Name: El seguimiento de la contaminación microbiana en los entornos comerciales Usando fluorescente Polvo - Un menor Charcutería Ambiente Ejemplo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-03-05T17:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 49 s
Description: Aprenda a rastrear la contaminación microbiana en entornos comerciales usando polvo fluorescente. Este método demuestra el mecanismo de contaminación cruzada de Listeria monocytogenes en charcuterías.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Los autores desean agradecer a todos los estudiantes del laboratorio de seguridad alimentaria y de los voluntarios que ayudaron con este estudio. Esta investigación ha sido financiada por la Iniciativa de Seguridad USDA Nacional Integrado de Alimentos (NIFSI) subvención (Award # 10507316).

1. Curva Estándar <ol><li> Pesar el polvo fluorescente 37,5 mg y disolver en 6 ml etanol 200 proof. Hacer 2 veces diluciones seriadas de esta solución en etanol 200 proof. </li><li> Vortex todas las muestras durante 10 segundos y medir la absorción a 370 nm. </li><li> Calcular la cantidad de polvo fluorescente por 1 ml de etanol prueba 200. </li><li> Preparar la curva estándar (concentración en mg / ml en el eje y, y la absorbancia a 370 nm en el eje x) para demostrar la absorbancia sobre la base de la concentración de polvo fluorescente. </li></ol> 2. Inocular Deli Meat (Bologna) con el polvo fluorescente <ol><li> Cortar la carne deli en aproximadamente 100 mm muestras gruesas con un cuchillo limpio y tabla de cortar. Prepare tres muestras marcadas A, B, y C. </li><li> Muestra Escudo Un uniformemente con polvo fluorescente usando un poco húmedo, esponja limpia. Corre el polvo en la muestra de carne uniformemente. No inocular las muestras B y C con el polvo fluorescente. </li&gt; <li> Envuelva las muestras con papel plástico y la etiqueta de la muestra con recubrimiento de polvo fluorescente como &quot;A&quot; y el restante dos muestras como B y C con cinta adhesiva. </li><li> Coloque las muestras en el caso de deli o refrigerador mantenido a 4 ° C en la cocina maqueta donde se llevará a cabo el experimento. </li></ol> 3. Mock Deli Preparación Cocina <ol><li> Proporcione guantes limpios y el 70% de pulverización de etanol en la cocina. </li><li> Montar las luces fluorescentes compactas negras con 13 bombillas W alrededor del área de la máquina de cortar. </li><li> Preparar un recorte de 5 cm x 5 cm de papel de aluminio para servir como una plantilla para limpiando. </li><li> Preparar tubos de 15 ml que contienen 6 ml de etanol al 95%. </li></ol> 4. Configuración de vídeo Mount tres cámaras de video en lugares estratégicos para observar todas las áreas del deli simulacro, al mismo tiempo. Encienda las cámaras antes de la simulación de la máquina de cortar de procedimiento (como se explica en el Protocolo 5) y analizar los resultados de forma simultánea (comose explica en el Protocolo n º 7). 