Name: Protocolo de examen clínico para detectar la tembladera atípica y clásica en ovejas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 42 s
Description: Aprenda un protocolo clínico de cinco minutos para detectar tembladera clásica y atípica en ovejas y cabras. Este método mejora el reconocimiento temprano de encefalopatías espongiformes en pequeños rumiantes.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Los estudios que proporcionaron los animales fueron financiados por el Departamento de Alimentación, Medio Ambiente y Asuntos Rurales del Reino Unido y la Unión Europea (a través de la financiación del Laboratorio de Referencia de la ETE de la UE). Agradecemos el apoyo de los gerentes del proyecto, el Dr.M. Simmons y el Dr.M. Jeffrey.

1. Evaluación de la postura
<ol><li>Evaluar la postura del animal mientras no está perturbado.</li>
	<li>Los animales afectados por las EET pueden estar de pie con extremidades anchas, pueden parecer encorvados o pueden estar de pie con un carro de cabeza baja.</li>
</ol>2. Evaluación del comportamiento
<ol><li>Estudiar el comportamiento del animal, cuando se deja solo, cuando se acerca y cuando se maneja.</li>
	<li>Los animales afectados por las ETE pueden mostrar una alteración por estar separados de otras ovejas o no seguir inmediatamente a otras ovejas.</li>
	<li>Cuando el animal se acerca, puede huir y colapsar, o se derrumba al suelo cuando se manipula. El circular compulsivo en el sentido de las agujas del reloj o en el sentido contrario a las agujas del reloj se puede observar en ovejas con tembladera atípica.</li>
</ol>3. Pruebas de respuesta a la amenaza
<ol><li>Sostenga la cabeza del animal para probar la respuesta de amenaza: mueva la mano o varios dedos varias veces hacia cada ojo del animal para inducir una respuesta de parpadeo, pero tenga cuidado de no tocar ningún vello facial o crear cualquier turbulencia del aire que pueda hacer que el animal parpadee.</li>
	<li>La respuesta de amenaza puede estar ausente en los animales afectados por la tembladera, en particular en las ovejas con tembladera atípica. Aunque la prueba de la respuesta de la amenaza sea la única prueba del nervio craneal usada como parte del protocolo, la inspección visual de la cara durante este procedimiento puede revelar otras muestras de déficits neurológicos no considerados normalmente en tembladera, e.g. parálisis facial. Si el animal no parpadea en respuesta a la amenaza es recomendable probar el reflejo palpebral tocando los párpados para asegurarse de que la incapacidad del animal para parpadear no es causada por parálisis facial.</li>
</ol>4. Prueba de la respuesta de scratch
<ol><li>Asegúrese de que el animal esté tranquilo durante este procedimiento porque la prueba no se puede interpretar en un animal que lucha.</li>
	<li>Áreas de rasguño de la espalda en las regiones torácica, lumbar y sacra, haciendo una pausa entre cada episodio de rascado.</li>
	<li>Si el animal responde con movimientos rítmicos de la cabeza o del cuerpo, o se mueve o lame sus labios al rascarse un área en particular, repita la prueba de rasguño para confirmar la reproducibilidad de la respuesta al rasguño.</li>
	<li>Una respuesta repetible se provoca generalmente en los animales que son pruríticos, que incluye generalmente ovejas con la tembladera clásica o cabras con la forma prurítica de tembladera, pero no hay generalmente ninguna respuesta en ovejas con tembladera anormal a menos que otras condiciones pruríticas de la piel o ectoparásitos estén presentes.</li>
</ol>5. Comprobación de pérdida de lana y lesiones cutáneas
<ol><li>Inspeccione la piel.</li>
	<li>El prurito debido a la tembladera generalmente causa pérdida de cabello, que puede estar en la encuesta, espalda, grupa, lado del pecho o abdomen debido al roce excesivo o rasguño donde la piel subyacente parece normal.</li>
	<li>Las abrasiones pueden aparecer más tarde si el animal tiene la oportunidad de frotar objetos punzantes. Las heridas de la mordedura pueden aparecer, particularmente en los miembros, debido al mordisqueo excesivo de los miembros.</li>
</ol>6. Puntuación condición corporal
<ol><li>Evaluar la condición corporal del animal palpando los procesos dorsales y transversales de las vértebras lumbares.</li>
	<li>La tembladera puede causar una pérdida progresiva de la condición corporal donde los procesos transversales de las vértebras lumbares se pueden sentir fácilmente individualmente, y los extremos de los procesos aparecen agudos.</li>
</ol>7. Vendar los ojos al animal
<ol><li>Cubra los ojos del animal con una capucha, que se puede hacer usando cualquier bolsa no vista donde se corte una esquina para permitir la respiración del animal.</li>
	<li>Libere al animal solo si no hay problemas de seguridad y no hay riesgo de lesiones debido a un animal en pánico; de lo contrario, mantenga a las ovejas y estudie los movimientos de los animales mientras sigue teniendo el control del animal.</li>
	<li>Vendarse los ojos puede exacerbar los signos de un sistema vestibular o disfunción cerebelosa, que puede ser oscurecida por la capacidad del animal para compensar a través de su visión. La pérdida de equilibrio, de incoordinación, o de dar vueltas se puede sacar, particularmente en ovejas de otra manera clínico unremarkable con tembladera anormal.</li>
</ol>8. Evaluación del movimiento del animal
<ol><li>Estudia la marcha y los movimientos musculares del animal cuando se mueve libremente.</li>
	<li>La incoordinación puede caracterizarse por movimientos de base ancha de las extremidades posteriores, saltando con ambas extremidades traseras, o balanceándose excesivamente en los cuartos traseros, lo que puede resultar en tropezar o sentarse brevemente.</li>
	<li>La presencia de un temblor de cabeza es a menudo sutil cuando el animal no está perturbado, pero puede llegar a ser más notable durante o después de la finalización del examen clínico.</li>
</ol>9. Interpretación
<ol><li>Considere la importancia de los hallazgos con respecto a la tembladera.</li>
	<li>Aunque la presencia de signos individuales, como una respuesta repetible al rascado, temblor, comportamiento anormal, círculos, colapso de episodios, ataxia o una respuesta de amenaza ausente, puede tener varias causas, la aparición combinada de dos o más de estos signos es altamente sugestiva de tembladera en ovejas o cabras.</li>
</ol>

