Name: Terapia basada en células de la insuficiencia cardiaca en rata: Doble toracotomía para infarto de miocardio y epicardio implantación de células y Biomatrix (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: Aprende una técnica de toracotomía doble mínimamente invasiva en ratas para tratar el infarto de miocardio mediante ligadura de la arteria coronaria descendente anterior y aplicación epicárdica de células y matriz.

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Los autores agradecen al Prof. Hendrik Tevaearai y el Departamento de Cirugía Cardiovascular de apoyo financiero a la parte inicial del estudio.

NOTA: Lewis ratas machos y hembras, de 200-220 g fueron alojados en condiciones de laboratorio estándar (12 horas de luz y oscuridad ciclo, agua ad libitum y alimento, IVC jaula). Todos los animales fueron tratados de acuerdo con las recomendaciones del la Ley suiza FELASA y en materia de protección animal. 1. Cell Preparación: Aislamiento de células madre mesenquimales de la médula ósea <ol><li> Anestesiar las ratas con isoflurano al 5% y O 2 5 L / min en una cámara de inducción durante 5 min. Coloque el hocico del animal en un cono de nariz conectado al sistema de anestesia. Realizar un dedo del pie o de la cola pellizcar para confirmar la sedación. </li><li> Quitar la piel de la pierna con unas tijeras cortando la piel desde el tobillo hasta la cadera. Quitar los músculos y cortar la arteria femoral por desangramiento animal. Exponer la articulación de la cadera y luxación de la cabeza del fémur. Es importante no dañar la cabeza del fémur. Coloque los huesos en PBS estéril en un tubo de plástico de 50 ml. </li><li> Retire todos los muscles y ligamentos de los huesos sin romperlos. NOTA: Es importante que el hueso se mantiene intacta para evitar la vinculación de la solución de enjuague o contaminación con etanol. Enjuague los huesos pelados en etanol al 70% durante 5 min. </li><li> Bajo la campana de flujo laminar estéril, cortar en ambos extremos de los huesos con tijeras. Enjuague la médula ósea mediante la inyección de PBS estéril desde el extremo del hueso. Recoger ósea en un tubo de 15 ml. Centrifugar 7 min a 300 x g. </li><li> Eliminar el sobrenadante. Suspender el sedimento en 3 ml de glóbulos rojos Tampón de lisis. Incubar la suspensión durante 1 min a temperatura ambiente antes de girar de nuevo durante 7 minutos a 300 x g. En un frasco de cultivo de 150 ml, añadir medio de cultivo celular estéril (395 ml de medio IMDM, 5 ml penicilina / estreptomicina, 100 ml de FBS) y sembrar las células. </li><li> Cambie medio del segundo día para eliminar las células no adherentes. <ol><li> Realizar cambios de medio cada dos días durante 2-3 semanas, hasta que se obtiene la cantidad de células deseada. </li><li> Por otra parte, preparar el biograft por semillaing las células sobre la matriz sólida según sea necesario y descrito en otra parte 3. </li></ol></li><li> El día de la implantación cardiaca, preparar las células o cosechar el biograft justo antes de la aplicación del epicardio. <ol><li> Recoger las células por medio de solución de desprendimiento celular Accutase. Contar las células. Llenar un tubo de centrífuga de 1,5 ml con el volumen de suspensión celular calculada de obtener una cantidad de células deseado. Centrifugar durante 7 min a 300 xg y eliminar el sobrenadante. </li><li> Como alternativa, recoger el biograft del medio de cultivo celular, se lava en PBS estéril, y mantenerse en medio de cultivo fresco sin suero. </li></ol></li></ol> 2. Primera toracotomía y LAD Ligadura <ol><li> Pese la rata. Encienda la almohadilla térmica a 37 ° C. Anestesiar la rata con 5% de isoflurano y 5 L / min 100% de O 2 en una cámara de