Name: Técnica quirúrgica para la entrega de la Médula Espinal de Terapias: Demostración de Procedimiento en Göttingen minipigs (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-12-07T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 23 s
Description: Aprende una técnica quirúrgica para entregar terapias génicas y celulares en la médula espinal usando minipigs Göttingen. Este método mejora la precisión y seguridad en neurocirugía.

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Damos las gracias a la Dirección de la Universidad Emory de Animal personal de Recursos para la atención veterinaria. Las fuentes de financiamiento incluyen: ALS Association, Departamento de Defensa, y Neuralstem Inc.,

1. Uso Animal Procedimientos demostrado en este documento han sido aprobados por el Cuidado de Animales institucional de la Universidad Emory y el empleo Comisión (IACUC). Mujer minipigs Göttingen kg de peso aproximadamente 15-20 se utilizan. 2. Anestesia Los animales se mantienen en ayunas aproximadamente 12 h antes de la cirugía. Animal sedación y la inducción de la anestesia constan de un cóctel de ketamina intramuscular (35 mg / kg), acepromazina (1,1 mg / kg), y atropina (0,04 mg / kg). Los animales son luego intubados y mantenido en oxígeno y 1-3% isoflurano anestesia general. En este punto, la espalda y la cabeza de cada animal se afeita. Profundidad de la anestesia se monitoriza por el personal veterinario. Ausencia de reflejos interdigitales, córnea y los párpados, así como la frecuencia cardíaca y respiratoria, la oximetría de pulso, directa / indirecta la presión arterial, final de la espiración mediciones de dióxido de carbono y el tono muscular / respuesta a los estímulos nocivos se utilizan para controlar la profundidad<html> de la anestesia. 3. Posicionamiento Los animales son llevados a la sala de operaciones y se coloca en una posición boca abajo sobre un marco personalizado diseñado para imitar la posición pacientes en una tabla espinal Jackson quirúrgico. El marco utiliza eslingas ajustables que se colocan bajo el tórax y la pelvis del animal, permitiendo que el abdomen para colgar libre y, por lo tanto, minimizar la presión sobre el abdomen y el pecho y sangrado consecuente venoso epidural (Figura 1). El marco también proporciona la inmovilización externa de la columna vertebral para el procedimiento 1. Además, los animales se colocan en una climatizada recirculación almohadilla para mantener la temperatura corporal y una vena marginal de la oreja cateterizó para la administración de fluidos y cualquier suministro de fármaco necesario durante la cirugía. Finalmente, el campo quirúrgico se prepara con alcohol y solución Chlorhexadine o Betadine y paños quirúrgicos se colocan en el campo quirúrgico. le &quot;&gt; 4. Laminectomía Se hace una incisión de aproximadamente 10-15 cm de piel se realiza y la musculatura paravertebral se diseca de la columna vertebral bilateralmente. A continuación, un dorsal multi-nivel laminectomía se realiza. Los procesos de lámina y apófisis espinosas de las tres vértebras suprayacente C3-C5 o L2 L4-segmentos se eliminan mediante gubia y un taladro quirúrgico. 5. La colocación de la torre de perforación espinal Llamamos Derrick Spinal el dispositivo diseñado para la entrega de genes (y célula) terapias en el 2-5 de la médula espinal. Una discusión detallada sobre el diseño y evolución de este dispositivo se puede encontrar en Riley et al., 2011. 4 Para fijar el dispositivo al paciente, mensajes percutáneas se coloca a través de incisiones en la piel de 1 cm por encima y por debajo de la incisión primaria y montado en la lámina por encima y por debajo de la incisión primaria. A continuación, dos retractores integrados están unidos a la four percutáneas puestos de arriba y por debajo del sitio de la incisión para exponer el área de la columna vertebral que ha sido objeto de laminectomía. 6. Apertura Dural Con la ayuda de una herramienta dental Woodson y una cuchilla 11, una incisión de 2,5 cm se realiza a través de la duramadre, la exposición de la médula espinal. La duramadre se refleja fuera de la capa pial utilizando sutura Nurolon 4-0 y se asegura a la musculatura paravertebral profunda. Empanadas quirúrgicos se colocan en los extremos rostral y caudal de la abertura. Estos proporcionan una barrera parcial al flujo de fluido cerebroespinal y también proporcionar un blanco seguro para los cirujanos para colocar ventosas sin dañar el cable. En los seres humanos, bajo un aumento de microscopio quirúrgico, la superficie de la piamadre se diseca en este punto. Debido a limitaciones técnicas, este procedimiento no es necesario o factible en los animales. 