<ol><li>Benestad, S. L., Arsac, J. N., Goldmann, W., Nöremark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical%2FNor98+scrapie%3A+properties+of+the+agent%2C+genetics%2C+and+epidemiology%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Res.%22%5BJournal%5D)">Atypical/Nor98 scrapie: properties of the agent, genetics, and epidemiology.</a> Vet Res.. 39 (4), 19 (2008).</li>
<li>D'Angelo, A., Maurella, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+clinical+criteria+to+diagnose+scrapie+in+Italy%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+J%22%5BJournal%5D)">Assessment of clinical criteria to diagnose scrapie in Italy.</a> Vet. J. 174 (1), 106-112 (2007).</li>
<li>Eloit, M., Adjou, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BSE+agent+signatures+in+a+goat%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+Rec%22%5BJournal%5D)">BSE agent signatures in a goat.</a> Vet. Rec. 156 (16), 523-524 (2005).</li>
<li>Fediaevsky, A., Maurella, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+atypical+scrapie+in+sheep+from+positive+flocks+is+not+higher+than+in+the+general+sheep+population+in+11+European+countries%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">The prevalence of atypical scrapie in sheep from positive flocks is not higher than in the general sheep population in 11 European countries.</a> BMC Vet. Res. 6, 9 (2010).</li>
<li>Healy, A. M., Weavers, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+clinical+neurology+of+scrapie+in+Irish+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vet.+Intern.+Med%22%5BJournal%5D)">The clinical neurology of scrapie in Irish sheep.</a> J. Vet. Intern. Med. 17 (6), 908-916 (2003).</li>
<li>Houston, E. F., Gravenor, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+signs+in+sheep+experimentally+infected+with+scrapie+and+BSE%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Clinical signs in sheep experimentally infected with scrapie and BSE.</a> 152 (11), 333-334 (2003).</li>
<li>Kittelberger, R., Chaplin, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+scrapie%2FNor98+in+a+sheep+from+New+Zealand%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vet.+Diagn.+Invest%22%5BJournal%5D)">Atypical scrapie/Nor98 in a sheep from New Zealand.</a> J. Vet. Diagn. Invest. 22 (6), 863-875 (2010).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associations+of+clinical+signs+and+prion+protein+genotypes+in+British+sheep+with+scrapie%5BTitle%5D)+AND+%22Dtsch.+Tier%C3%A4rztl.+Wochenschr%22%5BJournal%5D)">Associations of clinical signs and prion protein genotypes in British sheep with scrapie.</a> Dtsch. Tierärztl. Wochenschr. 116 (11), 380-388 (2009).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scrapie+in+goats%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+Rec%22%5BJournal%5D)">Scrapie in goats.</a> Vet. Rec. 161 (11), 395-396 (2007).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pruritus+is+a+common+feature+in+sheep+infected+with+the+BSE+agent%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Pruritus is a common feature in sheep infected with the BSE agent.</a> BMC Vet. Res. 4, 16 (2008).</li>
<li>Konold, T., Bone, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+of+clinical+signs+in+goats+with+transmissible+spongiform+encephalopathies%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Monitoring of clinical signs in goats with transmissible spongiform encephalopathies.</a> BMC Vet. Res. 6, 13 (2010).</li>
<li>Konold, T., Davis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+findings+in+two+cases+of+atypical+scrapie+in+sheep%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Clinical findings in two cases of atypical scrapie in sheep: a case report.</a> BMC Vet. Res. 3, 1 (2007).</li>
<li>Passler, T., Walz, P. H., Pugh, D. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPassler%2C+T+%22Diseases+of+the+Neurologic+System.+In%3A+Sheep+and+Goat+Medicine%22">Diseases of the Neurologic System. In: Sheep and Goat Medicine</a>. Pugh, D. G., Baird, A. N. , 2, W.B.Saunders. Saint Louis. 361-405 (2012).</li>
<li>Russel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+condition+scoring+of+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22In+Pract%22%5BJournal%5D)">Body condition scoring of sheep.</a> In Pract. 6 (3), 91-93 (1984).</li>
<li>Simmons, H. A., Simmons, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+scrapie+in+sheep+from+a+UK+research+flock+which+is+free+from+classical+scrapie%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Atypical scrapie in sheep from a UK research flock which is free from classical scrapie.</a> BMC Vet. Res. 5, 8 (2009).</li>
<li>Simmons, M. M., Konold, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+natural+atypical+scrapie+phenotype+is+preserved+on+experimental+transmission+and+sub-passage+in+PRNP+homologous+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">The natural atypical scrapie phenotype is preserved on experimental transmission and sub-passage in PRNP homologous sheep.</a> BMC Vet. Res. 6, 14 (2010).</li>
<li>Spiropoulos, J., Lockey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+prion+with+BSE+properties+from+farmed+goat%5BTitle%5D)+AND+%22Emerg.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Isolation of prion with BSE properties from farmed goat.</a> Emerg. Infect. Dis. 17 (12), 2253-2261 (2011).</li>
<li>Ulvund, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aUlvund%2C+MJ+%22Clinical+Findings+in+Scrapie.+In%3A+Prions+in+humans+and+animals%22">Clinical Findings in Scrapie. In: Prions in humans and animals</a>. Hörnlimann, B., Riesner, D., Kretzschmar, H. , de Gruyter. Berlin. 398-407 (2006).</li>
</ol>