inducción de 5-7 min. Realizar un dedo del pie o de la cola pellizcar para confirmar la sedación. Coloque la rata sobre el cojín eléctrico. </li><li> Intubar al animal con un 14T catéter iv. Conectar el catéter de intubación a un ventilador de roedores programado para 2,5 L / min de oxígeno, 2,5% de isoflurano, volumen corriente de 2 ml, y una frecuencia de respiración de 90 respiraciones / min. </li><li> Preparar una solución de buprenorfina a 0,1 mg / kg. Inyectar por vía subcutánea un tercio de la solución. Afeitarse la parte izquierda del tórax. Desinfectar con una solución de Betadine 1%. </li><li> Incisión en la piel perpendicular al esternón en el cuarto espacio intercostal. Separe las 3 capas de músculo torácico (pectoral mayor, ascendiendo pectoral y pectoral oblicuo externo). Abra el cuarto espacio intercostal (entre las costillas 4 y 5). </li><li> Utilice un pequeño retractor para separar las costillas y para exponer el corazón. Abra el pericardio cuidadosamente. Busque y ligar la arteria descendente anterior coronaria (LAD) con un 7,0 sutura 4 mm por debajo del atrio. </li><li> Cerrar el espacio intercostal con dos puntos de sutura utilizando 3,0 suturas. Coloque los dos suturas proximal y distalmente desde el esternón. En primer lugar, tighten la sutura distal. Cierre la tubería de escape del ventilador durante 2 segundos con el fin de inflar el pecho y evitar cualquier neumotórax. Apriete la segunda sutura. Coloque las capas de músculos en su lugar (no se necesitan puntos de sutura). Cierre la piel con una sutura de 5,0. </li><li> Desinfectar la sutura con una solución de Betadine 1%. Inyectar el resto de la solución de buprenorfina. Apague el sistema de anestesia. Retire el catéter de intubación. </li><li> Mantenga la rata en la jaula bajo una lámpara caliente durante 1-2 horas. Mantenga un termómetro en la jaula y controlar la distancia entre la lámpara caliente y la jaula con el fin de evitar el exceso de calentamiento. Volver a la rata en la unidad IVC. Inyectar por vía subcutánea Buprenorfina 0,05-0,1 mg / kg mensaje -operatively cada 6-12 h durante 48 h. </li></ol> 3. Administración epicárdica de la Vía Tratamiento Segundo toracotomía <ol><li> Repita los pasos 2.1 a 2.3. </li><li> Incisión en la piel perpendicular al esternón en el quinto espacio intercostal. Se separa la capa 3s de los músculos torácicos (pectoral mayor, ascendiendo pectoral y pectoral oblicuo externo). Abra el quinto espacio intercostal (entre las costillas 5 y 6). </li><li> Utilice un pequeño retractor para separar las costillas y para exponer el corazón. Si hay alguna adherencia, retire con cuidado con unas pinzas finas. </li><li> Localizar el área de infarto que aparece como un área pálido por debajo de la ligadura. NOTA: Cuando sea necesario, utilice un trozo de 10 cm de sutura (7.0) que se inserta en el ápice para visualizar mejor el ventrículo izquierdo. Tire suavemente a la sutura mantenido ligeramente por una abrazadera para exponer el corazón. </li><li> Aplicar uno de los siguientes tratamientos: <ol><li> Coloque el biograft en la superficie del corazón. Utilice la jeringa precargada sellador de fibrina precalentado a temperatura ambiente durante 10 min. Aplique una gota (50-100 l) de sellador de fibrina en el biograft utilizando una aguja de 25 G Luer. Verifique que el biograft está perfectamente sellada. </li><li> Por otra parte, aplicar el sedimento de células recogido con una punta de pipeta en la superficie of el corazón en el área de pálido por debajo de la ligadura. Aplicar una gota (50-100 l) del sellador de fibrina en el sedimento celular. </li></ol></li><li> Retire el trozo de sutura desde el vértice. </li><li> Repita los pasos 2.6 a 2.8. </li></ol>