5. Simulación de Procedimientos Deli rebanar a la pista Contaminación Cruzada Con el fin de mejorar el tamaño de la muestra e incorporar la variación, lleve a cabo este estudio los participantes de reclutamiento después de la aprobación del protocolo por el Comité de Ética de la institución respectiva. El participante puede ser un estudiante universitario que pueden o no tener experiencia de trabajo en entornos de delicatessen al por menor. Asegúrese de que cada participante lleva guantes una vez que entran las delicatessen. Tome una imagen &quot;anterior&quot; bajo una luz fluorescente negro seguido por un &quot;después&quot; de la imagen tras la finalización del estudio. Proporcionar instrucciones por escrito y verbales a cada participante de la siguiente manera: <ol><li> Ir al refrigerador. </li><li> Retire la carne con la etiqueta &quot;A&quot;. </li><li> Quite el envoltorio de la carne y guardar una envoltura de plástico. </li><li> Coloque la carne en la bandeja de transporte de la máquina de cortar. </li><li> Asegure la carne con el apretón de la carne. </li><li> Gire el interruptor de encendido en ON. </li><li> Ajuste sliperilla de CER en &quot;2&quot;. </li><li> Slice y dispensar 5 trozos de carne sobre papel delicatessen. </li><li> Gire el interruptor de alimentación en OFF y liberar la presión de la carne. </li><li> Coloque las rebanadas de la carne en una bolsa de plástico con la etiqueta &quot;A&quot;. </li><li> Vuelva a envolver la carne &quot;A&quot; y volver a la nevera. </li><li> Repita los pasos 2-11 con las carnes con la etiqueta &quot;B&quot; y &quot;C&quot;. </li></ol> 6. La cuantificación fluorescente Polvo Cuantificar el polvo fluorescente después de la finalización de la maqueta corte en lonchas (Sección 5.4) en la cocina delicatessen. Para ello haga lo siguiente: <ol><li> Utilice la 5 cm x 5 cm de plantilla de papel de aluminio estéril y colóquelo en las áreas marcadas en la Figura 1. </li><li> Use un hisopo de algodón estéril de alginato de calcio empapado en etanol al 95%, limpie el área y colocar en 6 ml de etanol al 95% en un tubo de polipropileno estéril. </li><li> Vortex el tubo a fondo y la transferencia a una cubeta de vidrio para leer la absorbancia a 370 nm. </li><li> Consulte el standarcurva d para determinar la cantidad de polvo fluorescente (y) usando la siguiente ecuación: y = mx + b, donde x es la absorbencia, m es la pendiente de la curva estándar, y b es la intersección. </li><li> Para la normalización de los datos, calcular el porcentaje de polvo fluorescente por área de muestra usando la siguiente fórmula: </li></ol><img src="/files/ftp_upload/51402/51402eq1.jpg" alt="Fórmula 1" /> 7. Análisis de vídeo Videotape los participantes a medida que completas tareas 5.1 a 5.12. Sincroniza y guardar las grabaciones de vídeo en discos DVD para que todos los ángulos se pueden ver al mismo tiempo. Vea los videos para registrar el número de toques manuales (el número de veces que los voluntarios tocan áreas en el deli simulacro) en varias superficies en el entorno de vitrina (4 investigadores diferentes analizarán los establecidos de forma independiente los datos completos).

