Compensatoria Limb Uso y Evaluación del Comportamiento de Aprendizaje de habilidad motora después de Lesiones de la corteza sensoriomotora en un modelo de ratón del ictus isquémico

El objetivo general de este procedimiento es evaluar los efectos conductuales del uso compensatorio de las extremidades y un modelo de ratón de accidente cerebrovascular. Esto se logra determinando primero la extremidad de alcance preferida permitiendo que los ratones alcancen cualquiera de las extremidades durante los procedimientos de conformado. El segundo paso es establecer la habilidad motora entrenando solo la extremidad de alcance preferida en la tarea de alcance de la matriz de pasta.

A continuación, se enseña el uso compensatorio de la extremidad entrenando a los ratones para que utilicen la extremidad menos afectada en la matriz de la pasta. La tarea de alcance comienza cuatro días después de la lesión isquémica unilateral contralateral a la extremidad de alcance preferida. El paso final es evaluar el efecto del entrenamiento de las extremidades menos afectadas en el resultado funcional de la extremidad afectada por el accidente cerebrovascular.

En última instancia, el deterioro del resultado funcional de la extremidad afectada se demuestra por una disminución en el número de alcances exitosos durante varios días de pruebas. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en la investigación básica sobre accidentes cerebrovasculares, incluidas las implicaciones de las intervenciones conductuales en el resultado funcional. Por lo general, las personas nuevas en este método tendrán dificultades debido al tiempo y los pacientes necesarios para enseñar a los ratones esta tarea altamente calificada.

El beneficio es que la sensibilidad de esta prueba supera a la de otras pruebas sensoriomotoras. En ratones. Comience el procedimiento cortando trozos de pasta CAPI cruda con una cuchilla de afeitar.

A continuación, coloque los trozos de pasta en la matriz de pasta. Habitúe a un ratón a la cámara de prueba durante tres sesiones de cinco a 10 minutos cada una, con una matriz de pasta completa colocada al frente y varios trozos de pasta en el fondo para comer para dar forma al alcance. Coloque el ratón en la cámara de prueba con una matriz de pasta completa frente a él, como en el entrenamiento de habitación.

Registre el número de tramos con cada extremidad y denote el número de tramos con la extremidad derecha e izquierda. Separadamente. Defina un alcance como la extensión de una extremidad a través de la abertura de alcance, de modo que la muñeca rompe el plano de la cámara, haciendo que las cuatro patas sean visibles fuera de la cámara. No es necesario que el alcance se dirija hacia la pasta o que entre en contacto con ella durante las sesiones de moldeado.

Limite el mouse a un máximo de 10 alcances o 10 minutos de tiempo en la cámara, lo que ocurra. Primero, para animar al ratón a alcanzar. Sostenga varios trozos de pasta justo dentro de la cámara a través de la abertura de alcance.

Saca los trozos de pasta cuando el ratón muestre interés, como olfateando o mordiendo, animándolos así a alcanzar los trozos de pasta que se retiran. Si los ratones no muestran interés en la pasta seca, coloque las puntas de la pasta en trozos en una taza pequeña de agua tibia para hacerlas más apetecibles. Las sesiones de modelado también se utilizan para determinar la preferencia de las extremidades.

Cuando un ratón exhibe un mínimo del 70% de su alcance diario con una sola extremidad, esas cuatro extremidades se definen como la extremidad preferida. Coloque un mouse en la cámara de prueba con una matriz medio llena al frente. Entrene al ratón para que alcance solo con su extremidad preferida llenando solo el signo de la matriz contralateral a la extremidad preferida.

Durante esta fase de entrenamiento, deje sin rellenar la parte de la matriz correspondiente a la extremidad menos afectada para desalentar los intentos de alcanzar con esta extremidad. Administre una vez al día, 15 minutos o 100 sesiones de entrenamiento de alcance para ayudar al ratón a aprender con éxito a apuntar y romper los trozos de pasta. Durante las primeras sesiones de entrenamiento, ejerza una pequeña cantidad de presión sobre las piezas de pasta mientras están en la matriz sosteniendo otra pieza de pasta ligeramente, detrás y perpendicular al objetivo de alcance previsto.