<ol><li>Gjesdal, O., Bluemke, D. A., Lima, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+remodeling+at+the+population+level--risk+factors%2C+screening%2C+and+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Cardiac remodeling at the population level--risk factors, screening, and outcomes.</a> Nat. Rev. Cardiol. 8, 673-685 (2011).</li>
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</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

La ligadura permanente de LAD causa daño irreversible del miocardio. El primer modelo animal fue descrito en 1960 4. Desde entonces, se ha considerado como un modelo estándar y adecuado para MI crónica. Su estabilidad y reproducibilidad permite la evaluación experimental de las terapias para el MI 5. Mejora de los procedimientos posteriores a la descripción inicial reportaron una tasa de mortalidad operatoria del 35-13% 6. Como era de esperar, la ligadura de ...

Desde finales del siglo 19, la enfermedad cardiovascular sigue siendo la principal causa de muerte en serie en los países industrializados. Entre ellos, enfermedad de la arteria coronaria representa la etiología principal. Los resultados de fase aguda en el infarto de miocardio (MI) y es seguido por la remodelación de mala adaptación que se desarrolla progresivamente hacia una fase crónica e insuficiencia cardíaca severa. A pesar de los últimos avances tecnológicos y terapéuticos significativos, la morbilidad y la mortalidad debido a la progresión de la insuficiencia cardiaca sigue creciendo 1. En este contexto, la terapia celular se ha ganado un creciente interés como una nueva opción terapéutica para detener la progresión de la enfermedad hacia la insuficiencia cardíaca y para estimular la capacidad regenerativa recientemente identificado del miocardio. Las investigaciones experimentales y clínicos han proporcionado evidencia convincente de los efectos beneficiosos obtenidos después de trasplante cardíaco de diversos tipos de células. Resultados principales incluyeron la mejora de cardifunción contráctil ac, disminuyó la remodelación ventricular izquierda, redujo el tamaño del infarto, y el aumento de la densidad vascular en la zona infartada. Sin embargo, la retención de número bajo de células después de la inyección de células se mantuvo un importante inconveniente. Asociación de células con un biomatriz para mejorar la entrega de la celda 2 han contribuido a alimentar el investigador y los intereses clínicos. La ligadura de la arteria descendente anterior coronaria (LAD) es un método de referencia para la MI en modelo animal pequeño que resulta en infarto transmural y una cicatriz madura. La terapia celular aplicada en la fase crónica de MI requiere una segunda intervención quirúrgica. Una esternotomía media se lleva a cabo por lo general para permitir la inyección intramiocárdica de las células o la implantación epicárdica del biografts. Tales procedimientos quirúrgicos invasivos aumentan la tasa de mortalidad, después de la cirugía el tiempo de recuperación, dolor, y el riesgo de infección. El abordaje mínimamente invasivo que aquí se presenta no sólo evita que ese sesgo, sino también proporciona oaccesibilidad ptimal del corazón para la aplicación del tratamiento. MI e implantación epicárdica de células asociadas a un tipo de gel biomatriz se realizan en un corazón que late a través de una toracotomía intercostal izquierdo.