<ol><li>Sheen, S., Hwang, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mathematical+modeling+the+cross-contamination+of+Escherichia+coli+O157%3A+H7+on+the+surface+of+ready-to-eat+meat+product+while+slicing%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Mathematical modeling the cross-contamination of Escherichia coli O157: H7 on the surface of ready-to-eat meat product while slicing.</a> Food Microbiol. 27, 37-43 (2010).</li>
<li>Crandall, P., Neal, J. Jr, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimizing+the+risk+of+Listeria+monocytogenes+in+retail+delis+by+developing+employee+focused%2C+cost+effective+training%5BTitle%5D)+AND+%22Agric.+Food+Anal.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Minimizing the risk of Listeria monocytogenes in retail delis by developing employee focused, cost effective training.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 1, 159-174 (2011).</li>
<li>Koo, O. K., Sirsat, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+and+chemical+control+of+Salmonella+in+ready-to-eat+products%5BTitle%5D)+AND+%22Agric.+Food+Anal.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Physical and chemical control of Salmonella in ready-to-eat products.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 2, 56-68 (2012).</li>
<li>Hanning, I. B., Johnson, M. G., Ricke, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precut+prepackaged+lettuce%3A+a+risk+for+listeriosis%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Foodborne+Pathog.+Dis%22%5BJournal%5D)">Precut prepackaged lettuce: a risk for listeriosis?</a> Foodborne Pathog. Dis. 5, 731-746 (2008).</li>
<li>Hanning, I. B., Nutt, J. D., Ricke, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salmonellosis+outbreaks+in+the+United+States+due+to+fresh+produce%3A+sources+and+potential+intervention+measures%5BTitle%5D)+AND+%22Foodborne+Pathog.+Dis%22%5BJournal%5D)">Salmonellosis outbreaks in the United States due to fresh produce: sources and potential intervention measures.</a> Foodborne Pathog. Dis. 6, 635-648 (2008).</li>
<li>Zhu, M., Du, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+Listeria+monocytogenes+contamination+in+ready%E2%80%90to%E2%80%90eat+meat+products%5BTitle%5D)+AND+%22Compr.+Rev.+Food+Sci.+Food+Safety%22%5BJournal%5D)">Control of Listeria monocytogenes contamination in ready‐to‐eat meat products.</a> Compr. Rev. Food Sci. Food Safety. 4, 34-42 (2005).</li>
<li>Lianou, A., Sofos, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+incidence+and+transmission+of+Listeria+monocytogenes+in+ready-to-eat+products+in+retail+and+food+service+environments%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">A review of the incidence and transmission of Listeria monocytogenes in ready-to-eat products in retail and food service environments.</a> J. Food Protect. 70, 2172-2198 (2007).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+risk+assessment+of+relative+risk+to+public+health+from+foodborne+Listeria+monocytogenes+among+selected+categories+of+ready-to-eat+foods%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Quantitative risk assessment of relative risk to public health from foodborne Listeria monocytogenes among selected categories of ready-to-eat foods.</a> , http://www.fda.gov/downloads(2003 Forthcoming.</li>
<li>Endrikat, S., Gallagher, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparative+risk+assessment+for+Listeria+monocytogenes+in+prepackaged+versus+retail-sliced+deli+meat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">A comparative risk assessment for Listeria monocytogenes in prepackaged versus retail-sliced deli meat.</a> J. Food Protect. 73, 612-619 (2010).</li>
<li>Pradhan, A. K., Ivanek, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+public+health+impact+of+Listeria+monocytogenes+product-to-product+and+environment-to-product+contamination+of+deli+meats+at+retail%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Comparison of public health impact of Listeria monocytogenes product-to-product and environment-to-product contamination of deli meats at retail.</a> J. Food Protect. 74, 1860-1868 (2011).</li>
<li>Jones, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Handwashing+Technique+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5900067%22%5BJournal%5D)">Handwashing Technique Analysis.</a> Patent number 5900067. , (1999).</li>
<li>Gibson, K. E., Koo, O. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Observation+and+relative+quantification+of+cross-contamination+within+a+mock+retail+delicatessen+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Control%22%5BJournal%5D)">Observation and relative quantification of cross-contamination within a mock retail delicatessen environment.</a> Food Control. 31, 116-124 (2013).</li>
<li>Xiao, M., Zheng, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+and+System+for+Fecal+Detection%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5821546%22%5BJournal%5D)">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5821546. , (1998).</li>
<li>Waldroup, A., Kirby, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+and+System+for+Fecal+Detection%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5621215%22%5BJournal%5D)">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5621215. , (1997).</li>
<li>Ashby, K. D., Wen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+of+dietary+porphyrins+as+a+basis+for+real-time+detection+of+fecal+contamination+on+meat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Agric.+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Fluorescence of dietary porphyrins as a basis for real-time detection of fecal contamination on meat.</a> J. Agric. Food Chem. 51, 3502-3507 (2003).</li>
<li>Cabrera-Diaz, E., Moseley, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+protein+marked+Escherichia+coli+biotype+I+strains+as+surrogates+for+enteric+pathogens+in+validation+of+beef+carcass+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Fluorescent protein marked Escherichia coli biotype I strains as surrogates for enteric pathogens in validation of beef carcass interventions.</a> J. Food Protect. 72, 295-303 (2009).</li>
<li>Byrd, J., Hargis, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+marker+for+the+detection+of+crop+and+upper+gastrointestinal+leakage+in+poultry+processing+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Poult.+Sci%22%5BJournal%5D)">Fluorescent marker for the detection of crop and upper gastrointestinal leakage in poultry processing plants.</a> Poult. Sci. 81, 70-74 (2002).</li>
<li>Vorst, K. L., Todd, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+of+Listeria+monocytogenes+during+mechanical+slicing+of+turkey+breast+bologna%2C+and+salami.%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Transfer of Listeria monocytogenes during mechanical slicing of turkey breast bologna, and salami.</a> J. Food Protect. 69, 619-626 (2006).</li>
</ol>