Todos los procedimientos relacionados con animales se llevaron a cabo de conformidad con la Ley de Procedimientos Científicos de Animales de 1986, bajo licencia del Ministerio del Interior del Gobierno del Reino Unido. Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos.

La tembladera es una enfermedad incluida en la lista de la Organización Mundial de la Salud animal (OIE), que, en ausencia de una prueba ante mortem rápida y fiable, depende de la capacidad de los agricultores o veterinarios para reconocer los signos clínicos asociados con esta enfermedad. Sin embargo, la mayoría de los casos de tembladera, en particular los casos atípicos de tembladera, se encuentran actualmente mediante la vigilancia específica de las ETE, es decir, mediante el examen cerebral de pequeños rumiantes sujetos a sacrificio o animales muertos. La cría de ovejas para la resistencia a la tembladera clásica, que redujo el número de casos clásicos de tembladera, muy probablemente también redujo la conciencia de las personas para la enfermedad, de modo que se considera con menos frecuencia en el diagnóstico diferencial de trastornos neurológicos en ovejas. La tembladera atípica también tiene una baja prevalencia, con aproximadamente cinco casos en mataderos y ocho casos en ganado muerto por cada 10.000 examinados en Europa4. Además, el prurito, generalmente evidente como alopecia con o sin excoición, a menudo se considera un signo característico de la tembladera13. Así, una enfermedad neurológica sin prurito concomitante según lo observado en la tembladera anormal12 o la forma nonpruritic de tembladera caprina11 puede no levantar la suspicacia de la tembladera.
Este protocolo de examen se diseñó para identificar signos clínicos de ET en ovejas mediante la evaluación de signos clínicos específicos asociados con diversos tipos de tembladera (tembladera atípica y clásica, esta última representada por una oveja inoculada con EEB atípica, que presentaba signos clásicos similares a la tembladera). En la tembladera clásica, el porcentaje de casos que mostraron una respuesta positiva al rasguño ("reflejo mordisqueo") varió de 50-77 en más de 100 ovejas estudiadas5,8. Los trastornos del movimiento pueden observarse en hasta el 81% de los casos clásicos de tembladera basados en diversos estudios18. La incoordinación es también un signo importante en varios casos naturales de tembladera atípica, a menudo acompañados de cambios de comportamiento1,pero los signos adicionales reportados tanto en ovejas con tembladera atípica infectadas natural como experimentalmente fueron alrededores y discapacidad visual12,15,16,por lo que se incluye en el protocolo de examen el vendado de los ojos y la prueba de la respuesta a la amenaza. La puntuación de la condición corporal, por ejemplo utilizando un sistema de puntuación de 6 puntos14, permite la evaluación de la emaciación, que puede observarse en ovejas afectadas por la tembladera5. Aunque anteriormente se han propuesto criterios clínicos para ayudar en la detección de la tembladera en el ganado ovino2,estos sólo se referían a la detección de la tembladera clásica y tenían en cuenta la historia clínica, que puede no estar disponible si los animales se presentan en un matadero.