<table><tbody><tr><td>Sutura Polysorb 3-0 Sutura</td><td>Covidien</td><td>UL 204</td><td></td></tr><tr><td>Polysorb 5-0 Sutura</td><td>Covidien</td><td>UL 202</td><td></td></tr><tr><td>Surgipro II 7-0</td> Catéter <td>Covidien</td><td>VP904X</td><td></td></tr><tr><td>Insyte 14 G</td><td>BD</td><td>381267</td><td></td></tr><tr><td>Inspira Ventilador Avanzado de Volumen Controlado</td><td>Harvard Aparato</td><td>557058</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas Dumont #7</td><td>FST Alemania</td><td>11274-20</td><td></td></tr><tr><td>Sellador de Fibrina</td><td>Baxter</td><td>1501441</td><td>Pegamento TISSEEL, Congelado -20 &deg; C</td></tr><tr><td>Castroviejo Eye Specula</td><td>Harvard Apparatus</td><td>72-8925</td><td>uso como retractor para las costillas</td></tr><tr><td>IMDM GlutaMAX</td><td>Gibco</td><td>31980</td><td></td></tr><tr><td>Pen/Strep</td><td>Gibco</td><td>15140</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>PAA Clone</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; A15-101</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras para huesos</td><td>Herramientas de ciencia fina</td><td>16044-10</td><td></td></tr><tr><td>Solución de lisis de glóbulos rojos Gentra</td><td>Systems</td><td>D-50k1</td><td></td></tr><tr><td>Solución de desprendimiento de células Accutase</td><td>Tecnología de células madre</td><td>7920</td><td></td></tr></tbody></table>

terapia basada en células de la insuficiencia cardiaca en rata: doble toracotomía para infarto de miocardio y epicardio implantación de células y biomatrix

Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix

Terapia celular cardíaca ha ganado cada vez más interés e implantación de biomateriales asociados a células se ha convertido en un problema importante para optimizar la entrega de las células del miocardio. Modelo de roedor de infarto de miocardio (IM) que consiste en arteria descendente anterior izquierda (LAD) ligadura comúnmente se ha realizado a través de una toracotomía; una segunda operación a corazón abierto a través de una esternotomía tradicionalmente se ha realizado para la aplicación epicárdica del tratamiento. Desde la descripción del modelo de la ligadura de LAD, la tasa de mortalidad después de la cirugía se ha reducido desde 35 hasta 13%, sin embargo la segunda cirugía se ha mantenido crítico. Con el fin de mejorar la recuperación después de la cirugía y reducir el dolor y la infección, se presentan procedimientos quirúrgicos mínimamente invasivos. Se realizaron dos toracotomías, la inicial para la ligadura de LAD y la segunda para la administración epicárdica tratamiento. Biografts que consisten en células asociadas con matrices de tipo sólido o de gel se aplica sobre la ar infartadaea. LAD ligadura resultado la pérdida de la función del corazón como se confirmó por ecocardiografía realizada después de 2 y 6 semanas. Tricrómico de Goldner tinción realizó en secciones del corazón confirmó la formación de cicatriz transmural. Primera y segunda cirugías resultaron en menos que 10% de mortalidad post-operatorio.

Todos los animales se recuperaron dentro de 1 hora después de una toracotomía. La cicatrización de la herida fue rápida. No se observó ninguna infección o edema. El doble toracotomía izquierda permitió un acceso óptimo al corazón (Figura 1). El dolor y la mortalidad después de la cirugía fueron bajos. El animal se recuperó rápidamente de la cirugía y aumentaron de peso (Figura 2). Kaplan Meir porcentaje de supervivencia fue del 96% para la primera toracotomí...

Implantación de un biograft para tratar el infarto de miocardio inducido por ligadura de LAD en un modelo de roedor ha requerido convencionalmente dos cirugías a corazón abierto. Con el fin de reducir la mortalidad y proporcionar las condiciones óptimas para la fijación de biomatrices sólidos gelatinosos y asociados con las células, se han desarrollado procedimientos mínimamente invasivos.

Terapia basada en células de la insuficiencia cardiaca en rata: Doble toracotomía para infarto de miocardio y epicardio implantación de células y Biomatrix

Cardiac cell therapy has gained increasing interest and implantation of biomaterials associated with cells has become a major issue to optimize myocardial ...

