Sistema optimizado para la monitorización de la perfusión cerebral en el modelo de rata de Carrera intraluminal oclusión arteria cerebral media

La monitorización de la perfusión cerebral es muy importante para aumentar la precisión y reducir la variabilidad en los modelos experimentales de ictus. La tecnología láser Doppler puede detectar fácilmente la perfusión microvascular cerebral a través del cráneo intacto de ratones y ratas, especialmente si se utiliza una sonda de penetración profunda. El problema clave aquí es encontrar un sistema confiable para asegurar la sonda láser Doppler a las coordenadas craneales durante el procedimiento quirúrgico.

En este vídeo, le mostraremos nuestro sistema desarrollado internamente. Podemos ser utilizados para la monitorización hemodinámica cerebral en un solo sitio y en múltiples sitios. El modelo de carrera de cremallera que se muestra en este vídeo se obtiene insertando un filamento interluminal en la arteria carótida externa.

A continuación, el filamento se hace avanzar a través de la arteria carótida interna para ocluir el origen de la arteria ceal media, produciendo una isquemia focal transitoria. Para obtener más detalles sobre el procedimiento, visite el siguiente enlace. Las coordenadas craneales para la monitorización multisitio se han elegido después de experimentos preliminares con perfusión de tinta de gelatina, que delinearon claramente el área hiperperfundida durante la oclusión de la arteria celular media para la monitorización en un solo sitio.

La sonda láser Doppler uno se coloca en el territorio central abastecido por la arteria central del cielo para el monitoreo de múltiples sitios. La sonda láser Doppler dos se coloca en los bordes periféricos en el territorio entre la arteria ceal media y anterior. Para estudiar el flujo colateral intercraneal, el posicionamiento de las sondas láser Doppler puede variar de acuerdo con las necesidades experimentales de cada investigador individual.

Los materiales necesarios son caucho natural, pequeños tubos de plástico y el estilete metálico. El soporte de prope se puede personalizar según el tamaño del animal, el número y el tamaño de las sondas láser Doppler y el territorio vascular de la sable, que debe monitorearse. Marque las posiciones de las sondas y el montículo de freno.

El caucho natural de acuerdo con las coordenadas estereotáxicas deseadas para la oclusión de la arteria ceal media, las coordenadas típicas para el núcleo isquémico se esperan en Bgma menos un milímetro, cinco milímetros laterales a la línea media. Para un territorio de zona fronteriza isquémica periférica, las coordenadas esperadas se pueden establecer en bgma más dos milímetros, dos milímetros laterales a la línea media. Marque muy claramente la posición de la bgma con una X. Este es el punto de referencia para sujetar el soporte de utilería al cráneo.

Inserta el estilete en un pequeño tubo de plástico. Su tamaño debe coincidir con el tamaño de la sonda. Inserte el estilete en el caucho natural en el punto donde se debe colocar la sonda.

Empuje el estilo en la goma hasta que el tubo de plástico también se haya insertado en la goma. Retire el estilo si se necesitan varias sondas. Repita los mismos pasos para otras posiciones de la sonda para asegurarse de que las sondas permanezcan estables.

Cinta rápida alrededor de los tubos de plástico, los soportes de prope individuales se obtienen siguiendo el mismo procedimiento con un solo tubo. Se podría realizar la esterilización química de varios soportes de prope para su uso futuro. Afeita suavemente la cabeza de la rata, aplica beta dime en una gasa y desinfecta la piel.

La rata debe colocarse en la posición de baile en la mesa de operaciones bajo anestesia con cloro ISO y administrar lidocaína al 2% cinco miligramos por kilo por vía subcutánea en el área craneal. Realizar una incisión en la piel paramediana derecha para la oclusión de la arteria ceal derecha y diseccionar el tejido subcutáneo para llegar a la fascia craneal. Realizar una incisión paramediana derecha en la fascia craneal y realizar una disección roma.

Para alcanzar el hueso de habilidad, prepare un área de habilidad que sea lo suficientemente grande para la aplicación del soporte de la sonda. Tenga en cuenta que no es necesario perforar o adelgazar los huesos, aplicándome broman para desinfectar y secar la superficie del cráneo. Use un secador de pelo para aire frío para acelerar el secado de la superficie del cráneo.

En este punto, las suturas craneales y la bgma son claramente visibles. Personalice el soporte de la sonda cortando los bordes con tijeras estériles. Aplique una pequeña cantidad de pegamento quirúrgico cianoacrilato aprobado para veterinarios en la superficie debajo del soporte de la sonda, evitando cuidadosamente la apertura inferior de los tubos de plástico.

Tenga en cuenta que si queda una cantidad significativa de pegamento entre la superficie óptica de la sonda y la habilidad, esto puede producir una señal baja y puede dañar la sonda. Con múltiples usos. Aplique el soporte de la sonda a la superficie de habilidad haciendo coincidir cuidadosamente el BMA con la mina terrestre S.

Aplique una presión suave sobre el soporte de la hélice. Use un secador de pelo para aire frío para acelerar el secado del pegamento quirúrgico. Asegure el soporte de la prope atando hilo quirúrgico alrededor del soporte de la prope y la cabeza del animal.

Tenga cuidado de colocar el hilo quirúrgico sobre la mandíbula, evitando la región submandibular y el cuello. Llene los tubos de plástico del soporte de la sonda con un gel óptico. Por ejemplo, un gel de ultrasonido común.

Esto aumentará la calidad de la señal láser Doppler. Coloque los accesorios en el soporte de la sonda y verifique la lectura real del medidor de flujo Doppler láser. Asegure las sondas atándolas alrededor de la cabeza del animal.

Tenga cuidado de colocar el hilo quirúrgico sobre la mandíbula, evitando la región submandibular y el sistema multisitio para la monitorización de la perfusión CBR ya está completo Coloque las ratas en la posición de suministro con cuidado evitando las fuerzas de tracción sobre las sondas o el soporte de la hélice. Iniciar la monitorización de la profusión durante el procedimiento quirúrgico para la oclusión de la arteria ceal media cuando el filamento endovascular alcanza el origen de la arteria ceal media. Una caída en la perfusión ceal es visible durante la monitorización láser Doppler.

Si se utilizan sondas múltiples, se pueden observar diferentes cambios en la profusión de ceales según su territorio arterial. Estos trazados representativos de la perfusión muestran cómo se puede estudiar la hemodinámica céleal utilizando sondas Doppler láser multisitio. Se produce un déficit de perfusión modesto en la sonda de dos canales en comparación con la sonda de un canal durante la oclusión de la arteria carótida común y la oclusión de la arteria ceal media.

Este patrón hemodinámico sugiere colaterales intercraneales funcionalmente activos en condiciones isquémicas. El volumen del infarto se calcula en 19 secciones coronales consecutivas fijadas en 4%perfor, MAGA y teñidas con previoleta oh 0,1% corregidas por asimetrías interhemisféricas debidas a edema ceal y expresadas en milímetros cúbicos. La inmunotinción de marcadores moleculares de pérdida neuronal y penumbra isquémica, como la proteína microtubárica asociada dos y la proteína de choque térmico 70, pueden estudiarse en relación con la monitorización hemodinámica multisitio de la circulación intercraneal.

El sistema optimizado para la monitorización de la perfusión vendible que se muestra en este vídeo podría proporcionar una forma fácil y eficaz de estudiar los cambios hemodinámicos vendibles en el campo experimental del ictus, lo que llevaría al desarrollo de una nueva generación de terapias colaterales célebres. Gracias por su atención y buena suerte con sus experimentos.