21 de diciembre de 2012
La pérdida de integridad peritoneal proporciona un nuevo paradigma para entender y tratar el dolor pélvico crónico en mujeres con formas leves de endometriosis y puede ser fácilmente detectado usando la instilación intraoperatoria de colorante en el momento de la laparoscopia.
El objetivo general del siguiente experimento es proporcionar a los profesionales que tratan a mujeres con dolor pélvico un método sencillo para resaltar la presencia y extensión de la endometriosis sutil. Esto se logra primero realizando un examen de la endometriosis visible para identificar la enfermedad evidente. Como segundo paso, se aplica un tinte azul de metileno, que muestra áreas de endometriosis sutil que podrían pasar desapercibidas durante la laparoscopia convencional.
A continuación, se resecan todas las áreas teñidas de azul para eliminar por completo la enfermedad en el paciente. Los resultados obtenidos mediante microscopía electrónica de barrido muestran que este enfoque elimina la endometriosis invisible que afecta las células peritoneales subyacentes, lo que a su vez permite que la sangre menstrual u ovulatoria acceda a los nervios sensoriales que inervan la pelvis, causando dolor. Las implicaciones de esta técnica se extienden tanto al diagnóstico como al tratamiento de la endometriosis, ya que nos permite identificar formas sutiles e incluso invisibles de endometriosis que podrían alterar la superficie peritoneal y permitir que la sangre entre en contacto con los nervios situados debajo de los tejidos, explicando así el dolor que experimentan estas pacientes.
Normalmente durante la ovulación o la menstruación, algo de sangre entra en la cavidad pélvica. El revestimiento de la pelvis y el abdomen contiene una capa intacta de mesotelio que evita que esta sangre o los factores presentes en la sangre que causan dolor interactúen con las fibras nerviosas sensoriales. En mujeres con endometriosis, las células endometrioides inflamatorias pueden provocar que las células peritoneales pierdan sus contactos intercelulares, permitiendo que la sangre acceda a los tejidos subyacentes y a las fibras nerviosas.
Estos espacios en las células mesoteliales pueden observarse mediante microscopía electrónica de barrido, pero también son la razón por la que el colorante azul puede teñir los tejidos subyacentes donde lo hace. Se entrevista primero a las mujeres que experimentan dolor pélvico crónico para determinar su historial médico y los detalles relacionados con la localización del dolor y su momento respecto al ciclo menstrual; se anotan y registran los síntomas asociados, incluyendo quejas de intestino irritable o quejas vesicales. Además, se realiza un examen físico a la paciente una vez que se ha llevado a cabo la selección de la paciente.
Asegúrese de solicitar a las mujeres sometidas a laparoscopia el consentimiento para la posible resección de endometriosis y el uso de sus tejidos para investigación. Realice la laparoscopia utilizando técnicas estándar a través de un puerto umbilical de cinco milímetros y puertos adicionales de cinco milímetros en la parte inferior del abdomen. Inspeccione cuidadosamente la pelvis para correlacionar cualquier hallazgo de endometriosis con la localización preoperatoria del dolor indicada por la paciente.
A continuación, mezcle el colorante azul de metileno en una proporción de uno a 200 con solución salina estéril y utilice una aguja de aspiración para inyectar la solución sobre las superficies pélvicas. Luego, realice irrigación con succión para eliminar el exceso de colorante y enjuagar las superficies peritoneales. Inspeccione nuevamente con cuidado la pelvis y registre cualquier área con absorción de colorante azul.
Siempre que sea posible, realice una resección de las áreas afectadas del peritoneo. Una vez completada la resección, inspeccione la pelvis para confirmar que no haya sangrado. A continuación, libere el gas CO2, retire los instrumentos y cierre las incisiones con un adhesivo tisular.
Tras permanecer una hora en la sala de recuperación, se permite al paciente regresar a casa. Para documentar la endometriosis invisible mediante microscopía electrónica de barrido, primero suturar secciones peritoneales a una gasa estéril para aplanar la muestra y mantener la orientación con la cara intraperitoneal hacia arriba. Luego colocar las secciones en fijador de glutaraldehído para MEB. Una vez convenientemente fijadas, las muestras pueden procesarse para microscopía electrónica de barrido en un paciente diferente con resección previa de endometriosis de la vejiga que ya no presenta dolor en esa región.
El colorante no tiñó las superficies peritoneales, lo que respalda la relación entre la tinción con colorante azul y la presencia de dolor pélvico. Esta imagen de la superficie peritoneal fue tomada de una mujer con dolor pélvico crónico y síntomas vesicales que empeoraron durante la menstruación. La imagen laparoscópica se obtuvo antes de la aplicación del colorante azul y, únicamente la reflexión de la luz laparoscópica, mostró áreas sospechosas de lesiones claras de endometriosis, como indican las flechas. En esta imagen tomada en la misma zona, puede observarse que el colorante azul aplicado sobre la vejiga tiñó porciones definidas del peritoneo.
Esta imagen muestra una resección del peritoneo que recubre la vejiga, y esta imagen muestra las células de esta zona tal como se observan mediante microscopía electrónica de barrido. La muestra se preparó según procedimientos estándar y se recubrió por pulverización con una aleación de oro y platino hasta un grosor de 20 nanómetros. Puede observarse que el peritoneo está recubierto por células que se cree que son endometriosis, y que las células mesoteliales del peritoneo presentan espacios en sus contactos intercelulares, exponiendo la matriz extracelular subyacente.
En cambio, esta imagen de microscopio electrónico de barrido de una muestra normal de peritoneo preparada de la misma manera muestra que las células epiteliales del peritoneo normal están estrechamente conectadas. Como puede observarse, esta es una técnica bastante sencilla que puede utilizarse junto con sus procedimientos laparoscópicos para ayudar a identificar la endometriosis sutil e invisible que está causando permeabilidad en las superficies peritoneales. Al resecar toda la lesión junto con todas las células endometrioides, se le brinda al paciente la mejor oportunidad de alivio del dolor.
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Este estudio presenta un método para detectar endometriosis leve en mujeres con dolor pélvico crónico. Mediante el uso de colorante azul de metileno durante la laparoscopia, los médicos pueden identificar y resecar áreas de endometriosis que podrían no ser visibles mediante técnicas convencionales.
Este estudio presenta una técnica basada en el colorante azul de metileno para detectar la endometriosis leve durante la laparoscopia, abordando una laguna diagnóstica clave en mujeres con dolor pélvico crónico. Al permitir la visualización y la resección de la pérdida de la integridad peritoneal, el método apoya la eliminación de riesgos mecanicistas en la investigación de la endometriosis y podría mejorar la validación de objetivos en estudios de vías del dolor. El enfoque ofrece una herramienta reproducible y de baja complejidad para modelos preclínicos que investigan las interacciones entre el peritoneo y los nervios en el dolor pélvico.
El método se integra en la línea de investigación sobre endometriosis, desde el descubrimiento inicial (prueba de hipótesis mediante absorción de colorante) hasta la validación preclínica (confirmación ultraestructural) y la intervención terapéutica (resección), favoreciendo la reducción iterativa de riesgos del objetivo.