Name: Procedimientos de biopsia de músculo esquelético humano utilizando la técnica de Bergström Modificado (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 20 s
Description: Aprende la técnica de biopsia muscular modificada de Bergström en humanos para obtener muestras del vasto lateral. Este método permite analizar alteraciones bioquímicas y expresión de proteínas en estudios de fisiología del ejercicio.

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El procedimiento de músculo esquelético como se describe sigue las directrices de la Junta de Revisión Institucional de la Universidad Estatal de los Apalaches. NOTA: El equipo se compone de un operador (Ph.D. o MD entrenado en la técnica de la biopsia), y al menos uno, pero idealmente, tres o más técnicos. El operador es responsable de conducir y supervisar todos los aspectos del procedimiento de biopsia del músculo esquelético. Un técnico (técnico # 1) es inmediatamente responsable de asistir al operador con todos los aspectos de la extracción del músculo. Esto incluye ser las &quot;manos no estériles&quot; y la aplicación de succión con una jeringa estéril. Un segundo técnico (técnico # 2) se involucra en la conversación con el sujeto y masajes en las piernas enfrente del sujeto durante el procedimiento para minimizar la ansiedad del sujeto. El tercer técnico (técnico 3 #) es responsable de la manipulación y el procesamiento de la muestra de músculo esquelético. Medidas analíticas Downstream dictan cuántas additSe requieren técnicos ional para el procesamiento / preparación de la muestra de músculo esquelético. 1. Asunto Preparación <ol><li> Recopilar, preparar y organizar los materiales especificados para el procedimiento de la biopsia muscular (Tabla 1). Descontaminar y esterilizar la aguja Bergström (cánula exterior y de trocar interior) y el émbolo según la práctica estándar 16. </li><li> Revise la forma de consentimiento con el tema. La porción de la biopsia del músculo esquelético del Consentimiento para Participar forma utilizada en la Universidad Estatal de los Apalaches se ofrece en el suplemento en línea 1. <ol><li> Hable con el tema sobre los aspectos generales del procedimiento de biopsia muscular con un enfoque en los posibles riesgos del procedimiento, preparación de la piel, la aplicación de la anestesia, las sensaciones típicas. Indique al sujeto que lean atentamente el consentimiento para participar formulario y firmarlo para confirmar que el diseño y los procedimientos de estudio se entienden. </li></ol></li><li> Confirme que los sujeto no es alérgica a &quot;___ caína&quot; medicamentos de tipo (por ejemplo, lidocaína). </li><li> Indique al sujeto que mentir supina sobre una mesa acolchada con el muslo expuesto. Coloque dos empapadores absorbentes desechables con forro de plástico debajo de la pierna del sujeto. Coloque la pierna de una manera relajada, con una pequeña toalla enrollada debajo del talón, de tal manera que la rodilla está completamente extendida (elevado ~ 1 cm), colocando así el vasto lateral en una posición acortada. </li><li> Haga que el operador instrucciones a la sujeta a contrato momentáneamente el músculo del muslo expuesto de modo que la zona de la biopsia puede ser visualizado. Nota: El vasto lateral sitio de la biopsia se justo anterior a la fascia lata (banda illiotibial), aproximadamente un tercio de la distancia entre la parte superior de la rótula y el trocánter mayor 7. </li><li> Tener la marca del operador justo debajo (~ 0,5 cm) del sitio de la incisión con un marcador permanente de punta fina. </li><li> Haga que el operador determinar el espesor del pliegue cutáneo aproximado por pincHing el pliegue cutáneo. </li><li> Tener el operador y técnicos se laven las manos con agua tibia y jabón y ponerse guantes desechables. </li><li> Tienes