor de espalda crónico

Este protocolo describe la evaluación de la hipersensibilidad mecánica en un modelo de rata de dolor orofacial neuropático utilizando un dispositivo de evaluación del dolor orofacial basado en operantes.

Evaluación de la hipersensibilidad mecánica inducida por lesión nerviosa en ratas mediante un ensayo de dolor operante orofacial

La ligadura parcial del nervio ciático induce dolor neuropático crónico de larga duración, caracterizado por respuestas exageradas a estímulos térmicos y mecánicos. Este modelo de ratón de dolor neuropático se usa comúnmente para estudiar terapias innovadoras para el manejo del dolor. Este artículo describe en detalle el procedimiento quirúrgico para mejorar la estandarización y la reproducibilidad.

Ligadura parcial del nervio ciático: un modelo de ratón de dolor neuropático crónico para estudiar el efecto antinociceptivo de nuevas terapias

Presentamos un protocolo utilizando el simulador de manipulación de tuina para realizar la terapia de tuina "Three-Manipulation and Three-Acupoint" para ratas con lesiones crónicas menores por constricción y evaluar los puntos de tiempo analgésicos efectivos de tuina dentro de las 24 h mediante la prueba de los cambios en el dolor a través del análisis del comportamiento y los cambios en la expresión del factor inflamatorio utilizando un ensayo de inmunoadsorción ligado a enzimas.

Características de los cambios en el dolor en ratas con lesión nerviosa dentro de las 24 horas posteriores a la intervención única con Tuina

Los avances recientes en la investigación del dolor destacan el potencial de la fotoneuromodulación utilizando diodos emisores de luz verde (GLED) como tratamiento no farmacológico. GLED modula las vías del dolor, ofreciendo un alivio eficaz del dolor. Este artículo tiene como objetivo estandarizar y refinar los protocolos de exposición a GLED, mejorando la consistencia entre estudios y avanzando en la aplicación clínica de esta terapia.

Optimización de las técnicas de fotoneuromodulación para evaluar el papel de los diodos emisores de luz verde en el tratamiento del dolor

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