No hay conflictos de interés declarado.

El objetivo general de este estudio fue demostrar cómo podría producirse una contaminación cruzada de bacterias en un ambiente de delicatessen al por menor con el fin de desarrollar estrategias para controlar y reducir el riesgo de enfermedades transmitidas por alimentos. El entorno de vitrina minorista tiene un riesgo especialmente alto para L. monocytogenes. El USDA-FSIS informó que la carne de deli en rodajas en la tienda al por menor tiene un siete veces mayor asociación con listeriosis que la carne de deli...

La contaminación cruzada de patógenos en el ambiente de preparación de alimentos, especialmente en la sección de venta al por menor, es una gran preocupación, debido a un mayor riesgo de enfermedades transmitidas por alimentos de una variedad de fuentes, incluyendo las carnes, así como las verduras 1-5. Muy a menudo, los patógenos bacterianos entran al medio ambiente al por menor a través de productos alimenticios contaminados 6. Alimentos listos para el consumo preparados a nivel minorista son de particular preocupación, ya que no suele haber más intervención o tratamiento (es decir, la cocción o calentamiento) antes de su consumo 7. Por otra parte, los agentes patógenos presentes en los alimentos LPC contaminada a continuación pueden ser transferidos a otros productos de alimentos o superficies de contacto con alimentos en el entorno minorista. Mientras que la contaminación cruzada puede ocurrir dentro de prácticamente cualquier tipo de entorno comercial de comida, tiendas de delicatessen son de particular interés debido específicamente a la asociación de RTE carnes frías con el patógeno Listeria monocytogenes 2. Sobre la base de una evaluación de los análisis de riesgos realizado por la Food and Drug Administration de EE.UU. (FDA) y el Departamento de Agricultura de Seguridad e Inspección de Alimentos (USDA-FSIS) EE.UU., embutidos contaminados son probables responsables del 90% de los casos de listeriosis - una rara enfermedad humana todavía grave causada por L. monocytogenes - en los Estados Unidos 8. En general, embutidos en rodajas en establecimientos de servicios minoristas y de alimentos han sido asociados con un mayor riesgo de L. monocytogenes en comparación con las carnes frías presliced ​​en una planta inspeccionada por el USDA el fabricante 9. Esto podría ser debido a la mayor probabilidad de introducción de patógenos por los manipuladores de alimentos, materias primas entrantes, o los alimentos procesados ​​que pueden contaminarse después del tratamiento 7. En general, la listeriosis representa aproximadamente el 28% de las muertes estimadas causadas por enfermedades transmitidas por alimentos cada año en los EE.UU. Debido a la enriesgo aumentado de L. monocytogenes en embutidos en rodajas en el nivel minorista, la propia máquina de cortar delicatessen ha sido identificada como un factor importante para la transferencia de la superficie de los patógenos transmitidos por alimentos en el entorno minorista 2,10. Según lo indicado por Sheen 1, rebanar es el último paso del proceso antes de su consumo, por lo tanto, la máquina de cortar deli debe considerarse como un punto crítico de control, tanto para comprender y prevenir la contaminación cruzada 1. El objetivo general de este estudio fue desarrollar una metodología para el seguimiento de la contaminación en el medio ambiente deli menor usando un polvo fluorescente tal como Glo Germ. Este es un compuesto fluorescente que se ha utilizado para simular la contaminación cruzada bacteriana y prácticas sanitarias 11,12. Este estudio fue diseñado para realizar un seguimiento de la transferencia de patógenos de las carnes contaminadas con la máquina de cortar, el medio ambiente circundante, y otros embutidos. Es crucial entender los caminos de contaminación para desarrollar tanto las intervenciones eficaces y material educativo para los empleados del sector minorista y los administradores. Un enfoque similar se puede emplear para simular la transferencia de patógenos en otros entornos de procesamiento (por ejemplo, las aves de corral y carne), granjas y hospitales.