7. Inyecciones de la médula espinal y el Desplazamiento lateral de la torre de perforación espinal para inyección adicionals Inmediatamente antes de las inyecciones, un bolo de metilprednisolona (125 mg, IV) se administra para prevenir la inflamación de la médula espinal. En este punto, el sistema de barandilla de la plataforma está conectada y las barandas laterales se ajustan para adaptarse a la longitud apropiada. La góndola es top-cargado en las barras 2 y la unidad Z está montado en la junta universal. A continuación, la cánula cargado se coloca en el microdrive. Uso de la junta universal en la plataforma de la microinyección, los ángulos coronal y sagital se ajustan para asegurar una trayectoria ortogonal a la superficie de las inyecciones en la columna seguir la colocación de la cánula. La aguja se posiciona en consecuencia medial a la zona de entrada de la raíz dorsal (DREZ). El DREZ se identifica bajo un aumento de 3,5 X lupa quirúrgica y penetrado en una trayectoria ortogonal a la superficie del cable en un punto &lt;1 mm medial. En los seres humanos, una resonancia magnética preoperatoria proporciona una línea de base de evaluación of dimensiones de la médula espinal para la planificación operativa. Además, el espesor de la médula espinal se mide para determinar la profundidad del objetivo de la asta ventral. La suspensión se infunde a una profundidad de 4 mm de contacto pial. Una brida de plástico Ultem sirve de tope en la superficie pia para evitar que la aguja avanza más profunda de lo deseado. Una vez que la punta de la aguja se posiciona en el objetivo, el manguito de metal exterior rígido se tira hacia arriba, dejando expuesto el tubo flexible. Una vez que se termine la inyección, la aguja se deja en su lugar durante 1 min para prevenir el reflujo de células hasta el tracto cánula de inyección. Hay que tener cuidado para evitar la vasculatura superficie ligeramente el ajuste de la lateralidad o microdrive sea Rostro caudalmente. Un poco de sangrado de los sitios de penetración puede ocurrir. Cuando dicho sangrado es encontrado, empanadas micro se coloca sobre el sitio de punción sangrado y se aplica succión para que absorbe y expulsa la sangre fuera de la cánula Penetración sitio y evitar la acumulación en el cable. Esta forma fiable permite que la sangre se coagule. Cauterio se evita como es la presión directa. Después de la retirada la aguja, el aparato estereotáxico se trasladó a la zona diana próxima a lo largo del eje rostro-caudal, separadas por 2 o 4 mm o que sean necesarios para evitar los vasos sanguíneos visibles en la superficie dorsal de la médula espinal. Este proceso se repite tantas veces como se propone en un estudio dado. 8. Floating Cánula Una cánula de infusión personalizada de diámetro pequeño, se utiliza para las inyecciones. La cánula consiste en una aguja biselada 30-calibre de longitud fija conectada a un manómetro 30-tubo flexible silastic de longitud variable. El extremo distal está equipado con un bloqueo luer Hamilton que está conectado a una bomba de microinyector. El tubo de Silastic proximal está envainado dentro de una cánula de calibre 24-exterior rígido que asientos en el extremo proximal de la brida de aguja de inyección. Esta brida de dos asientosla cánula exterior y sirve como un tope de profundidad para la aguja de inyección. Para cada inyección, el volumen apropiado de una suspensión terapéutico se infunde por una. Mediante un pre-calibrada Minj-PD microinyector bomba (Tritech Research, Inc., Los Angeles, CA) a una velocidad de 5 l por minuto 9. Cierre Una vez que todas las inyecciones se han hecho, la torre de perforación espinal se quita suavemente y se cierran las incisiones en cuatro capas. La duramadre se cierra utilizando un 4,0 Nurolon puntada, de una manera estanca. 0 sutura Vicryl se utiliza para la capa muscular profundo. Fascia se cierra con sutura Vicryl 0 también de una manera estanca. La capa dérmica se cerró finalmente con 2,0 Vicryl, con una sutura. El cierre cutáneo se completa con una sutura de nylon 3-0. 10. Recuperación y Manejo del Dolor Los animales son extubados y monitoreados durante 2 hr recuperación de la anestesia siguiente. A continuación, los animales se transfieren al individuo cedades y controlarse al menos una vez al día para el consumo de alimentos, la defecación, la micción y. Para el manejo del dolor, un parche transdérmico de fentanilo (75 mcg) está grapado en la parte posterior de los animales durante tres días de la analgesia postoperatoria. Además, buprenorfina (0,05 mg / kg, BID, IM) también se puede administrar por hasta tres días después de la operación. 11. Resultados y resultados representativos Las observaciones clínicas y el comportamiento se realizan antes de la cirugía y después se graban en los días 1 a 7 y semanalmente hasta parámetro de acuerdo con el diseño del estudio. Datos de conducta se recoge para evaluar la morbilidad neurológica a lo descrito previamente 6. La función sensorial se evaluó mediante la presencia o ausencia de una respuesta de retirada a un estímulo mecánico a los dedos de los pies de las extremidades delanteras y traseras. La función motora sigue la puntuación de Tarlov (Tabla 1): 0 - Parálisis, sin movimiento; 1 - tono perceptible en las extremidades traseras, m leveOVIMIENTO, 2 - Movimiento de las extremidades traseras, pero incapaz de sentarse o estar de pie, 3 - Capacidad para ponerse de pie y caminar, pero atáxica y por períodos cortos; 4 - La recuperación completa, la función motora normal. Seguridad del procedimiento se determina por la capacidad de un animal para volver a pre-operatorio línea de base. Déficit neurológicos transitorios en su mayoría deben resolver entre el post-operatorio días 1 y 7, con algunas variaciones dependiendo de las razas animales y los procedimientos (número de inyecciones, entre otros parámetros). Morbilidad permanente se define por déficits neurológicos duraderos que no se resuelven por el tiempo que los animales alcanzar el punto final predeterminado IACUC (Figura 2).