el operador retire el cabello de una región ~ 15 cm x 15 cm alrededor del sitio de la biopsia (por medio de máquinas de cortar). Nota: recorte el pelo de la zona de la biopsia evita que el pelo se metan en la incisión durante el procedimiento y durante el cierre, y la depilación permite un mejor contacto entre los cierres de cinta y la piel (ver 3.4). </li><li> Haga que el operador de esterilizar la zona con hisopos pre-empapado con un antiséptico tópico, (como povidona yodada o gluconato de clorhexidina para sujetos alérgicos al yodo / mariscos). Comience en el centro y trabajar en círculos concéntricos hacia el borde exterior de la zona rasurada. Como mínimo, repetir dos veces más con un hisopo nuevo pre-empapado cada vez. </li></ol> 2. procedimiento de biopsia <ol><li> Haga que el operador retire guantes desechables, lavarse las manos con agua tibia y jabón, y Don gl quirúrgico estérilOves utilizando una técnica aséptica. </li><li> Tener técnico # 1 presente el paño fenestrado estéril para el operador. Tener el operador, utilizando una técnica aséptica, colocar el paño sobre la zona de la biopsia para mantener un campo estéril. </li><li> Tener técnico # 1 presente al operador una jeringa de 5 ml, equipado con una aguja de 21 mientras se mantiene una técnica aséptica. Limpie la parte superior del vial lidocaína con un algodón empapado en alcohol. <ol><li> Haga que el operador retire inmediatamente 5 ml de lidocaína. Retire la aguja 21G de la jeringa y desechar la aguja en un contenedor de objetos punzantes. </li><li> Tener técnico # 1 presente el operador con una aguja de 1 ½ pulgadas de 25, mientras que el mantenimiento de una técnica aséptica. Haga que el operador de la pulgada aguja de 1 ½ a la jeringa y evacuar a las burbujas de aire de la jeringa. </li></ol></li><li> Tener técnico # 1 spray de cloruro de etilo en el sitio de la incisión (~ 0.5 cm por encima de la marca de tinta indeleble en la piel) hasta que la piel parece &quot;blanquear&quot;. <ol><li> Hahan el operador inserte la aguja aproximadamente horizontal a la piel en la dermis, aspirar la aguja, y luego infiltrarse con ~ 100 l de lidocaína para producir una &quot;ampolla&quot; 2-4 mm de diámetro. <ol><li> Tener el aspirado operador de la aguja (retirar ligeramente el émbolo de la jeringa) para confirmar que la aguja no se ha colocado en un vaso sanguíneo. Si aparece sangre en la jeringa, retire la aguja, deseche en un contenedor de objetos punzantes, y comenzar de nuevo en el 2,3. </li><li> Tener el avance operador de la aguja en el tejido subcutáneo, aspirar la aguja, y luego infiltrarse en el tejido con ~ 1 ml de lidocaína para formar una ampolla. Una vez que la ampolla se ha desplomado, insertar la aguja de 1 ½ pulgadas de la jeringa lidocaína-cargado verticalmente en el sitio de la incisión, parando superficial a la fascia. Nota: El sujeto puede sentir una ligera sensación de picadura momentánea de la inyección inicial de la lidocaína (similar a una picadura de abeja). </li></ol></li><li> Asegúrese de que la operaco no se infiltra el músculo con lidocoine porque es miotóxico 17-19. </li><li> Tener el aspirado operador de la aguja y luego inyectar lentamente los restantes 4 ml de lidocaína mientras se retira la aguja del muslo. Coloque una gasa estéril sobre el lugar de inyección y permitir que el sujeto se relaje mientras que el anestésico local entre en vigor. </li></ol></li><li> Después de 2-3 minutos, tener técnico # 1 presente el operador de un bisturí mientras se mantiene una técnica aséptica. <ol><li> Tener el operador ligeramente sondear el sitio de la biopsia con la punta del escalpelo para confirmar que el área se anestesia. Si es necesario, inyectar otros 3-4 ml de lidocaína en el sitio de la incisión, véase 2.4.1.2. </li></ol></li><li> Haga que el operador haga