El protocolo actual permite el cribado de muchos animales en busca de signos de tembladera en un corto período de tiempo. Además, el protocolo de examen se puede aplicar a estudios experimentales de tembladera en ovejas y cabras para controlar el inicio clínico, la progresión y el punto final. Sin embargo, no sustituye un examen físico y neurológico más detallado por un registro adecuado de los antecedentes clínicos, posiblemente seguido de pruebas diagnósticas auxiliares (examen de sangre y líquido cefalorraquídeo; técnicas de imagen más sofisticadas si procede), que pueden ser necesarias posteriormente para descartar otras afecciones en pequeños rumiantes que presenten signos similares. , como enfermedades neurológicas metabólicas o inflamatorias, abscesos cerebrales o tumores.
Aunque un examen clínico es generalmente menos sensible a la detección de animales afectados por las ETE que las pruebas post mortem basadas en la detección de la proteína priónica2,11,especialmente en una fase temprana del período de incubación, este es actualmente el único método de detección en animales vivos y más pertinente para aquellos países que no cuentan con un sistema de vigilancia específico para identificar a los pequeños rumiantes afectados por las ETE.

La tembladera es una encefalopatía espongiforme transmisible (ETE) de ovejas y cabras, que pertenece al grupo de trastornos por plegamiento incorrecto de proteínas, como la encefalopatía espongiforme bovina (EEB) en el ganado vacuno, la enfermedad de derroche crónico en los ciervos y la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob en los seres humanos. El diagnóstico se realiza post mortem mediante la detección de la forma anormal de la proteína priónica, que es resistente a las proteinasas, generalmente en el cerebro. Se pueden distinguir dos formas principales de tembladera natural, que son epidemiológica, patológica y bioquímicamente diferentes: la tembladera clásica y la tembladera atípica. Además, una enfermedad neurológica con signos clínicos clásicos similares a la tembladera puede ser inducida en ovejas y cabras por infección experimental con el agente de la EEB6,10-11. De hecho, la EEB natural se ha diagnosticado en cabras3,17. El control de la tembladera clásica (y de la EEB en el ganado ovino si se produjo de forma natural) se ha logrado mediante la cría para la resistencia genética dirigida al gen de la proteína priónica, pero esto es más difícil para la tembladera atípica, que se cree que es una enfermedad esporádica y se ha diagnosticado en países considerados libres de tembladera clásica, por ejemplo, Nueva Zelanda7.
La tembladera es una enfermedad neurológica de ovejas y cabras adultas dando por resultado cambios en comportamiento, sensación, y movimiento, pero la enfermedad es lentamente progresiva, y las muestras clínicas no se reconocen a menudo porque el encargado animal o el cirujano veterinario pueden no ser familiares con las muestras clínicas, o la tembladera no se considera en absoluto en la diagnosis diferenciada de enfermedades neurológicas en pequeños rumiantes.
El protocolo de examen propuesto se diseñó para ayudar en el diagnóstico clínico de la tembladera con dos propósitos en mente: debe ser considerablemente breve para permitir la exploración de muchos animales en un corto período de tiempo, pero lo suficientemente específico como para permitir la detección de animales afectados por la tembladera, lo que se logra mediante la evaluación de la presencia de signos clínicos que se encuentran con frecuencia en los animales afectados por la tembladera. Este protocolo es una ligera modificación del utilizado para vigilar a las cabras en busca de signos de tembladera clásica11 e incluye vendar los ojos al animal, lo que puede exacerbar los signos clínicos no asociados normalmente con la tembladera9.

protocolo de examen clínico para detectar la tembladera atípica y clásica en ovejas

Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep

El diagnóstico de la tembladera, una encefalopatía espongiforme transmisible (ETE) de ovejas y cabras, se basa actualmente en la detección de proteínas priónicas asociadas a la enfermedad mediante pruebas post mortem. A menos que se monitorice activamente una muestra aleatoria de la población de ovejas o cabras para detectar la tembladera, la identificación de los casos de tembladera se basa en la notificación de sospechosos clínicos, que depende de la familiarización del individuo con la enfermedad y de la capacidad de reconocer los signos clínicos asociados con la tembladera. La tembladera puede no ser considerada en el diagnóstico diferencial de enfermedades neurológicas en pequeños rumiantes, particularmente en países con baja prevalencia de tembladera, o no reconocida si se presenta como forma no veruriginosa como la tembladera atípica. Para ayudar en la identificación de sospechosos clínicos, un protocolo corto de la examinación se presenta para evaluar la exhibición de muestras clínicas específicas asociadas a las formas pruríticas y no priuriticas de TSE en ovejas, que se podrían también aplicar a las cabras. Esto incluye la evaluación del comportamiento, la visión (mediante la prueba de la respuesta a la amenaza), el prurito (al probar la respuesta al rascado) y el movimiento (con y sin vendar los ojos). Esto puede conducir a un examen neurológico más detallado de la notificación de animales como sospechosos de tembladera. También podría utilizarse en estudios experimentales de ETE de ovejas o cabras para evaluar la progresión de la enfermedad o para identificar el punto final clínico.

Ovejas clínicamente sanas. Poll Dorset wether from a scrapie-free flock intracerebrally inoculated with bovine brain of New Zealand origin and examined at 49 months post inoculation. Esta oveja tiene una postura normal, se comporta normalmente, muestra una respuesta de amenaza normal (Figura 1), no reacciona a la prueba de rasguño, tiene un vellón intacto, y una muy buena condición corporal. Es clínicamente poco notable cuando se le vendan los ojos y no muestra signos de un trastorno del movimiento.
Ovejas con tembladera atípicas que presentan la forma no veruritaria de ETE en ovejas. Cheviot wether de una manada tembladera-libre intracerebrally inoculado con homogeneato del cerebro de un caso anormal del campo de la tembladera del mismo genotipo de la proteína del prión (AHQ/AHQ) y examinado en la inoculación del poste 36 meses. Esta oveja también tiene una postura normal, pero se comporta de manera diferente a las otras ovejas en la pluma y los círculos en el sentido de las agujas del reloj. No parpadea cuando se prueba la respuesta de amenaza. Rascarse no provoca ninguna respuesta, y no hay cambios en lana son evidentes, pero la condición del cuerpo es justo. Gira en el sentido de las agujas del reloj cuando tiene los ojos vendados(Figura 2)y pierde el equilibrio. La marcha es atáxica, y un temblor fino de la cabeza es visible.
Ovejas atípicas de la EEB que presentan con la forma prurítica de ETE en ovejas, que es clínico similar a la presentación clínica de ovejas tembladera-afectadas clásicas. Por esta razón, no se incluye un caso clásico de tembladera. Encuesta Dorset wether de un rebaño libre de tembladera intracerebrally inoculado con bovino atípico (tipo L) homogeneización cerebral DE LA EEB y examinado a los 50 meses después de la inoculación. Esta oveja se encuentra ligeramente encorvada, tiende a mantener las extremidades traseras de base ancha y cae al suelo cuando es atrapada. La respuesta de amenaza es débil. El rascado de varias áreas de la espalda provoca movimientos de la cabeza o los labios(Figura 3),y hay pérdida de lana con un traumatismo cutáneo menor en la encuesta. La condición corporal es buena. Cuando tiene los ojos vendados, es reacio a moverse y apoya su parte trasera en el obstáculo para mantener el equilibrio. La oveja es atáxica y muestra hipermetria del miembro anterior.
<img alt="Figure 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig1.jpg"> Figura 1. Pruebas de respuesta a la amenaza. El gesto amenazante hacia el ojo del animal induce una respuesta de parpadeo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig1highres.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver la imagen más grande.</a>
<img alt="Figure 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig2.jpg"> Figura 2. Vendar los ojos. En el sentido de las agujas del reloj, se provocaba vendando los ojos a las ovejas con una capucha. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig2highres.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver la imagen más grande.</a>
<img alt="Figure 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig3.jpg"> Figura 3. Prueba de la respuesta de rasguño. Rascarse la espalda provoca lamerse los labios con movimientos laterales de la cabeza <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig3highres.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver la imagen más grande.</a>

Un protocolo clínico corto de la examinación se presenta para ayudar en la detección de tembladera clásica y anormal en ovejas y cabras.