<ol><li>Usvald, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+dosing+regimen+and+reproducibility+of+intraspinal+grafting+of+human+spinal+stem+cells+in+immunosuppressed+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Analysis of dosing regimen and reproducibility of intraspinal grafting of human spinal stem cells in immunosuppressed minipigs.</a> Cell Transplant. 19, 1103-1122 (2010).</li>
<li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+spinal+cord+therapeutics+delivery%3A+stabilized+platform+and+microelectrode+recording+guidance+validation%5BTitle%5D)+AND+%22Stereotact.+Funct.+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Targeted spinal cord therapeutics delivery: stabilized platform and microelectrode recording guidance validation.</a> Stereotact. Funct. Neurosurg. 86, 67-74 (2008).</li>
<li>Federici, T., Riley, J., Park, J., Bain, M., Boulis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+safety+validation+of+a+stabilized+viral+vector+direct+injection+approach+to+the+cervical+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Transl.+Sci%22%5BJournal%5D)">Preclinical safety validation of a stabilized viral vector direct injection approach to the cervical spinal cord.</a> Clin. Transl. Sci. 2, 165-167 (2009).</li>
<li>Riley, J. P., Raore, B., Taub, J. S., Federici, T., Boulis, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platform+and+Cannula+Design+Improvements+for+Spinal+Cord+Therapeutics+Delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Platform and Cannula Design Improvements for Spinal Cord Therapeutics Delivery.</a> Neurosurgery. 69, 147-154 (2011).</li>
<li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+spinal+cord+therapeutics+delivery%3A+preclinical+safety+validation+of+a+stabilized+microinjection+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Cervical spinal cord therapeutics delivery: preclinical safety validation of a stabilized microinjection platform.</a> Neurosurgery. 65, 754-761 (2009).</li>
<li>Raore, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+multilevel+intraspinal+stem+cell+therapy%3A+assessment+of+surgical+risks+in+Gottingen+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Cervical multilevel intraspinal stem cell therapy: assessment of surgical risks in Gottingen minipigs.</a> Spine. 36, 164-171 (2011).</li>
<li>Boulis, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translational+stem+cell+therapy+for+amyotrophic+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Translational stem cell therapy for amyotrophic lateral sclerosis.</a> Nat. Rev. Neurol. , (2011).</li>
<li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraspinal+Stem+Cell+Transplantation+in+ALS%3A+A+Phase+I+Safety+Trial%2C+Technical+Note+%26+Interim+Safety+Outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Intraspinal Stem Cell Transplantation in ALS: A Phase I Safety Trial, Technical Note & Interim Safety Outcomes.</a> Neurosurgery. 71 (2), 405-416 (2012).</li>
<li>Boulis, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+intraspinal+injection+of+neural+stem+cells+in+patients+with+ALS%3A+results+of+a+Phase+I+trial+in+12+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Lumbar intraspinal injection of neural stem cells in patients with ALS: results of a Phase I trial in 12 patients.</a> Stem Cells. 30 (6), 1144-1151 (2012).</li>
</ol>

