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DOI: 10.3791/51863-v
Ji-Yoen Kim*1, Stacy D. Grunke*1, Yona Levites2, Todd E. Golde2, Joanna L. Jankowsky1,3
1Department of Neuroscience,Baylor College of Medicine, 2Department of Neuroscience, Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease,University of Florida, 3Department of Neurology and Department of Neurosurgery,Baylor College of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article demonstrates a technique for widespread neuronal transduction through intraventricular injection of adeno-associated virus into the neonatal mouse brain. This method allows for rapid and easy attainment of lifelong expression of virally-delivered transgenes.
Aquí demostramos una técnica para la transducción neuronal generalizada mediante inyección intraventricular de virus adenoasociados en el cerebro de ratón neonatal. Este método proporciona una manera rápida y fácil de lograr la expresión de por vida de los transgenes administrados viralmente.
El objetivo general de este procedimiento es transducir neuronas viralmente en todo el cerebro. Esto se logra mediante la crioanestesia de las crías recién nacidas, seguida de la transferencia del neonato a la etapa enfriada para la inyección. A continuación, identifique el lugar de inyección para dirigirse a los ventrículos laterales entre la sutura Lambda y cada ojo o lateral de la sutura sagital a medio camino entre Lambda y Bgma.
El paso final es insertar la aguja a la profundidad correcta e infundir lentamente hasta dos microlitros de solución viral en el ventrículo lateral de cada hemisferio. En última instancia, se utiliza una marca fluorescente o inmunofluorescencia para el gen de interés para mostrar el patrón de expresión del transgén resultante de la inyección intraventricular. Por lo general, las personas nuevas en esta técnica tendrán dificultades para apuntar con precisión a los ventrículos laterales.
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