una recta de 1 cm de la incisión a través de la piel y los tejidos subcutáneos (~ 2-3 mm por encima de la marca de tinta) paralela al fémur. <ol><li> Haga que el operador inserte el bisturí más profundo para hacer una incisión a través de la fascia en el músculo. Haga esto una vez en cada dirección<html> . Nota: El sujeto puede sentir una punzada o presión con el corte más profundo si la hoja corta bisturí en el músculo. </li><li> Tener técnico # 2 involucrar el tema en la conversación y masajear la pierna opuesta. </li></ol></li><li> Haga que el operador de una generosa cantidad de gasa estéril sobre el lugar de la incisión y la biopsia y aplicar presión directa sobre la incisión para reducir el sangrado. <ol><li> Tener técnico # 1 conecte la llave de paso del metal de 3 vías a la jeringa desechable de 60 ml y el tubo de extensión de 30 cm (Figura 1). </li><li> Tienes técnico # 1 conecte un extremo del conector cónico tubo de plástico en el extremo libre del tubo de extensión y inserte firmemente el otro extremo del conector cónico tubo de plástico en la gran final de una punta de pipeta de 200 l con ~ 15-18 mm de la punta cortada. </li></ol></li></ol>.jpg &quot;width =&quot; 500 &quot;/&gt; Figura 1. La aguja Bergström. (A) La aguja Bergström (5 mm) se compone de (a) la cánula externa y (b) interno de trocar, los componentes asociados incluyen (c) del émbolo, (d) la punta de pipeta 200 l con ~ 15-18 mm cortó , (e) ahusada conector de plástico, (f) de 3 vías llave de paso de metal, (g) tubo de extensión 30 cm, y (h) de la jeringa desechable de 60 ml. (B) La aguja Bergström (5 mm) y los componentes asociados montado. ( C) El trocar interior de la aguja Bergström (5 mm) retirado aproximadamente 1 cm se abre la ventana de la cánula exterior. <ol start="9"><li> Después de que el sangrado haya disminuido, tienen técnico # 1 Abra la bolsa de autoclave esteriliza y se presenta el 5 mm aguja de biopsia y trocar interior (Figura 1) para el operador mientras se mantiene una técnica aséptica. <ol><li> Haga que el operador de montar la aguja (cánula exterior y trocar interior), comprobar la alineación y la acción de deslizamiento. </li> &lt;/ Ol&gt; </li><li> Tener el operador sujetar firmemente el conjunto de aguja (cánula exterior y de trocar interior) con las dos manos para evitar que el trocar interior gire. Ha técnico # 1 inserte firmemente la punta de corte de la pipeta en la parte superior de la porción trocar interior de la aguja de la biopsia con un ligero movimiento a la baja torsión. Asegúrese de que técnico # 1 no toca el operador o la aguja de biopsia, sólo la punta de la pipeta. </li><li> Haga que el operador introduce la aguja de biopsia en el tejido a través de la incisión. Localizar la incisión en la fascia (un &quot;sensación&quot; adquirida) con la punta de la aguja de biopsia. Avance la aguja un poco más allá del ángulo de la fascia y luego la aguja hacia abajo, hacia el suelo cuando la aguja se introduce en el músculo. Nota: Los sujetos pueden experimentar una leve molestia (por ejemplo, &quot;la presión profunda&quot;, o sensación de calambre leve) como la incisión a través de la fascia se encuentra con la punta de la aguja de biopsia y la aguja se introduce en el músculo. <ol> &lt;li&gt; Tienes técnico # 2 instruir el tema para estar &quot;relajado&quot; y no se contraiga sus músculos del muslo, mientras que el operador está avanzando la aguja en el músculo. </li></ol></li><li> Una vez que la aguja de biopsia está en posición, tener la señal de operador técnico # 1 para abrir la jeringa desechable de 60 ml. <ol><li> Tienes técnico # 1, tire rápidamente la jeringuilla disponible 60 ml abierto a la marca de 40-50 cc para crear succión dentro de la aguja de la biopsia. </li><li> Tienes el operador tire del trocar interno hacia fuera