Dr. Boulis es el inventor de dispositivos para permitir la inyección segura y precisa de la médula espinal humana. Neuralstem, Inc. ha adquirido una licencia exclusiva de esta tecnología. Dr. Boulis recibido una cuota de inventarios de esta tarifa, y tiene los derechos de pago de regalías para la distribución de esta tecnología. Otros autores no tienen nada que revelar.

A pesar de la aprobación para proceder con la técnica descrita en los seres humanos 7-9, preguntas críticas siguen sin respuesta en orden para las terapias de la médula espinal para tener éxito. Una comprensión rigurosa de la tolerancia de la médula espinal a la inyección intraparenquimatosa es necesaria para permitir la planificación y ejecución de los ensayos de desarrollo de terapias para desmielinizante y degenerativa y enfermedad traumática de la médula espinal. Actualmente, no hay un entendimie...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre del equipo </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentarios (opcional) </td></tr><tr><td> Derrick Espinal </td><td> Neuralstem, Inc. </td><td></td><td> Neuralstem, Inc. ha adquirido una licencia exclusiva de esta tecnología </td></tr><tr><td> Minj-PD Microinyector bomba </td><td> Tritech Research, Inc. </td><td></td><td> Personalizada para esta aplicación específica </td></tr><tr><td> Floating Cánula </td><td> Neuralstem, Inc. </td><td></td><td> Diseñado especialmente para esta aplicación específica </td></tr></tbody></table>

técnica quirúrgica para la entrega de la médula espinal de terapias: demostración de procedimiento en göttingen minipigs

Surgical Technique for Spinal Cord Delivery of Therapies: Demonstration of Procedure in Gottingen Minipigs

Esta es una descripción visual compacta de una combinación de la técnica quirúrgica y dispositivo para el suministro de gen (y célula) terapias en la médula espinal. Mientras que la técnica se muestra en el animal, el procedimiento es aprobado por la FDA y se utiliza actualmente para el trasplante de células madre en la médula espinal de pacientes con ELA. Aunque la FDA ha reconocido la prueba de principio de los datos sobre la eficacia terapéutica en modelos de roedores altamente caracterizados, el uso de animales de gran tamaño se considera crítico para la validación de la combinación de un procedimiento quirúrgico, un dispositivo, y la seguridad de una terapia definitiva para el uso humano . El tamaño, la anatomía, y la vulnerabilidad general de la columna vertebral y la médula espinal de los cerdos se reconocen mejor modelo para el humano. Además, el proceso quirúrgico de exponer y de la manipulación de la médula espinal, así como el cierre de la herida en el cerdo es virtualmente indistinguible de la humana. Creemos que el modelo de cerdo sano representa un críticocal primera etapa en el estudio de seguridad de procedimiento.

