June 11th, 2014
El amoníaco es un metabolito fisiológico importante relevante para diversas enfermedades y estados de bienestar. También es una molécula difícil de medir en el aliento, lo que exige que se tomen precauciones particulares para obtener resultados precisos. No se conocen todos los factores que influyen en el amoníaco, pero el progreso puede ser difícil si no se tienen en cuenta estos factores.
El objetivo general del siguiente experimento es medir los niveles sistémicos de amoníaco a través de la respiración exhalada. Esto se logra asegurándose primero de que el sujeto no haya consumido ningún alimento o bebida en la última hora. Para mantener un estado estable de amoníaco entre la cavidad oral y el pulmón profundo, a continuación, el sujeto exhala al flujo deseado, lo que permite comparar las muestras de aliento entre los sujetos.
A continuación, el aliento del segmento de la fase tres de la muestra, que contiene el amoníaco. Para el análisis se elige el valor sistémico que más refleje. Se obtienen resultados que muestran amoníaco en partes por millón con dióxido de carbono y presión también registrada.
La principal ventaja de nuestro sistema de recolección de aliento sobre los métodos actuales, como la recolección de aliento incontrolada, es que nuestro monitor y sistema de recolección produce resultados rápidos, sensibles y reproducibles. Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia la cirrosis y otras enfermedades y estados de bienestar porque el amoníaco es relevante para las proteínas, la nutrición y la encefalopatía hepática. Para comenzar, encienda la fuente de alimentación externa a la plataforma del sensor óptico de amoníaco, la bomba de aire, una unidad electrónica de control personalizada o CEU, el muestreador de aliento, el controlador de diodo láser y una computadora portátil.
Compruebe que tanto el extractor como el ventilador de refrigeración del sensor de amoníaco estén funcionando. A continuación, en el escritorio del muestreador de aliento, configure la temperatura del tubo de entrada y la boquilla a 55 grados centígrados haciendo clic en un icono llamado cambio T. La temperatura se puede cambiar haciendo clic en la flecha hacia arriba o hacia abajo, seguido de hacer clic en actualizar temperatura. También se puede utilizar un teclado conectado al muestreador para escribir la temperatura deseada.
Haga clic en salir para volver al escritorio. Para abrir el software en la computadora portátil que controla el sensor de amoníaco, abra una carpeta llamada NH three Breath Sensor program. En el escritorio.
Abra la carpeta principal del software de vista de laboratorio y seleccione la secuencia principal VI para acceder a la interfaz deseada. A continuación, seleccione Ejecutar en la esquina superior izquierda de la pantalla. Cree una nueva sesión en el sampler abriendo el programa.
Sampler de aliento que se encuentra en el escritorio del sampler. Ajuste la temperatura de entrada y de la boquilla antes de entrar en el programa de muestreo de aliento con guantes. Para evitar contaminar la boquilla con amoníaco, inserte una nueva boquilla desechable en el tubo de entrada.
Para este protocolo, asegúrese de que los sujetos no hayan consumido alimentos durante aproximadamente 12 horas al llegar al laboratorio y que se hayan abstenido de hacer ejercicio la mañana anterior a la prueba. Verifique también que no se haya introducido nada en la boca ni se haya cepillado los dientes en el plazo de una hora desde la recogida de datos, sentando al sujeto frente al sensor de amoníaco. Indique al sujeto que sostenga el tubo de entrada e indíquele que no toque la boquilla.
Para evitar la contaminación por amoníaco, haga clic en iniciar en la interfaz del muestreador. A continuación, haz que el sujeto exhale una sola respiración durante al menos 10 segundos en la boquilla. Cuando se complete la muestra de aliento, haga clic en detener.
Para tomar medidas de la muestra de aliento, seleccione la parte de la fase tres de la muestra arrastrando las líneas verticales en la interfaz del muestreador para comenzar cuando el dióxido de carbono se estabiliza y se detiene justo antes de la caída de presión de la respiración, guarde los datos en la unidad flash seleccionando almacenar en la interfaz de la pantalla táctil del muestreador. Una vez que se hayan almacenado los datos del aliento, seleccione comenzar para iniciar una nueva muestra de aliento para ver los efectos del enjuague bucal y el pH en el aliento. Muestreo de amoníaco tres respiraciones tomadas con al menos cinco minutos de diferencia para establecer el nivel de amoníaco de referencia. A continuación, instruya al sujeto a usar 30 mililitros de agua para enjuagarse bien la boca durante 60 segundos.
Luego, dentro de los 60 segundos, recoja una muestra de aliento y continúe recolectando muestras con al menos cinco minutos de diferencia durante 15 minutos, haga que el sujeto use bicarbonato de sodio en agua para enjuagarse la boca durante 60 segundos y tome otra serie de 15 minutos de muestras de aliento. Luego, después de usar una solución ácida para enjuagar durante 60 segundos, tome una tercera serie de 15 minutos de muestras del sujeto para determinar los efectos de las temperaturas de entrada y transporte de los tubos en el amoníaco del aliento. Ajuste la temperatura de entrada a 40 grados centígrados antes de tomar tres muestras de aliento en el transcurso de 15 minutos.
A continuación, aumente la temperatura de la tubería de entrada y transporte a 55 grados centígrados. Después de permitir que el sistema alcance el estado estacionario durante al menos cinco minutos, muestree tres respiraciones en la entrada calentada espaciadas por cinco minutos. Aquí se muestra una muestra típica de aliento que integra la parte de la fase tres de los datos de respiración.
Las líneas verticales verde y roja establecen el giro en el que se va a analizar la línea. Por el contrario, este panel demuestra el efecto que tiene un enjuague ácido sobre el amoníaco en el aliento. La conversión de NH 3 a NH 4 reduce drásticamente la cantidad de amoníaco detectable.
Luego, los niveles vuelven a la línea de base a medida que los efectos del enjuague desaparecen. Para obtener mediciones precisas, el sujeto debe proporcionar suficiente flujo de aire alveolar en el muestreador. Este panel demuestra cómo la disminución del flujo, que no permite muestrear tanto aire alveolar, da como resultado la reducción del amoníaco alveolar en la muestra cuando ambas fases uno y dos se integran en la muestra.
Al igual que en este panel, el análisis reduce significativamente la cantidad de amoníaco y es un reflejo inexacto del amoníaco sistémico. Esta técnica se puede realizar en aproximadamente un minuto para obtener resultados inmediatos, lo que permite el análisis de datos en tiempo real. Si se hace correctamente, es importante registrar siempre el CO2 y la presión para garantizar una calidad uniforme de los datos.
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Este estudio se centra en medir los niveles sistémicos de amoníaco a través del aliento exhalado, una tarea desafiante debido a la necesidad de condiciones precisas. El experimento destaca la importancia de controlar factores como el consumo de alimentos y bebidas antes de la medición.