aproximadamente 1 cm para abrir la ventana de la cánula exterior mientras se mantiene la posición de la externo de trocar dentro del músculo. Haga que el operador de cerrar rápidamente el trocar interior para cortar (clip) y recoger la muestra de músculo. Tener la señal del operador técnico # 1 para liberar la succión. </li><li> Tienes técnico # 1 abre la llave de paso a la sala para liberar la succión. </li><li> Tener el operador girar la aguja de biopsia 90 ° y repita el proceso. Si es necesario, haga que el operador REPEAt el procedimiento de rotación de hasta 3 veces (para un total de 4 clips). </li></ol></li><li> Haga que el operador aplica contra-presión directa en el sitio de la incisión con una gasa estéril mientras se quita la aguja de biopsia en el muslo, con cuidado de no coger fascia o de la piel. Si siente resistencia significativa, vuelva a cortar mientras se aplica un movimiento de torsión al trocar interior. </li><li> Tras la retirada de la aguja de biopsia del muslo, tiene el operador tire de la parte posterior interno de trocar 1 cm para inspeccionar visualmente el lumen de la cánula exterior para estimar si se recogió una cantidad adecuada de tejido. <ol><li> Tener la mano del operador de la aguja de la biopsia al técnico # 1. Para mantener una técnica aséptica asegurar que técnico # 1 sólo toca la aguja, no el operador. Tener técnico # 1 mano la aguja de biopsia al técnico # 3. </li></ol></li><li> Tener técnico # 3 Retire el tejido de la aguja de la biopsia. <ol><li> Tener técnico # 3 uso del émbolo (Figura 1) y un par de pinzas de punta finapara asegurar que todo el tejido muscular se elimina de la interno de trocar y la cánula externa. </li><li> Tener técnico # 3 pesan rápidamente la muestra a confirmar que se recogió una cantidad adecuada de tejido muscular y colocar las muestras en un bloque de disección en frío de hielo. </li></ol></li><li> Tienes técnico # 3 diseccionar cuidadosamente tejido conectivo visible y la grasa de las muestras de músculo. Ha técnico # 3 preparar las muestras de músculo para el almacenamiento de acuerdo con los análisis posteriores. Por ejemplo, colocar inmediatamente las muestras en un criovial y congelamiento rápido en nitrógeno líquido, montar y congelar por histología, o lugar en una criovial con inhibidor de RNasa, etc </li><li> Si es necesario, repita el procedimiento con una segunda aguja de biopsia esterilizada mientras se mantiene una técnica aséptica. </li></ol> 3. Clausura <ol><li> Haga que el operador aplique presión directa en lugar de la biopsia con una gasa estéril y una bolsa de hielo durante 10-15 minutos. </li><li> Una vez lograda la hemostasia, tener la pr consumo de alcohol operadoralmohadillas ep para eliminar la sangre seca de la zona alrededor de la incisión. </li><li> Tener técnico # 1 presente un tubo de adhesivo quirúrgico tópico y el aplicador para el operador. Tienes el operador montar el tubo de adhesivo quirúrgico y aplicador sin tocar la punta del aplicador o la parte superior del tubo. </li><li> Tienes el operador tire de la incisión se cerró con una mano mientras se aplica una sola capa de adhesivo quirúrgico en la parte superior de la incisión seca con la otra mano. Después el adhesivo se cura (~ 90 seg), aplicar closuresperpendicular cinta a la incisión. Alternativamente, cerrará la incisión con dos 4-0 suturas estériles. </li><li> Haga que el operador aplica presión directa mediante la colocación de 3 a 4 febrero &quot;x 2&quot; gasas no estériles en el sitio de la incisión y seguro con una envoltura adhesiva autoadhesiva. </li><li> Haga que el operador proporcione el tema verbal y las instrucciones escritas sobre el cuidado de las heridas, reacciones normales y anormales, y las pautas de actividad para los siguientes 1 a 4 días (ver línea Dopplement 2). </li></ol>

