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Una preparación semi-intacta aislada del ratón epitelio sensorial vestibular de Electrofisiología...
Una preparación semi-intacta aislada del ratón epitelio sensorial vestibular de Electrofisiología...
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JoVE Journal Neuroscience
An Isolated Semi-intact Preparation of the Mouse Vestibular Sensory Epithelium for Electrophysiology and High-resolution Two-photon Microscopy

Una preparación semi-intacta aislada del ratón epitelio sensorial vestibular de Electrofisiología y de alta resolución de la microscopía de dos fotones

Full Text
12,404 Views
11:52 min
June 13, 2013

DOI: 10.3791/50471-v

Victoria W. K. Tung1, Stefano Di Marco1, Rebecca Lim2, Alan M. Brichta2, Aaron J. Camp1

1Discipline of Biomedical Science, School of Medical Sciences, Sydney Medical School,University of Sydney, 2School of Biomedical Sciences and Pharmacy,University of Newcastle

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Análisis de la función de las células ciliadas vestibulares se complica por su ubicación en lo profundo de la parte más dura del cráneo, hueso temporal pétreo. La mayoría de los estudios de células pilosas funcionales han utilizado intensamente células ciliadas aislados. A continuación se describe una preparación semi-intacta de ratón epitelio vestibular para estudios electrofisiológicos y de microscopía de dos fotones.

El objetivo general de este procedimiento es obtener una preparación casi normal del epitelio sensorial vestibular del ratón que pueda utilizarse para estudiar los procesos celulares y subcelulares fundamentales de las células ciliadas vestibulares. Esto se logra aislando primero el laberinto vestibular óseo de la bóveda craneal. El segundo paso es rascar cuidadosamente el laberinto óseo con pinzas finas para exponer el laberinto membranoso subyacente antes de sacarlo por completo de su cubierta ósea.

A continuación, se expone el epitelio sensorial vestibular cortando la membrana suprayacente con unas finas tijeras de iris. El paso final es montar la preparación de epitelio sensorial semiintacto en una cámara con fondo de vidrio y estabilizarla con una red de nailon ponderada. En última instancia, la electrofisiología de pinza de parche y la microscopía de dos fotones se utilizan para caracterizar las propiedades intrínsecas de la membrana y el perfil de señalización de calcio, respectivamente, de cada tipo de cabello vestibular, célula y/o arina primaria.

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Neurobiología Issue 76 Neurociencia Biología Celular Biología Molecular Ingeniería Biomédica anatomía fisiología cirugía vestibular las células de pelo Epitelio dos fotones microscopía aislado semi-intacta la electrofisiología la electroporación la microscopía el tejido el aislamiento modelo animal

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