Protocolo de examen clínico para detectar la tembladera atípica y clásica en ovejas

The diagnosis of scrapie, a transmissible spongiform encephalopathy (TSEs) of sheep and goats, is currently based on the detection of disease-associated ...

La scrapie es una encefalopatía espongiforme transmisible en ovejas y cabras, que provoca signos neurológicos en los animales afectados. La confirmación de la enfermedad se realiza post mortem mediante el examen del cerebro, lo cual también permite clasificarla en diferentes formas: scrapie clásica, scrapie atípica y, rara vez, otras formas transmitidas desde otras especies, como la encefalopatía espongiforme bovina, abreviada como BSE. La scrapie está incluida como enfermedad notificable por la Organización Mundial de Sanidad Animal, aunque a menudo no se reconoce en pequeños rumiantes afectados.Este video demuestra un protocolo breve de examen clínico que dura aproximadamente cinco minutos, diseñado para ayudar en la detección de casos clínicos afectados por encefalopatías espongiformes transmisibles, utilizando tres ovejas como ejemplos. El ejemplo uno es una oveja clínicamente sana inoculada cerebralmente con BSC. Homogeneizado de cerebro bovino libre examinado a los 49 meses posteriores a la inoculación, lo cual representa un control.El ejemplo dos es un ovino clínicamente afectado, inoculado por vía cerebral con homogeneizado de cerebro de OV con escrapie atípica, examinado a los 36 meses posteriores a la inoculación, lo que representa un caso de escrapie atípica. El ejemplo tres es un ovino clínicamente afectado, reinoculado con homogeneizado de cerebro bovino con EEB atípica, examinado a los 50 meses posteriores a la inoculación, que presenta un cuadro clínico similar al de la escrapie clásica. Por esta razón, no se incluye un caso de escrapie clásica.Evaluación de la postura. La oveja sana que lleva el número de identificación auricular uno y que se indica con la flecha roja muestra una postura normal cuando está tranquila en el corral. La postura de la oveja atípica con scrapie también parece normal.El oveja con BSC atípica parece ligeramente encorvada y tiende a sonar con sus miembros posteriores. La evaluación amplia de la conducta, tal como se espera en ovejas normales, muestra que la oveja sana permanece dentro del grupo y sigue los movimientos del examinador. Al acercarse y capturar a la oveja según su tamaño, no se observa ninguna anormalidad.El oveja atípica de Scrapy se comporta de manera diferente a las otras ovejas en el corral y se sitúa con la parte trasera hacia la cámara, mientras que todas las demás ovejas miran hacia la cámara. Las ovejas son animales sociales que se mueven en grupos, pero esta oveja no sigue inmediatamente a las otras y parece lenta en darse cuenta de que las demás ovejas se han ido en sentido horario. Se provoca un movimiento circular tras el examen de esta oveja.Este comportamiento compulsivo solo cesa cuando se acerca un ovino y este huye. El ovino con EBT atípica cae al suelo cuando se lo manipula tras haberlo capturado. Prueba de respuesta al amenaza: mover la mano o varios dedos varias veces hacia cada ojo del animal sin tocar ningún pelo facial ni generar corrientes de aire.La turbulencia debería provocar parpadeo, como se observa en ambos ojos y en las ovejas sanas. La respuesta de las ovejas se pierde en los animales con escrapie atípica, que no parpadean, aunque su capacidad para parpadear cuando se tocan los párpados no está afectada.La oveja con EEB atípica parpadea en respuesta a la amenaza, pero la respuesta de parpadeo es débil en el ojo izquierdo en comparación con la respuesta de parpadeo. Cuando se toca el párpado, se realiza la prueba de la respuesta al rasguño; estas pruebas se llevan a cabo mientras la oveja está de pie junto a una pared, y se evita que escape hacia adelante con una pierna del examinador, lo que permite que la oveja esté lo suficientemente tranquila como para continuar con la prueba. Se rascan varias áreas de la espalda: la región sacra lumbar, toracolumbar, torácica media y torácica craneal, con una pausa entre cada episodio de rasguño para observar la respuesta.Este oveja clínicamente sana no muestra una respuesta estereotipada repetible. De manera similar, la oveja con escrapie atípica no responde al rasqueteo de varias áreas de la espalda. Sin embargo, se elicia una respuesta cuando se rasqueta a la oveja con BSC atípica.Dependiendo del área que se rasca, el animal reacciona con movimientos de roce de los labios o movimientos de la cabeza. Esta respuesta se considera positiva al verificar la pérdida de pared y lesiones cutáneas. Por lo general, se pueden observar a distancia amplias