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</ol>

Los autores no tienen conflictos de intereses.

Este video ofrece un resumen paso a paso del procedimiento de biopsia de músculo esquelético utilizado en el Laboratorio de Rendimiento Humano de la ASU. Este procedimiento, con pequeñas modificaciones, se ha utilizado para recoger aproximadamente 1.600 biopsias musculares durante los últimos 13 años. Las muestras de biopsia muscular han proporcionado datos importantes en las investigaciones basadas en nutrición deportiva, dando lugar a importantes descubrimientos de la investigación. Hay mu...

La técnica de biopsia percutánea o &quot;semi-abierto&quot; se utiliza para obtener muestras de tejido músculo esquelético de pacientes humanos y sujetos de investigación. Duchenne (1806-1875) es reconocido como el primero en construir una aguja con un trocar para obtener el músculo esquelético de sujetos que viven a través de la biopsia percutánea 1. En la década de 1960, Bergström introdujo una aguja de biopsia percutánea similar a la descrita por Duchenne 2-4. Veinte años más tarde, Evans et al. 5 modificado la técnica mediante la aplicación de succión a través del trocar de corte de la aguja Bergström. Esta modificación puede mejorar el rendimiento de tejido de 3 a 5 veces 6,7 y se emplea en entornos de investigación clínica y biomédica. Esta técnica tiene y seguirá fomentando el diagnóstico de las miopatías y nuestra comprensión de la estructura y función de los músculos esqueléticos. La técnica de biopsia muscular percutánea es straightforward. Cuando se hace correctamente, con estricto apego a la técnica aséptica, los riesgos asociados son mínimos. El procedimiento de biopsia muscular se considera como una herramienta de investigación para proyectos de investigación. Algunas instituciones académicas permiten profesores investigadores entrenados con un doctorado, con la supervisión directa del médico, para obtener biopsias de músculo y otros requieren de un médico certificado por el consejo para realizar la técnica. El equipo de biopsia ASU ha realizado con éxito más de 1.600 biopsias musculares durante los últimos 13 años 8-15. El propósito de este video es para describir la aguja Bergström modificado muscular percutánea técnica de biopsia 5 para obtener muestras de tejido de músculo esquelético de las vasto lateral de sujetos humanos.