Esta pequeña cantidad de soporte ayuda a estabilizar la pasta fina y es más fácil de agarrar para el ratón. Los alcances exitosos requieren que el mouse alcance a través de la apertura. Coge un trozo de pasta, rompe el trozo de pasta y retíralo de la matriz.

Registre el número total de tramos hasta un máximo de 100, y el número y la ubicación de las piezas de pasta rotas con éxito. En este procedimiento. Entrenar la extremidad menos afectada a partir de cuatro días después de la lesión isquémica a la corteza motora contralateral a la extremidad de alcance preferida.

Al igual que con el entrenamiento de alcance preoperatorio, administre una vez al día, 15 minutos o 100 sesiones de entrenamiento de alcance. Retire la primera columna de pasta para la primera semana de entrenamiento de extremidades menos afectadas. Para asegurarse de que los intentos de alcance temprano con la extremidad afectada no tengan éxito, coloque el ratón en la cámara de alcance con la matriz medio llena al frente.

Asegúrese de que la mitad llena de la matriz sea opuesta a la mitad llena preoperatoria, lo que obligará al ratón a alcanzar ahora una extremidad menos afectada. Fomente alcanzar la extremidad menos afectada reforzando la extensión de esta extremidad a través de la abertura de alcance para hacerlo. Cuando el ratón extienda la extremidad menos afectada en los primeros días de entrenamiento, coloque un pequeño trozo de pasta en el suelo de la cámara de alcance.

Independientemente de si el alcance es exitoso o no, cuente solo los alcances realizados con la extremidad menos afectada para el total de 100 alcances. No cuente los intentos furtivos con la extremidad afectada para el número total de intentos. A continuación, regrese la columna vertical más medial de pasta a la matriz después de los primeros siete días de entrenamiento de la extremidad menos afectada, registre el número total de alcances y el número y la ubicación de las piezas de pasta rotas con éxito para determinar el impacto del uso compensatorio de la extremidad menos afectada en la recuperación funcional de la extremidad afectada por el accidente cerebrovascular.

Pruebe el rendimiento de la extremidad afectada en el PMRT. Seguir el entrenamiento de las extremidades menos afectadas. Coloque la matriz frente a la cámara orientada de manera idéntica a los procedimientos de entrenamiento preoperatorio.

Esto obligará a los ratones a alcanzar ahora con su registro de extremidades afectadas por el ictus, el número total de alcances y el número y la ubicación de los trozos de pasta rotos con éxito para compararlos con los niveles de rendimiento previos al ictus. Aquí se muestran los patrones representativos de alcanzar con la extremidad afectada de los ratones antes y después de la agresión isquémica unilateral de la corteza sensoriomotora opuesta a la extremidad preferida. Anterior denota piezas de pasta ubicadas cada vez más adelante del ratón, mientras que lateral denota piezas de pasta ubicadas cada vez más a los lados del ratón.

Aquí se muestran los cambios de patrón representativos de la extremidad afectada a lo largo de los días de entrenamiento postoperatorio. Este gráfico muestra un ejemplo representativo de cómo el entrenamiento de la extremidad menos afectada afecta el rendimiento de la extremidad afectada en el PMRT, el entrenamiento de la extremidad menos afectada durante 15 días después de la lesión isquémica unilateral de la corteza motora sensorial perjudica el resultado funcional de la extremidad afectada y perjudica la recuperación exitosa mientras se intenta este procedimiento. Es importante recordar que hay que evitar entrenar en exceso a los ratones durante la fase de modelado dejándolos alcanzar demasiadas veces.

De lo contrario, la curva de aprendizaje no reflejará con precisión la etapa inicial del aprendizaje en esta prueba. Siguiendo este procedimiento. Otros métodos, como la inmunohistoquímica, el mapeo cortical y las imágenes in vivo, pueden utilizarse para investigar otras cuestiones relativas al impacto de las intervenciones conductuales en la neuroanatomía.