Medición in vivo de la capa de ratón pulmonar superficie endotelial

El objetivo general del siguiente experimento es medir el ancho de la capa superficial endotelial microvascular pulmonar o ESL midiendo la exclusión de dextrinas de alto peso marcadas con fluorescencia de la superficie del vaso. Esto se logra realizando primero la microscopía DIC intravital para identificar las membranas de las células endoteliales de los microvasos subpleurales dentro de un pulmón de ratón en movimiento. A continuación, se inyecta a los ratones una dextrina marcada con fluorescencia de alto peso molecular, que es excluida de la pared del vaso por la capa de la superficie endotelial, que de otro modo sería invisible.

A continuación, se capturan imágenes DIC y fluorescentes simultáneas desde un único marco de enfoque, lo que permite la medición de anchos vasculares que son respectivamente inclusivos y excluyentes del grosor de ESL. La diferencia entre la anchura vascular de la CID y la fluorescente se utiliza para deducir el grosor de la ESL microvascular subpleural. La principal ventaja de esta técnica sobre los métodos existentes como la simetría de velocidad de micropartículas es que se puede realizar con precisión en un órgano en movimiento, como el pulmón, demostrando este procedimiento será el Dr. IMU Yang, un investigador asociado senior de mi laboratorio para preparar el tubo para una toracostomía de ratón.