<table><tbody><tr><td>Bergstr&ouml; m aguja de biopsia, 5 x 100 mm</td><td>Stille Surgical Inc.</td><td>119-29187-50</td><td>1 ea</td></tr><tr><td>Almohadilla azul Durasorb Fisher</td><td></td><td>22-031-340</td><td>caja de 300</td></tr><tr><td>Maquinilla de afeitar prep desechable</td><td>Moore Medical</td><td>89760</td><td>1 ea</td>Crema de afeitar</tr><tr><td></td><td>Moore Medical</td><td>92869</td><td>1 lata</td></tr><tr><td>Hisopo con alcohol</td><td>Moore Medical</td><td>98721</td><td>caja/200</td></tr><tr><td>Swaabsticks de povidona yodada (paquete de 3)</td><td>Moore Medical</td><td>90691</td><td>pack de 50</td></tr><tr><td>Mascarillas</td><td>Fisher</td><td>19-039-690</td><td>caja de 50</td></tr><tr><td>Guantes estériles; sz 6.5</td><td>Moore Medical</td><td>68128</td><td>caja de 50 pares</td></tr><tr><td>Guantes estériles; sz 7.0</td><td>Moore Medical</td><td>68129</td><td>caja de 50 pares Guantes</td></tr><tr><td>estériles; sz 8.5</td><td>Moore Medical</td><td>68132</td><td>caja de 50 pares Cortina toalla</td></tr><tr><td>fenestrada</td><td>Moore Medical</td><td>92712</td><td>caja de 50</td></tr><tr><td>Lidocaína (1% HCl, sin Epi)</td><td>Dealmed</td><td>427902</td><td>vial de 30 cc</td></tr><tr><td>Spray de cloruro de etilo</td><td>Dealmed</td><td>386020</td><td>Frasco de 3.5 fl. Oz.</td></tr><tr><td>Jeringa de 5 ml con aguja de 21 G</td><td>Fisher</td><td>14-827-48</td><td>caja de 100</td></tr><tr><td>25 G Aguja de 5/8</td>" <td>Fisher</td><td>14-826AA</td><td>caja de 100</td></tr><tr><td>25 G 1 1/2" aguja</td><td>Fisher</td><td>14-826-49</td><td>caja de 100</td></tr><tr><td>bisturíes de un solo uso con hoja #11</td><td>Fisher</td><td>0-8927-5B</td><td>caja de 20</td></tr><tr><td>jeringas de 60 ml</td><td>Fisher</td><td>13-689-8</td><td>caja de tubo de extensión de 40</td></tr><tr><td>~30 pulgadas</td><td>Fisher</td><td>14-169-7A</td><td>rollo de llave de paso metálica de 50 pies</td></tr><tr><td></td><td>Fisher</td><td>01-290-38</td><td>cada uno</td></tr><tr><td>Conector de tubo de polipropileno con extremos cónicos, de 3,2 a 5,5 mm</td><td>Fisher</td><td>15-315-28A</td><td>caja de 100</td></tr><tr><td>puntas de pipeta amarillas (1-200 y micro; l)</td><td>Fisher</td><td>02-681-2</td><td>cortado ~15-18 mm de la punta</td></tr><tr><td>Adhesivo quirúrgico tópico</td><td>Medline</td><td></td><td>MSC091076 caja de 36 tubos</td></tr><tr><td>Adhesivo quirúrgico tópico</td><td>Medline</td><td>MSC091076Z</td><td>caja de 6 tubos</td></tr><tr><td>Puntadas de mariposa (tiras adhesivas) 1/2" x 4" (6 por paquete)</td><td>Moore Medical</td><td>93050</td><td>caja/300</td></tr><tr><td>Bandadge, tira, 3/4 x 3 pulg.</td><td>Fisher</td><td>19-027-202</td><td>paquete de 100</td></tr><tr><td>Vendas adhesivas (rollos de 5 m)</td><td>Fisher</td><td>19-027-768</td><td>caja de 36</td></tr><tr><td>cintas quirúrgicas de papel de 1"</td><td>Fisher</td><td>19-027-761</td><td>caja de 12</td></tr><tr><td>suturas (4-0 corte inverso, FS2)</td><td>Moore Medical</td><td>82926</td><td>caja de 36</td></tr><tr><td>almohadillas de gasa estériles 4 x 4</td><td>Moore Medical</td><td>66949</td><td>pkg/50</td></tr><tr><td>2 x 2 Gasas no estériles</td><td>Moore Medical</td><td>37336</td><td>pkg/200</td></tr><tr><td>3 x 4 Almohadillas no adherentes</td><td>Moore Medical</td><td>74389</td><td>bx/100</td></tr><tr><td>Bolsas de autoclave 3.5 x 9</td><td>Moore Medical</td><td>40390</td><td>caja de 200</td></tr><tr><td>bolsas de autoclave 5.25 x 10</td><td>Moore Medical</td><td>40391</td><td>caja de 200</td></tr><tr><td>Cinta indicadora de autoclave</td><td>Moore Medical</td><td>31608</td><td>caja de 250</td></tr><tr><td>Lab abrigos&mdash; pequeño</td><td>Fisher</td><td>23-900-520A&nbsp;</td><td>10/paquete</td></tr><tr><td>Batas de laboratorio&mdash; mediano</td><td>Fisher</td><td>23-900-520B&nbsp;</td><td>10/paquete</td></tr><tr><td>Batas de laboratorio&mdash; Fisher grande</td><td></td><td>23-900-520C&nbsp;</td><td>10/paquete</td></tr><tr><td>Toallitas de paño desechables germicidas</td><td>Moore Medical</td><td>62879</td><td>lata/160</td></tr></tbody></table>

procedimientos de biopsia de músculo esquelético humano utilizando la técnica de bergström modificado