<table border="1"><tbody><tr><td colspan="2"> Puntuación de Tarlov </td></tr><tr><td> 0 </td><td> Parálisis, sin movimiento </td></tr><tr><td> 1 </td><td> Tono perceptible en las extremidades traseras, movimiento leve </td></tr><tr><td> 2 </td><td> El movimiento de las extremidades posteriores, pero incapaz de sentarse o estar de pie </td></tr><tr><td> 3 </td><td> Capacidad para ponerse de pie y caminar, pero atáxica y por períodos cortos </td></tr><tr><td> 4 <...

Breve descripción visual de la técnica quirúrgica y el dispositivo utilizado para la entrega de genes (y célula) terapias en la médula espinal. La técnica se muestra en el animal, pero es totalmente trasladable y actualmente se utiliza para la aplicación humana.

Técnica quirúrgica para la entrega de la Médula Espinal de Terapias: Demostración de Procedimiento en Göttingen minipigs

Esta es una descripción visual compacta de una combinación de técnica quirúrgica y dispositivo para la administración de terapias (génicas y celulares) en la médula...

El objetivo general de este procedimiento es administrar de forma segura y dirigir con precisión terapéuticos biológicos a sitios intraparenquimatosos específicos de interés dentro de la médula espinal. Esto se logra primero preparando al animal para la cirugía. A continuación, se realiza la laminectomía y se ensambla el aparejo espinal.Luego se abre la duramadre y se realizan las inyecciones intraspinas. Finalmente, se cierran la musculatura, la fascia y la piel de la duramadre. En última instancia, se pueden obtener resultados que muestren la seguridad y los efectos sobre el blanco mediante la recopilación de datos conductuales y de localización.La técnica mostrada en el presente manuscrito consiste en el uso de una plataforma estabilizadora, así como de una cánula flexible para la administración de una carga biológica en la médula espinal. Las ventajas de este enfoque son que permite una administración precisa, sustituyendo a las técnicas estereotácticas convencionales, que son difíciles de aplicar en la médula espinal debido a su movilidad. Además de la precisión, la técnica proporciona un margen de seguridad frente al movimiento del paciente.En este caso, un cerdo no sufre daño en la médula espinal debido a la plataforma inmovilizadora y al movimiento de la médula espinal dentro del canal que ocurre durante la respiración y el latido cardíaco, lo cual no provoca un daño adicional a la médula espinal gracias a la flexibilidad de la cánula. Después de ayunar al cerdo miniatura durante 12 horas y sedarlo mediante una inyección intramuscular de ketamina, ace, promazina y atropina, entube al animal y manténgalo con oxígeno y 1 a 3% de isoflurano. Monitoree la profundidad de la anestesia según se indica en el protocolo escrito.Corte el pelo de la espalda y la cabeza del animal. Transporte al animal sedado al quirófano y colóquelo en posición prona sobre un marco personalizado para imitar la posición en una mesa quirúrgica espinal Jackson. El marco utiliza correas ajustables colocadas debajo del tórax y la pelvis del animal, lo que permite que el abdomen cuelgue libremente, minimizando así la presión sobre el abdomen y el tórax, y consecuentemente la hemorragia venosa epidural.El armazón también proporciona inmovilización externa de la columna vertebral. Para el procedimiento, coloque al animal sobre una almohadilla térmica de recirculación para mantener la temperatura corporal. A continuación, inserte un catéter en la vena marginal de la oreja para la administración de fluidos y la entrega de fármacos durante la cirugía.Luego prepare el campo quirúrgico con alcohol y clorhexidina o solución de Betadine y coloque campos quirúrgicos sobre el área operatoria. Realice una incisión cutánea de 10 a 15 centímetros y use electrocauterio monopolar para disecar bilateralmente la musculatura paravertebral. A continuación, inicie una laminectomía dorsal multianular utilizando Ron jewels y un taladro quirúrgico para remover los procesos espinosos y realizar una laminotomía de las vértebras que sobreyacen a los segmentos C3 a C5 o L2 a L4.El Derrick espinal es un dispositivo diseñado para administrar terapias génicas y celulares en la médula espinal; para asegurar el dispositivo al paciente, realice incisiones cutáneas de un centímetro por encima y por debajo de la incisión principal. Coloque postes percutáneos a través de las