El objetivo de este procedimiento es realizar una doble toracotomía en ratas para llevar a cabo la ligadura coronaria y la aplicación epicárdica. Esto se logra primero realizando una toracotomía en el cuarto espacio intercostal. A continuación, se realiza la ligadura de la arteria coronaria descendente anterior izquierda o LAD.Luego, se realiza una segunda toracotomía dos semanas después en el espacio intercostal quinto. Finalmente, las células y la matriz se aplican sobre la superficie del corazón infartado en funcionamiento. En última instancia, se realiza ecocardiografía para evaluar la función cardíaca y se lleva a cabo histología mediante la medición del tamaño del infarto.La principal ventaja de esta técnica frente a métodos existentes como la esternotomía es que se trata de un enfoque mínimamente invasivo; demostrar el procedimiento será y enviará colaboradores desde nuestro laboratorio. Todos los animales fueron tratados en cumplimiento con las recomendaciones de la F-E-L-A-S-A y la Ley Suiza sobre protección animal. Después de exsanguinar una rata y aislar y limpiar los huesos del fémur según el protocolo descrito, utilice tijeras para cortar ambos extremos de los huesos.Luego, para lavar la médula ósea, inyecte PBS estéril en el interior del hueso y recoja la médula en un tubo de 15 mililitros. Centrifugue la médula ósea recolectada durante siete minutos a 300 ×g. Retire el sobrenadante y añada tres mililitros de tampón de lisis de glóbulos rojos. Suspenda el sedimento, incube la suspensión durante un minuto a temperatura ambiente y luego centrifugue nuevamente durante siete minutos a 300 ×g tras la resuspensión.Suspender el sedimento en medio de cultivo estéril. Añadir medio adicional de cultivo celular en un matraz de cultivo de 150 mililitros y sembrar las células al segundo día de incubación. Cambiar el medio para eliminar las células no adherentes y continuar reemplazando el medio cada dos días durante dos o tres semanas hasta alcanzar la densidad celular deseada.Para realizar la primera toracotomía T, comience por pesar la rata y configure los parámetros del ventilador en consecuencia. El flujo de salida de la ventilación se define automáticamente. Luego, afeite la parte izquierda del tórax, encienda una almohadilla calefactora y ajústela a 37 grados Celsius.Después de anestesiar la rata según el protocolo descrito en el texto, realice una compresión en el dedo del pie o en la cola antes de colocar a la rata en posición supina sobre una almohadilla calefactora utilizando un catéter intravenoso de calibre 14, entube al animal y luego conecte el catéter de intubación a un ventilador para roedores. Programado para 2,5 litros por minuto de oxígeno, 2,5 % de isoflurano, un volumen tidal de dos mililitros y una frecuencia respiratoria de 90 respiraciones por minuto. Después de preparar una jeringa con buprenorfina a 0,1 miligramos por kilogramo por vía subcutánea, inyecte un tercio de la solución y luego use una solución de Betadine al 1 % para desinfectar el área.A continuación, haga una incisión en la piel perpendicular al esternón en el cuarto espacio intercostal y separe las tres capas del músculo torácico. Luego, abra el cuarto espacio intercostal entre las costillas cuatro y cinco. Utilice un pequeño retractor para separar las costillas y exponer el corazón.Luego, abra cuidadosamente el pericardio y localice la arteria coronaria descendente anterior izquierda o LAD, y utilice una sutura 7.0 para ligarla cuatro milímetros por debajo del atrio. A continuación, controle el cambio de color del área isquémica con suturas tres cero colocadas aproximadamente y distalmente desde el esternón. Haga dos puntos que se utilizarán para cerrar el espacio intercostal.Apretar la sutura distal. Pinzar