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

La técnica de biopsia percutánea permite a los investigadores y los clínicos para recolectar muestras de tejido músculo esquelético. La técnica es segura y altamente eficaz. Este video describe la técnica de biopsia percutánea usando una aguja de Bergström modificado para obtener muestras de tejido de músculo esquelético de los vasto lateral de sujetos humanos. La aguja Bergström consiste en una cánula externa con una pequeña abertura (&quot;ventana&quot;) en el lado de la punta y un trocar interior con una cuchilla de corte en el extremo distal. Bajo anestesia y asépticas condiciones locales, la aguja se hace avanzar en el músculo esquelético a través de una incisión en la piel, tejido subcutáneo, y fascia. A continuación, se aplica succión a la interno de trocar, el trocar exterior se tira hacia atrás, el tejido muscular esquelético se introduce en la ventana de la cánula exterior por la succión, y el trocar interior se cierra rápidamente, reduciendo así el recorte o la muestra de tejido del músculo esquelético . La aguja se gira 90 °60, y otro corte, se hace. Este proceso puede repetirse tres veces más. Esta técnica de corte múltiple típicamente produce una muestra de 100 a 200 mg o más en sujetos sanos y se puede hacer inmediatamente antes, durante, y después de una sesión de ejercicio u otra intervención. Después de vestirse post-biopsia de la zona de la incisión, los sujetos reanudan sus actividades de la vida diaria de inmediato y puedan participar plenamente en la actividad física vigorosa en 48-72 horas. Los sujetos deben evitar el ejercicio intenso durante 48 horas para reducir el riesgo de herniación del músculo a través de la incisión en la fascia.

El procedimiento de biopsia muscular como se describió anteriormente permite al investigador para recoger rápidamente y consistentemente muestras de tejido de músculo esquelético. El rendimiento típico en sujetos sanos, atléticos es de 200 mg o más en una sola pasada con 3-4 clips. El procedimiento tarda 15-20 minutos, la mayor parte de los cuales se gasta en preparación para la incisión. En los estudios basados ​​en el ejercicio, muestras de músculo a menudo se toman antes y después del ejercicio, con una o dos muestra...

El propósito de este video es presentar la técnica modificada de biopsia del músculo esquelético de Bergström en sujetos humanos.

Procedimientos de biopsia de músculo esquelético humano utilizando la técnica de Bergström Modificado