incisiones y sujételos a la lámina para exponer el área requerida de la médula espinal y completar la laminectomía. Inserte las láminas retráctiles integradas y conéctelas al Derrick.Retraiga el tejido mientras tira hacia arriba de los procesos espinosos. Corte los ligamentos interespinosos y el ligamento flavo y complete la laminectomía. La cánula consta de una aguja de calibre 30 unida a un tubo plástico de calibre 30 con dos vainas metálicas, una vaina externa móvil y una vaina interna inmóvil.Utilizando una jeringa Hamilton con bloqueo de cebo conectada a una bomba microinyectora, ajuste el extremo distal y coloque una cánula externa de calibre 24 en el extremo proximal de la brida y vaina de la aguja de inyección, y exponga el extremo proximal para acceder a la médula espinal. Primero, administre una dosis rápida de metilprednisolona. Luego, coloque cuidadosamente el ataque para levantar la duramadre de la médula.Utilice una herramienta dental Woodson y una hoja número 11 para realizar una incisión de 2,5 centímetros a través de la duramadre. Luego, utilice sutura de nulón 4-0 para reflejar la duramadre lejos de la capa de pelado y fijarla a la musculatura paravertebral profunda. Coloque compresas quirúrgicas alrededor de la médula espinal.Luego, coloque el sistema de rieles de la plataforma por la parte superior primero, cargando la góndola sobre las dos barras y montando el accionador Z en la junta universal. A continuación, coloque la cánula cargada en el microaccionador y utilice la junta universal en la plataforma de microinyección para ajustar los ángulos coronal y sagital, lo que garantizará una trayectoria ortogonal a la superficie de las inyecciones espinales y seguirá la colocación de la cánula. Luego, posicione la aguja medial a la zona de entrada de la raíz dorsal o dres, y tire hacia arriba del manguito externo metálico rígido, dejando expuesto el tubo flexible.Utilizando una bomba inyectora microcalibrada, inyecte en el sitio objetivo. Luego, deje la aguja en su lugar durante un minuto adicional para prevenir el reflujo celular a través del tracto de inyección de la cánula. Después de retirar la aguja, reubique el aparato estereotáxico en el siguiente sitio objetivo, a dos o cuatro milímetros de distancia a lo largo del eje rostral-caudal, evitando los vasos sanguíneos visibles en la superficie dorsal de la médula espinal.Después de retirar suavemente la espina dorsal, Derrick utilizó sutura neural 4-0 para cerrar la duramadre de forma hermética. Una vez cerradas las capas musculares profundas y la fascia con sutura de Vicryl, use sutura de nylon 3-0 para cerrar la piel; tras la recuperación de la anestesia, extubee y supervise al animal durante dos horas. Para la analgesia postoperatoria, coloque una parche transdérmico de fentanilo sujeto con grapa en la espalda del animal durante tres días.Además, administre buprenorfina durante hasta tres días posteriores a la cirugía si es necesario. Luego, transfiera el animal a una jaula individual y monitórelo al menos una vez al día. Se recopilan datos sobre el consumo de alimento, la defecación y el comportamiento relacionado con la micronutrición para evaluar la morbilidad neurológica.Como se describió previamente, la seguridad del procedimiento se determina por la capacidad de un animal para regresar al estado basal previo a la cirugía. Los déficits neurológicos transitorios deberían resolverse principalmente entre el primer y séptimo día posoperatorio, con algunas variaciones según la raza y el procedimiento. La morbilidad permanente se define por déficits neurológicos persistentes que no se resuelven para el momento en que los animales alcanzan el punto final predeterminado por el iacuc tras seguir este procedimiento.Otros métodos, como la inmunoquímica, pueden utilizarse para determinar datos importantes, como la viabilidad de las células, la migración de las células y la precisión de la inyección.

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El uso de cerdos domésticos y en miniatura en la ciencia se ha incrementado significativamente en los últimos años. Mediante la demostración de cómo llevar a cabo la intubación, cateterización transuretral de la vejiga, la arteria femoral y cateterización de la vena, así como la perfusión transcardial, nuestro objetivo es aumentar aún más el valor de cerdos enanos Göttingen en la investigación biomédica.