el tubo de escape del ventilador durante dos segundos para inflar el tórax y evitar un neumotórax. A continuación, apretar la segunda sutura.Coloque las capas musculares de nuevo en su lugar. Luego use sutura de número cero para cerrar la piel con solución de Betadine al 1 %. Desinfecte la sutura e inyecte la solución restante de buprenorfina.Apague el sistema de anestesia y retire el catéter de intubación. Mantenga la rata en una jaula bajo una lámpara caliente durante una a dos horas antes de devolverla a una unidad IVC. Dos semanas después de la primera toracotomía, la cicatrización está completa y la cicatriz es apenas visible.Después de seguir el procedimiento descrito anteriormente en este video para preparar la rata para la cirugía, haga una incisión en la piel perpendicular al esternón en el espacio intercostal quinto. Separe las tres capas musculares y abra el espacio intercostal quinto entre las costillas cinco y seis. Utilice un pequeño retractor para separar las costillas y exponer el corazón.Si hay alguna adherencia, utilice pinzas finas para aliviarla cuidadosamente. A continuación, localice el área de infarto que aparece como una zona pálida por debajo de la ligadura. Si es necesario, inserte un trozo de 10 centímetros de sutura siete ceros en el ápice y tire suavemente de ella para visualizar mejor el ventrículo izquierdo.Luego, aplicar las células y la matriz sobre la superficie de la zona isquémica del corazón. Después de la centrifugación, depositar cuatro veces 10 a la seis células, como se describe en el protocolo del texto, sobre el corazón antes de cubrirlo con un sellador de fibrina. La capa de pegamento fija las células a la superficie del corazón.Después de retirar el trozo de sutura de la posición apical, suturar nuevamente las capas musculares, colocarlas en su lugar y desinfectar al animal. Como se demostró anteriormente en el video, que se muestra aquí. Después de la intervención quirúrgica, los animales perdieron peso y se recuperaron rápidamente antes de ganar peso, independientemente del tratamiento aplicado. Como se muestra en esta gráfica de Kaplan, la tasa de supervivencia es alta después de la primera toracotomía; los animales tratados con fibrina y/o células mostraron tasas de supervivencia más bajas que los otros grupos, tal como se observa en esta gráfica.Sin embargo, las tasas de supervivencia general se mantuvieron altas tras una segunda intervención. La función cardíaca tras la toracotomía y el tratamiento se evaluó mediante ecocardiografía. Estas imágenes representativas en modo M de animales sanos y con infarto ilustran que la contractilidad de la pared del VI queda abolida dos semanas después de la ligadura de la AD. La fracción de acortamiento se registró dos semanas tras la ligadura de la AD en un total de 104 animales.La distribución de frecuencia muestra métodos razonablemente reproducibles con un coeficiente de variación del 17 %. Esta figura muestra la representación gráfica de la función cardíaca mediante la fracción de eyección medida a las dos y seis semanas posteriores a la ligadura de la LAD. La función cardíaca continúa disminuyendo durante este período. La remodelación cardíaca también ocurre durante este tiempo y se representa aquí mediante un aumento en los volúmenes del VI registrados tanto en sístole como en diástole. Finalmente, la tinción con tricrómico de Masson en secciones cardíacas reveló que se desarrolló tejido fibroso y, eventualmente, una cicatriz transmural a las seis semanas posteriores a la ligadura de la LAD. Una vez dominada, esta técnica puede realizarse en 30 a 40 minutos si se lleva a cabo adecuadamente.Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo realizar una doble toracotomía mínimamente invasiva.