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

El objetivo general de este procedimiento es utilizar la técnica de Bergstrom modificada para hacer una muestra de biopsia de músculo esquelético a partir del vasto lateral de un voluntario humano. Esto se logra anestesiando primero la piel y el tejido subcutáneo en el sitio de la biopsia. En el segundo paso, se hace una incisión a través de la piel, el tejido subcutáneo y la fascia que recubre el músculo esquelético.A continuación, se avanza la aguja de biopsia a través de las incisiones hasta el músculo esquelético y se recoge la muestra de biopsia en el paso final. La aguja de biopsia se retira cuidadosamente y la incisión se cierra con adhesivo quirúrgico. En última instancia, las muestras de biopsia de músculo esquelético se pueden preparar para análisis histológicos y analizar para detectar alteraciones bioquímicas y la expresión de proteínas y genes específicos en diversas condiciones de ejercicio.Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la fisiología del músculo esquelético, como cuáles son las respuestas bioquímicas, moleculares y celulares al ejercicio extenuante. El Dr. Gerald Ferris, médico de nuestro hospital local, y Maschi Tanaka, técnico de nuestro laboratorio, harán una demostración del procedimiento. Después de obtener el consentimiento informado, instruya al sujeto para que se acueste en decúbito supino sobre una mesa acolchada con el muslo expuesto, coloque la pierna de manera relajada con un pequeño rollo de toalla debajo del talón, de modo que la rodilla esté completamente extendida y elevada aproximadamente un centímetro.A continuación, indique al sujeto que contraiga momentáneamente el músculo expuesto del muslo para que el vasto sitio de la biopsia lateral pueda visualizarse justo antes de la fascia. Lata aproximadamente un tercio de la distancia entre la parte superior de la rótula y el trocanter mayor. Luego, use una maquinilla para extraer el vello de una región de aproximadamente 15 por 15 centímetros alrededor del sitio de la biopsia y esterilice el área con hisopos previamente empapados en un antiséptico tópico para recolectar la biopsia utilizando el EPP adecuado y una técnica séptica.Primero rocíe cloruro de etilo en el sitio de la incisión hasta que la piel parezca blanquearse. A continuación, inserte una aguja de calibre 25 horizontalmente en la dermis, aspire la aguja y dispense aproximadamente 100 microlitros de lidocaína para producir una ampolla de dos a cuatro milímetros de diámetro debajo de la superficie de la piel. A continuación, avance la aguja en el tejido subcutáneo, aspire de nuevo y dispense aproximadamente un mililitro de lidocaína para formar otra ampolla.Una vez que la segunda ampolla haya disminuido, inserte la aguja en el sitio de la incisión, deteniéndose superficialmente a la fascia, aspire la aguja por última vez y luego inyecte lentamente los cuatro mililitros restantes de lidocaína mientras retira la aguja del muslo. Después de dos o tres minutos, sondee ligeramente el sitio de la biopsia con la punta de un bisturí estéril para confirmar la anestesia. Cuando el sitio esté listo, haga una incisión recta de un centímetro a través de la piel y los tejidos subcutáneos en un ángulo de 45 grados con respecto al fémur.Luego, una vez en cada dirección, inserte el bisturí lo suficientemente profundo como para hacer una incisión a través de la fascia en el músculo. En general, las personas nuevas en este método deben ser pacientes a medida que aprenden a sentir el cambio en la resistencia entre el tejido subcutáneo y la fascia cuando administran el anestésico local y cuando cortan a través de la piel, el tejido subcutáneo y la fascia. Ahora introduzca la aguja de biopsia en el tejido en el mismo ángulo en el que se hizo la incisión hasta que la punta entre en la fascia.Avance la aguja justo más allá de la fascia en un ángulo hacia abajo a medida que avanza hacia el músculo. Indique al sujeto que permanezca relajado y que no contraiga el músculo del muslo mientras se avanza la aguja. Luego, una vez que la aguja de biopsia esté en posición, abra una jeringa desechable de 60 mililitros hasta la marca de 40 a 50 mililitros para crear succión dentro de la aguja de biopsia.Tire del trócar interno hacia afuera aproximadamente un centímetro para abrir la ventana de la cánula externa mientras mantiene la posición de la cánula externa dentro del músculo. A continuación, cierre rápidamente el trócar interior para cortar y recoger la muestra de músculo. A continuación, abra el grifo de tope para liberar la succión y gire la aguja de biopsia 90 grados, repitiendo el proceso hasta tres veces para un total de cuatro clips.A continuación, retire la aguja de biopsia del muslo tras retirar la aguja. Tire del trócar interno hacia atrás un centímetro e inspeccione visualmente la luz de la cánula externa para estimar si se recolectó una cantidad adecuada de tejido. Aplique presión directa sobre el sitio de la biopsia con una gasa estéril y una bolsa de hielo durante 10 a 15 minutos.Durante este tiempo, retire el tejido de la aguja de biopsia Después de la aplicación de hielo, cierre la incisión con una mano mientras aplica una sola capa de adhesivo quirúrgico sobre la parte superior de la incisión seca con la otra. Después de que el adhesivo se cure durante aproximadamente 90 segundos, aplique cierres de cinta perpendiculares a la incisión, luego coloque tres o cuatro almohadillas de gasa no estériles de dos por dos pulgadas sobre el sitio de la incisión y asegúrelas con una envoltura adhesiva autoadhesiva para aplicar presión directa al tejido. Finalmente, dé al sujeto instrucciones verbales y escritas sobre el cuidado adecuado de la herida, las reacciones normales y anormales y las pautas de actividad para los siguientes, de uno a cuatro días.En un estudio cruzado aleatorizado controlado con placebo, los atletas de resistencia masculinos corrieron en cintas de correr durante tres horas al 70% de O2 VO máx., y consumieron una bebida de 6% de carbohidratos o placebo a una tasa de un litro por hora. Se tomaron biopsias de tejido muscular esquelético antes y después del ejercicio, y se observó que la expresión génica de varias citocinas aumentaba en el tejido muscular esquelético obtenido de atletas de resistencia experimentados después de tres horas de carrera, curiosamente, a pesar de no tener ningún efecto sobre el músculo esquelético, se observó que la ingesta de carbohidratos atenuaba los niveles de ARNm de IL seis y IL ocho después de su desarrollo. Esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la fisiología muscular exploraran principios como la utilización del sustrato de combustible durante diferentes intensidades de ejercicio, el daño muscular inducido por el ejercicio y la señalización intercelular, entre otros.

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Research

Investigación

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