áreas de pérdida de pared, con o sin lesiones cutáneas, pero un examen más detallado del ovino durante la contención puede identificar áreas más pequeñas de pérdida de pared causadas por prurito excesivo.Estas áreas se encuentran a menudo en la cabeza, espalda, dorso y costado del tórax o abdomen, generalmente con simetría bilateral. Mientras que no se detecta pérdida de lana en las ovejas de control ni en las ovejas con escrapie atípica, las ovejas con BSC atípica han perdido su lana en la región polar. La piel se encuentra intacta en los demás aspectos, excepto por una pequeña costra que se ha formado tras un daño en la piel.Esto podría haber sido causado por una puntuación excesiva del prurito en la condición corporal. La condición corporal del animal se evalúa palpando los procesos transversos y dorsales de la región lumbar. Esto también puede realizarse durante la prueba de rascado en las ovejas.Se puede utilizar una puntuación de cero a cinco, asignándose cinco a un ovino muy obeso. Esto se representa en la imagen dibujada de una sección transversal a través de la columna vertebral lumbar. Los procesos de las vértebras están cubiertos por músculo en rojo y tejido adiposo en amarillo, y sería imposible llenar los extremos de los procesos transversos incluso si se aplicara presión sobre la piel.Por el contrario, la condición corporal es deficiente. Si los extremos de las apófisis espinosas se sienten afilados, de modo que al aplicar presión no se percibe ninguna capa de grasa subyacente, como se muestra en esta imagen, esto se calificaría como cero.La condición corporal es muy buena en las ovejas clínicamente sanas, con una puntuación de cuatro. La escrapie atípica provocó una pérdida en la condición corporal, que es solo aceptable con una puntuación de dos. Por otro lado, la oveja con BSC atípica ha mantenido una buena puntuación de condición corporal de tres. Para cegar al animal, la cabeza de la oveja se cubre aquí con una venda casera, que podría ser cualquier bolsa no C3 a la que se le ha cortado una esquina para permitir que el animal respire por la nariz antes de soltar a la oveja; asegúrese de que sea seguro para el animal hacerlo.Algunas ovejas pueden entrar en pánico y correr o saltar, y podrían correr el riesgo de lastimarse a sí mismas o a otros. En este caso, no suelte por completo a la oveja y observe los movimientos del animal mientras aún lo sostiene. La oveja sana permanece tranquila y con los ojos vendados, pero mueve la cabeza en un intento por quitarse la venda.Su movimiento o equilibrio no se ve afectado. En contraste, la oveja con escrapie atípica comienza a girar en sentido horario. También hay pérdida de equilibrio.La oveja con BSC atípica muestra reticencia a moverse y se apoya contra el obstáculo, pero mientras lo hace, cruza sus cuatro patas y es evidente la pérdida de equilibrio. La evaluación del movimiento del animal, la marcha en la oveja clínicamente sana parece normal. No hay temblor evidente, ni cuando la oveja permanece sin disturbios ni anteriormente durante el manejo.La ataxia está presente en las ovejas con escrapie atípica. Resbala cuando sigue a las demás ovejas y sus movimientos de las extremidades posteriores aparecen incoordinados; se puede observar brevemente un temblor fino de la cabeza cuando la oveja está de pie en el grupo.También es evidente una alteración de la textura en las ovejas marcadas con EEB atípica. Hay una pérdida del equilibrio en la coordinación y una hipermetría, como puede observarse en la zancada exagerada y la caída. Interpretación de la marcha.Los signos clínicos observados en aquellos ovinos afectados por encefalopatías espongiformes transmisibles incluyeron comportamiento anormal, respuesta de amenaza ausente, respuesta positiva al rasqueteo, alopecia, daño cutáneo, movimientos circulares cuando estaban vendados, falta de coordinación y temblores, mostrándose uno o más de estos signos en el caso presentado aquí. La presencia de cualquiera de estos signos debe alertar al examinador y se debe considerar la scrapie como una de las causas posibles. Conclusión: Este video muestra el protocolo de examen clínico realizado en un ovino clínicamente sano y proporciona ejemplos de hallazgos anormales en ovinos afectados por encefalopatías espongiformes transmisibles.Este protocolo es útil para detectar casos clínicamente sospechosos que pueden examinarse con mayor detalle para descartar otras enfermedades con una presentación clínica similar, o puede utilizarse para evaluar el inicio clínico, la progresión de la enfermedad o los puntos finales clínicos. En estudios experimentales de encefalopatías espongiformes transmisibles en rumiantes pequeños.