<table><tbody><tr><td>Glo Germ Powder</td><td>Glo Germ Co</td><td></td><td>Comprado al vendedor</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Sigma</td><td>E7023</td><td></td></tr><tr><td>Rotuladores permanentes</td><td>Sharpie</td><td></td><td>Comprado en papelería</td></tr><tr><td>Guantes</td><td>VWR</td><td>82026-424</td><td></td></tr><tr><td>Deli Meat</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Bologna Chub de la tienda de comestibles regular</td></tr><tr><td>Tabla de cortar</td><td>NA</td><td>NA</td><td>A regukar tabla de cortar de cocina</td></tr><tr><td>Cuchillo</td><td>NA</td><td>NA Un</td><td>cuchillo de cocina normal&nbsp;</td></tr><tr><td>Plantillas estériles de 5 cm x 5 cm</td><td>NA</td><td></td><td>NA Plantillas de papel de aluminio cortadas en plantillas de 5 cm x 5 cm y esterilizadas&nbsp;</td></tr><tr><td>15 ml Tubos de centrífuga de polipropileno</td><td>VWR</td><td>89039-664</td><td></td></tr><tr><td>Bastoncillos de algodón</td><td>Puritan</td><td>25-806</td><td></td></tr><tr><td>Cubetas de vidrio</td><td>VWR</td><td>470019-186</td><td></td></tr><tr><td>Vortex</td><td>VWR</td><td>58816-121</td><td></td></tr><tr><td>Cámara plegable</td><td>Flip Ultra HD</td><td>NA</td><td>Comprado en línea</td></tr><tr><td>Cortadora de fiambres</td><td>Bizerba</td><td>SE-12</td><td></td></tr><tr><td>Refrigerador</td><td>Deli True Company</td><td>TDBD-722</td><td></td></tr><tr><td>Escala</td><td></td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Espectrofotómetro</td><td>Milton Roy Company</td><td>NA</td><td>Spectronic 20D</td></tr></tbody></table>

el seguimiento de la contaminación microbiana en los entornos comerciales usando fluorescente polvo - un menor charcutería ambiente ejemplo

Tracking Microbial Contamination in Retail Environments Using Fluorescent Powder - A Retail Delicatessen Environment Example

La contaminación cruzada de patógenos transmitidos por los alimentos en el entorno minorista es un problema de salud pública importante que contribuye a un mayor riesgo de enfermedades transmitidas por alimentos. Alimentos procesados ​​listos para comer (RTE), tales como carnes frías, queso, y en algunos casos, los productos frescos, han estado involucrados en los brotes de enfermedades transmitidas por los alimentos debido a la contaminación con patógenos como Listeria monocytogenes. Con respecto a L. monocytogenes, cortadoras de fiambres son a menudo la principal fuente de contaminación cruzada. El objetivo de este estudio fue utilizar un compuesto fluorescente para simular la contaminación bacteriana y seguimiento de esta contaminación en un entorno minorista. Una cocina deli simulacro fue diseñado para simular el entorno minorista. Carne de Deli se inoculó con el compuesto fluorescente y voluntarios fueron reclutados para completar un conjunto de tareas similares a las que se espera de un empleado menor de alimentos. Los voluntarios fueron instruidos para cortar, empaquetar y almacenar la carne en el refrigerador delicatessen. El potencialcontaminación cruzada fue localizado en el entorno minorista maqueta en muestras de secreciones áreas específicas y medir la densidad óptica de la zona limpia con un espectrofotómetro. Los resultados indicaron que el refrigerador (es decir deli caso) agarre y diversas zonas de la máquina de cortar tenían el mayor riesgo de contaminación cruzada. Los resultados de este estudio pueden ser utilizados para desarrollar material de formación más especializada para empleados del sector minorista. Además, metodologías similares también podrían ser utilizados para rastrear la contaminación microbiana en ambientes de producción de alimentos (por ejemplo, las pequeñas granjas), hospitales, hogares de ancianos, cruceros y hoteles.

