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DOI: 10.3791/50086-v
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Una forma rápida de pantalla para los modificadores de melanoma utilizando un modelo de pez cebra tumor autóctona se presenta. Se aprovecha de la miniCoopR vector que permite la expresión de los genes candidatos de melanoma en los melanocitos. Un método para obtener gratis melanoma curvas de supervivencia, un ensayo de invasión, un protocolo para la tinción de anticuerpos de los melanocitos de escala y un ensayo de trasplante de melanoma se describen.
El objetivo general del siguiente experimento es detectar modificadores del melanoma mediante un modelo de tumor autógeno de pez cebra. Esto se consigue mediante la creación de animales transgénicos en los que los melanocitos expresan un gen de interés y los peces están predispuestos al melanoma. La siguiente aparición del melanoma se puntúa para evaluar si el gen de interés altera la iniciación del tumor.
A continuación, se realizan ensayos de invasión tumoral y específicos de células para determinar cualquier impacto adicional del gen de interés en los melanomas y los melanocitos premalignos. Por último, se trasplantan células de melanoma para medir cómo el gen de interés afecta la frecuencia de las células iniciadoras de melanoma en tumores establecidos. Los resultados muestran cómo un gen candidato afecta a varias propiedades de los melanocitos y los melanomas, incluida la invasión de inicio y la capacidad de trasplante.
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