clinical-examination-protocol-to-detect-atypical-classical-scrapie

Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

Medicina

A continuación se describe un ensayo de novela de Vigilancia de la aceptación de priones y el tráfico por las células inmunes inmediatamente después de la inoculación intraperitoneal de purificación y el etiquetado fluorescente barras de agregados de priones a partir de material cerebral infectado entonces el seguimiento de su consumo y el movimiento del punto de inyección y la caracterización de las células mediadoras de estos eventos.

Monitoreo células inmunes Tráfico Varillas fluorescente priones horas de la infección intraperitoneal

Los carroñeros tienen potencial para trasladar infecciosas priones de encefalopatía espongiforme transmisible en sus heces a las zonas libres de la enfermedad. Nos detalle los métodos utilizados para determinar si priones de scrapie adaptados-ratón permanecen infecciosa después del paso a través del tracto digestivo de cuervos americanos (Corvus brachyrhynchos), un consumidor común de animales muertos.

Procedimientos para la Identificación de priones infecciosos después de pasar por el sistema digestivo de una especie de aves

Medir la barrera a la transmisión entre especies de enfermedades priónicas es un desafío y generalmente implica desafíos con animales o ensayos bioquímicos. Aquí, presentamos un ensayo de conversión de proteínas priónicas in vitro con la capacidad de predecir barreras de especies.

La evaluación de la encefalopatía espongiforme transmisible Especies Barreras con un<em&gt; In Vitro</em&gt; Prion Análisis de Conversión de proteínas

Aquí, presentamos un protocolo para describir una técnica de amplificación del prión simple, rápido y eficiente, el método de conversión inducida por el temblor en tiempo real (RT-QuIC).

En tiempo real temblando inducida por conversión de ensayo para la detección de priones CWD en materia Fecal

La prueba inmunohistoquímica rápida directa (DRIT) ofrece una alternativa reconocida de la Organización Mundial de Sanidad Animal y la Organización Mundial de la Salud (OIE/OMS) a la prueba de anticuerpos fluorescentes directos (DFA) para el diagnóstico de la rabia. Esta prueba permite aplicaciones basadas en el campo que se pueden realizar en aproximadamente 1 h sobre impresiones cerebrales utilizando microscopía de luz.

Vigilancia mejorada de la rabia mediante una prueba inmunohistoquímica rápida directa

El objetivo de este protocolo es demostrar técnicas de necropsia seguras en animales pequeños y grandes para obtener muestras de tejido satisfactorias para pruebas de rabia.

Técnicas de Necropsia de Rabia en Animales Grandes y Pequeños

El inmunomarcaje de proteínas priónicas anormales mediante protocolos inmunohistoquímicos requiere metodologías específicas de preparación de muestras y anticuerpos anti-PrP. El presente protocolo describe los pasos clave en el desenmascaramiento de epítopos para garantizar un inmunoetiquetado adecuado de PrP y minimizar la tinción de fondo no específica. Además, este enfoque considera medidas de bioseguridad al realizar estudios inmunohistoquímicos con los tejidos infectados por priones.

Detección de proteína priónica anormal por inmunohistoquímica

La encefalomielitis autoinmune experimental es uno de los modelos murinos de esclerosis múltiple más utilizados. En el protocolo actual, los ratones C57BL/6J de ambos sexos son inmunizados con el péptido glicoproteico de los oligodendrocitos de mielina, lo que resulta principalmente en paresia ascendente de la cola y las extremidades. Aquí discutimos el protocolo de inducción y evaluación de EAE.

Modelización de la esclerosis múltiple en los dos sexos: encefalomielitis autoinmune experimental inducida por MOG35-55

Este protocolo demuestra el ensayo de reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RT-PCR) pan-lyssavirus LN34 en tiempo real desde la recolección de tejidos hasta la interpretación de los resultados, incluidas las actualizaciones de las secuencias de cebadores y formulaciones para mejorar el rendimiento del ensayo para algunos lyssavirus y lagomorfos no antirrábicos. También demostramos la configuración del ensayo para un formato multiplexado LN34 de un solo pocillo (LN34M).

Diagnóstico postmortem de la rabia en animales mediante el ensayo de reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa LN34 en tiempo real multiplexado actualizado

Falta un método para evaluar las áreas de uso común en entornos de laboratorio para detectar la contaminación priónica y una descontaminación efectiva. El protocolo descrito aquí proporciona los fundamentos clave para implementar una prueba de deslizamiento de seguridad priónica de laboratorio que se puede modificar fácilmente para satisfacer las necesidades individuales de laboratorios específicos.

Prueba de deslizamiento de laboratorio de seguridad priónica

Aprenda un protocolo clínico de cinco minutos para detectar tembladera clásica y atípica en ovejas y cabras. Este método mejora el reconocimiento temprano de encefalopatías espongiformes en pequeños rumiantes.

Protocolo de examen clínico para detectar la tembladera atípica y clásica en ovejas

Explorar más videos