La figura 1 representa las áreas de la máquina de cortar que se limpió después de los voluntarios completaron las tareas asignadas. Los voluntarios fueron grabados en vídeo para analizar la frecuencia media de contacto con las manos sobre estos diferentes superficies. La frecuencia de contacto de las manos fue analizado por cuatro observadores diferentes y promedió. Estos resultados se demuestran en la Figura 2. Los datos muestran que la agarre carne, envoltura de carnes frías, carnes f...

El objetivo general de este estudio fue demostrar el potencial mecanismo de contaminación cruzada de patógenos de origen alimentario Listeria monocytogenes en un entorno minorista delicatessen. Esta metodología se puede aplicar a una variedad de diferentes entornos para rastrear la contaminación con patógenos.

El seguimiento de la contaminación microbiana en los entornos comerciales Usando fluorescente Polvo - Un menor Charcutería Ambiente Ejemplo

Cross contamination of foodborne pathogens in the retail environment is a significant public health issue contributing to an increased risk for foodborne ...

El objetivo general de este procedimiento es demostrar el mecanismo potencial de contaminación cruzada del patógeno transmitido por los alimentos, Listeria monocytogenes, en un entorno de delicatessen minorista. Esto se logra primero mediante el diseño de una cocina de delicatessen simulada para reproducir el ambiente minorista.En el segundo paso, se inocula la carne de charcutería con un compuesto fluorescente y luego se pide a voluntarios que corten, envasen y almacenen la carne recubierta en el refrigerador. En el paso final, se rastreará la posible contaminación cruzada observando el compuesto fluorescente bajo luz negra. En última instancia, se puede utilizar espectrometría para cuantificar el compuesto fluorescente, mostrando cómo ocurre la contaminación cruzada en el entorno comercial de charcutería.La principal ventaja de esta técnica frente a los métodos que utilizan microorganismos es que con ella, el compuesto fluorescente puede cuantificarse rápidamente mediante fotometría espectral. Aunque este método puede aportar información útil en el sector minorista, también puede aplicarse a otros sistemas, como pequeñas explotaciones agrícolas, plantas de procesamiento de alimentos y otras operaciones de servicios alimentarios. Comience colocando guantes limpios y etanol al 70 % sobre la mesa para su uso durante el procedimiento.Luego, utilice un cuchillo y una tabla de cortar limpios para cortar la carne de charcutería en tres muestras de aproximadamente 100 milímetros de grosor. A continuación, use una esponja limpia ligeramente húmeda para cubrir uniformemente una muestra con polvo fluorescente recién preparado. Después, envuelva todas las muestras con film transparente y use cinta adhesiva para etiquetar la muestra recubierta con polvo fluorescente como a y las dos muestras restantes como b y c.Luego, coloque las muestras a cuatro grados Celsius y monte luces fluorescentes compactas negras con bombillas de 13 vatios alrededor del área del cortador. Corte un trozo de papel de aluminio de cinco por cinco centímetros para usar como plantilla para hisopar y llene tubos de 1315 mililitros con seis mililitros de etanol al 95% en este momento también. A continuación, monte tres cámaras de video en ubicaciones estratégicas para observar todas las áreas de la delicatessen simulada al mismo tiempo.Para rastrear la contaminación del embutido por el polvo fluorescente, encienda las cámaras para grabar en video a los participantes durante el procedimiento y tome una fotografía previa de la charcutería simulada bajo luz fluorescente negra. A continuación, pida a cada participante que realice lo siguiente. Primero, retire la muestra de embutido etiquetada como A del refrigerador.A continuación, desenrolle la carne, guardando el envoltorio de plástico, y coloque la muestra en la bandeja del carro del cortador. Sujete la muestra con el agarre para carne y luego encienda el cortador y ajuste el botón de índice del cortador a dos. A continuación, corte y retire cinco rebanadas de carne sobre el papel de embalar, luego apague el equipo y libere el agarre para carne.Coloque las rebanadas de la carne en una bolsa de plástico etiquetada como A, y luego vuelva a envolver la muestra de carne y devuélvala al refrigerador después de cortar las muestras B y C como se acaba de demostrar, tomadas tras la fotografía de la cocina simulada. Para cuantificar la contaminación por polvo fluorescente, coloque la plantilla de papel de aluminio estéril sobre cada área indicada en la imagen. Luego, frótelas con un hisopo de algodón de alginato de calcio estéril, empapado en etanol al 95 %, y coloque un hisopo en cada uno de los tubos con etanol al 95 %.Vortexee cada tubo completamente y luego transfiera los contenidos a cubetas de vidrio individuales. Lea la absorbancia de cada muestra de hisopo a 370 nanómetros y utilice entonces la fórmula para calcular la cantidad de polvo fluorescente recolectado de cada área. Finalmente, observe el video para cuantificar el número de veces que se tocaron las diversas superficies del modelo de descontaminación.En este experimento representativo, se grabó en video a voluntarios para analizar la frecuencia promedio de contacto manual con diversas superficies de la cortadora de carne durante la preparación de las rebanadas de embutido. Luego, diferentes observadores analizaron el video y se promedió la frecuencia de contactos manuales. Los datos indican que, como era de esperar, el mango de la carne, el envoltorio de embutido, la carne de embutido y el papel de embutido tuvieron las tasas más altas de contacto manual, con un promedio de ocho a 14 contactos por participante.Las superficies, como la nevera, la mesa de agarre, el agarre de la carne, la cuchilla de la rebanadora y varios componentes de la bandeja de desplazamiento, se frotaron con hisopos, y se cuantificó la cantidad de polvo fluorescente en los diversos componentes de la rebanadora y de la cocina simulada. Como acaba de demostrarse, tal como se esperaba. Los resultados indicaron que los niveles más altos de contaminación se encontraron en la nevera, el agarre, el agarre de la carne y las placas traseras.Al realizar este procedimiento, es importante recordar encender las cámaras de video al mismo tiempo para asegurar que las imágenes estén sincronizadas. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la seguridad alimentaria, como cómo ocurren las contaminaciones cruzadas, y se pueden desarrollar prácticas efectivas de capacitación basadas en nuestros resultados.

