Humano madre pluripotentes células Basado Toxicidad para el desarrollo de ensayos de la seguridad química Detección y biología de sistemas de generación de datos

El objetivo general de este procedimiento es describir dos sistemas de ensayos de toxicidad para el desarrollo in vitro basados en células madre embrionarias humanas y estudios de transcriptoma. Esto se logra cultivando primero células madre embrionarias humanas en fibroblastos embrionarios de ratón. El segundo paso es dejar que las células madre embrionarias humanas formen cuerpos Embry en los que puedan generar células de las tres capas germinales o diferenciarlas en progenitores neuroectodérmicos.

A continuación, los cuerpos embrionarios o progenitores neuroectodérmicos se tratan con compuestos de interés a diferentes concentraciones durante la diferenciación. Los pasos finales son evaluar la viabilidad de las células y aislar el ARN. En última instancia, el análisis de microarrays de transcriptoma se utiliza para mostrar los cambios en la expresión de ARN de las células tratadas con un compuesto de interés en comparación con las células de control no tratadas. Sobre la base de células madre neonicoides humanas y macroáreas de ADN, hemos establecido una metodología in vitro que permite el seguimiento de los efectos de toxicidad relevantes para el desarrollo humano.