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Investigación

JoVE Journal

Bioengineering

Bioingeniería

Este video muestra cómo utilizar un modelo rápido y fiable para estudiar los procesos patobiológicas y fisiopatológicos de la isquemia miocárdica.

LAD-Ligadura: un modelo murino de infarto de miocardio

Los métodos para preparar una matriz de gel inyectable de tejidos descelularizada e inyectarlo en ratas...

Fabricación de materiales de origen biológico inyectable para ingeniería de tejidos del miocardio

Numerosas manipulaciones genéticas y / o inyecciones intramiocárdica de genes, proteínas, células, y / o los biomateriales se superponen a la dimensión del tiempo en los estudios de agudos de isquemia / reperfusión y la remodelación crónica en ratones. Este video ilustra los procedimientos de microcirugía de la isquemia / reperfusión, la ligadura permanente de la arteria coronaria, y los estudios de inyección intramiocárdica.

Ligadura de las arterias coronarias y la inyección intramiocárdica en un modelo murino de infarto

Para la creación de estructuras altamente organizadas de tejido complejo, se deben ensamblar múltiples tipos de materiales y células en un compuesto integrado.  Este diseño combinatorio incorpora láminas de células estratificadas específicas de órganos con dos materiales distintos derivados de la biología que contienen una fuerte base de matriz fibrosa y células endoteliales para mejorar la formación de nuevos vasos.

Ingeniería de tejidos: Construcción de un multicelular 3D Andamios para la entrega de láminas de células en capas

De suministro de células intramiocárdica en modelos murinos de enfermedades cardiovasculares, como la hipertensión o infarto de miocardio, es ampliamente utilizado para poner a prueba el potencial terapéutico de diferentes tipos de células en los estudios de regeneración. Por lo tanto, una descripción detallada y una visualización clara de este procedimiento quirúrgico ayudarán a definir los límites y las ventajas de los análisis de células terapéuticas cardiovasculares en pequeños roedores.

Intramiocárdica celular de la entrega: Las observaciones en murinos Hearts

Presentamos tres protocolos nuevos y más eficientes para la diferenciación de células madre pluripotentes inducidos por el hombre en cardiomiocitos, células endoteliales, y células del músculo liso y un método de entrega que permite mejorar el injerto de las células transplantadas mediante la combinación de la inyección de células con la entrega de citoquinas parche mediada.

Pluripotentes células madre derivadas de células cardiacas para la reparación del miocardio

Nuevas estrategias terapéuticas en medicina regenerativa cardiaca requieren extensos y detallados estudios en modelos animales preclínicos grandes antes que pueden ser considerados para el uso en seres humanos. Aquí, demostramos una técnica de inyección de contraste percutánea guiada por ecocardiografía intramiocárdica en conejos, que es valiosa para la hipótesis que prueba la eficacia de estas nuevas terapias.

Inyección de contraste percutánea guiada por ecocardiografía intramiocárdica y entrega de celular en un modelo preclínico grande

Aquí presentamos un protocolo para la inducción de la criocauterización ventricular izquierdo seguido de la implantación de un parche de músculo cardiaco, derivado de los cardiomiocitos células iPS humanas en un modelo del conejillo de Indias.

Implantación de parches hiPSC derivado de músculo cardiaco después de lesión del miocardio en un modelo del conejillo de Indias

Buscamos establecer un modelo porcino de insuficiencia cardíaca inducida por la obstrucción de la arteria circunfleja izquierda y un ritmo rápido para probar el efecto y la seguridad de la administración intramiocardial de células madre para terapias basadas en células.

Establecer un modelo porcino de infarto de infarto post-miocardio insuficiencia cardíaca para el tratamiento de células madre

Células madre se investigan continuamente como tratamientos potenciales para individuos con daño miocárdico, sin embargo, su disminución de la viabilidad y retención dentro del tejido lesionado puede afectar su eficacia a largo plazo. En este manuscrito describimos un método alternativo para la entrega de células madre en un modelo murino de lesión por reperfusión de isquemia.

Retraso en la administración intramiocardio de células madre después de la lesión por reperfusión de isquemia en un modelo murino

La administración de células guiadas por ultrasonido alrededor del sitio del infarto de miocardio en ratones es una forma segura, efectiva y conveniente de trasplante de células.

Implantación de cardiomiocitos derivados de células madre pluripotentes inducida por ultrasonido en ratones con infartado de miocardio

Aprende una técnica de toracotomía doble mínimamente invasiva en ratas para tratar el infarto de miocardio mediante ligadura de la arteria coronaria descendente anterior y aplicación epicárdica de células y matriz.

Terapia basada en células de la insuficiencia cardiaca en rata: Doble toracotomía para infarto de miocardio y epicardio implantación de células y Biomatrix (Video) | JoVE Journal

Terapia basada en células de la insuficiencia cardiaca en rata: Doble toracotomía para infarto de miocardio y epicardio implantación de células y Biomatrix

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