tracking-microbial-contamination-retail-environments-using

Research

Investigación

JoVE Journal

Environment

Entorno

Este protocolo describe un simple adhesivo cinta enfoque basado en el muestreo de tomate y otras superficies de los productos frescos, seguido por la rápida detección de células enteras...

Combinación de adhesivo basado en cinta de muestreo y de fluorescencia In situ La hibridación para la detección rápida de Salmonella En los productos frescos

Recientemente hemos informado de un nuevo enfoque para la generación de sondas fluorogénicos DNAzyme que se pueden aplicar para crear un simple, "mezclar y leer" ensayo de inmunofluorescencia para la detección de bacterias. Estas sondas de ADN especiales catalizar la escisión de un cromóforo modificado con ADN-ARN sustrato quimérico en la presencia de la mezcla bruta extracelular (CEM), producida por una bacteria específica, con lo que la traducción de detección de bacterias en la generación de...

La detección de bacterias mediante ADNzimas fluorogénicos

Este video muestra un ensayo para medir la acumulación de una sonda antibiótica fluorescente en células bacterianas. La exposición a un inhibidor de la bomba de eflujo interrumpe el gradiente de protones transmembrana en las células bacterianas, sobre las que se añade un antibiótico conjugado con fluoróforos. La inhibición de las bombas de eflujo debido a la interrupción del gradiente de protones provoca la acumulación del antibiótico dentro de las bacterias. Las células bacterianas se lisan y...

Ensayo para medir la acumulación de una sonda antibiótica fluorescente en células bacterianas

Aquí se presenta un protocolo que implica la concentración integrada, el enriquecimiento y la detección colorimétrica de puntos finales de patógenos transmitidos por los alimentos en grandes volúmenes de agua agrícola.  El agua se filtra a través de hisopos de Moore modificados (MMS), enriquecidos con medios selectivos o no selectivos, y la detección se realiza mediante dispositivos analíticos basados en papel (μPAD) incrustados con sustratos colorimétricos indicativos de bacterias.