Técnicas de Cirugía Básica en el minipig Göttingen: intubación, cateterización de la vejiga, el cateterismo femoral del buque, y perfusión Transcardial

Fuente: Unger, M. D., et al., Laminotomy for Lumbar Dorsal Root Ganglion Access and Injection in Swine. J. Vis. Exp. (2017)Este video muestra un procedimiento de laminotomía en un cerdo anestesiado para acceder al ganglio de la raíz dorsal lumbar para una administración neuroterapéutica dirigida mediante administración mejorada por convección.

Laminotomía para inyección dirigida en el ganglio de la raíz dorsal lumbar en un modelo de cerdo

Este video muestra la implantación de una matriz de electrocorticografía blanda y las grabaciones corticales a largo plazo en un minipig. Describe los pasos necesarios para implantar quirúrgicamente la matriz sobre la corteza auditiva del minipig y registrar los potenciales de acción neuronales evocados por estímulos sonoros y de referencia.

Implante subdural de un array de electrocorticografía blanda para el registro de electrofisiología cortical en minipigs

El tratamiento de la lesión de la médula espinal cervical con péptidos autoensamblables (SAP) y células precursoras neurales (NPC), junto con factores de crecimiento, es un enfoque prometedor para promover la regeneración y la recuperación. Se establece un modelo de clip de aneurisma de contusión/compresión en ratas de LM cervical y tratamiento combinado que incluye inyección de SAP y trasplante de NPC.

El uso sinérgico de las células precursoras neuronales y Péptidos de autoensamblaje en Experimental cervical Lesión de la Médula Espinal

Lesión de la médula espinal es una condición traumática que causa morbilidad severa y alta mortalidad. En este trabajo se describe en detalle un modelo contusión de lesión de la médula espinal en ratones seguido de un trasplante de células madre neurales.

Neural Trasplante de células madre en Experimental contuso Modelo de Lesión de la Médula Espinal

Aquí, se introduce un método para evaluar los tornillos transpedicular mediante la utilización de un modelo de la columna lumbar porcino in vivo .

Anestesia, Cirugía y Método de Cosecha para la Evaluación de Tornillos Transpediculares Usando un<em&gt; In Vivo</em&gt; Modelo de columna lumbar porcina

La microcirculación de la médula espinal juega un papel fundamental en la lesión de la médula espinal. La mayoría de los métodos no permiten la evaluación en tiempo real de la microcirculación de la médula espinal, que es esencial para el desarrollo de terapias dirigidas a la microcirculación. Aquí, proponemos un protocolo utilizando sondas Laser-Doppler-Flow Needle en un modelo animal grande de isquemia / reperfusión.

Evaluación en tiempo real de la microperfusión de la médula espinal en un modelo porcino de isquemia/reperfusión

Aquí, describimos una nueva técnica rápida que modela la lesión abierta de la médula espinal en ratas que elimina la laminectomía. La hemisección lateral se realiza mientras se observa a través de un microscopio. La técnica es versátil y también se puede utilizar en las regiones cervical, torácica y lumbar de la médula espinal de otros animales.

Una técnica de hemisección lateral de la médula espinal rápida y mínimamente invasiva para modelar lesiones abiertas de la médula espinal en ratas

Las técnicas mínimamente invasivas y un dispositivo de laboratorio simple mejoran la reproducibilidad del modelo de lesión de la médula espinal al reducir el daño operatorio a los animales de experimentación y permitir el mantenimiento de la morfología anatómica. El método vale la pena porque los resultados confiables y el procedimiento reproducible facilitan las investigaciones de los mecanismos de reparación de enfermedades.

Establecimiento de un modelo de lesión de la médula espinal por contusión en ratones basado en una técnica mínimamente invasiva

Este protocolo quirúrgico es una guía paso a paso para insertar un catéter intratecal en el espacio subdural espinal de un roedor para administrar un tratamiento dirigido.

Acceso al espacio subdural de la médula espinal del roedor para la administración del tratamiento

Aprende una técnica quirúrgica para entregar terapias génicas y celulares en la médula espinal usando minipigs Göttingen. Este método mejora la precisión y seguridad en neurocirugía.

Técnica quirúrgica para la entrega de la Médula Espinal de Terapias: Demostración de Procedimiento en Göttingen minipigs

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