Colorimétrico Papel a base de Detección de<em&gt; Escherichia coli</em&gt;,<em&gt; Salmonella</em&gt; Spp,. Y<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; De grandes volúmenes de agua en la agricultura

Se adaptó un protocolo basado en PCR para detectar Cronobacter spp., Salmonella enterica y Listeria monocytogenes de superficies corporales y canales alimentarios de moscas capturadas en la naturaleza. El objetivo de este protocolo es detectar y aislar patógenos bacterianos de insectos individuales recolectados como parte de un programa de muestreo ambiental durante investigaciones de brotes transmitidos por alimentos.

La detección de patógenos transmitidos por los alimentos bacteriana de moscas individual Filth

El papel de surtido (segregación espacial) en escenarios de evolución puede ser examinada usando sistemas microbianos simples en el laboratorio que permiten el ajuste de la distribución espacial controlada. Mediante la modificación de la densidad celular fundador, varios niveles de surtido pueden ser visualizados utilizando cepas bacterianas marcadas con fluorescencia en las biopelículas de colonias de Bacillus subtilis.

Monitoreo Segregación Espacial en la superficie colonizadores microbianos Poblaciones

El objetivo general del presente Protocolo es sintetizar funcional nanosensores para el portable, eficiente, y rápida detección de específicamente las bacterias patógenas a través de una combinación de relajación magnética y las modalidades de emisión de fluorescencia.

Patógenos de transmisión alimentaria proyección utilizando Magneto-fluorescente Nanosensor: Detección rápida de e. Coli O157: H7

Aquí se presenta un protocolo para una técnica monocelular basada en microscopía de epifluorescencia para cuantificar las tasas de pastoreo en eucariotas depredadores acuáticos con alta precisión y resolución taxonómica.

Bacterias etiquetadas fluorescentes como un rastreador para revelar nuevos caminos de flujo de carbono orgánico en ecosistemas acuáticos

El objetivo de este protocolo es detectar diferentes toxinatipos Clostridium perfringens en alimentos comprados localmente, particularmente toxina silon que produce cepas tipos B y D, sin el uso de cámaras anaeróbicas.

Enriquecimiento y detección de toxinatipos de Clostridium perfringens en muestras de alimentos al por menor

Los antibióticos etiquetados fluorescentemente son herramientas poderosas que se pueden utilizar para estudiar múltiples aspectos de la resistencia a los antimicrobianos. Este artículo describe la preparación de antibióticos etiquetados fluorescentemente y su aplicación para estudiar la resistencia a los antibióticos en bacterias. Las sondas se pueden utilizar para estudiar mecanismos de resistencia bacteriana (por ejemplo, eflujo) por espectrofotometría, citometría de flujo y microscopía.

Visualización de la resistencia bacteriana mediante sondas fluorescentes antibióticas

El protocolo resume las mejores prácticas para minimizar la carga biológica microbiana en un entorno de sala limpia e incluye estrategias como el monitoreo ambiental, el monitoreo de procesos y las pruebas de esterilidad del producto. Es relevante para las instalaciones de fabricación y prueba que deben cumplir con los estándares actuales de buenas prácticas de tejidos y los estándares actuales de buenas prácticas de fabricación.

Control microbiano y estrategias de monitoreo para ambientes de salas limpias y terapias celulares

Aprenda a rastrear la contaminación microbiana en entornos comerciales usando polvo fluorescente. Este método demuestra el mecanismo de contaminación cruzada de Listeria monocytogenes en charcuterías.

El seguimiento de la contaminación microbiana en los entornos comerciales Usando fluorescente Polvo - Un menor Charcutería Ambiente Ejemplo (Video) | JoVE Journal

El seguimiento de la contaminación microbiana en los entornos comerciales Usando fluorescente Polvo - Un menor Charcutería Ambiente Ejemplo

Explorar más videos