Riñón murino Trasplante Técnica

El objetivo general de este procedimiento es demostrar una técnica de anastomosis arterial modificada para trasplantes de riñón en ratón. Esto se logra primero diseccionando cuidadosamente los vasos relevantes en el donante. El segundo paso es crear un manguito de talón y dedo del pie de la aorta abdominal donante adyacente a la arteria renal.

A continuación, este manguito del talón y la puntera se utiliza para formar la anastomosis arterial en el receptor. En última instancia, esta técnica debería dar lugar a casos muy bajos de trombosis arterial. Este video le mostrará cómo crear un manguito arterial para el talón y la punta del pie para facilitar los trasplantes de riñón en la boca.

La principal ventaja de esta técnica de métodos de resistencia es que la ruta de flujo sanguíneo desde la aorta del receptor hacia la arteria renal del donante se endereza, lo que resulta en una reducción de la activación plaquetaria y la formación de trombosis Utilizando una técnica estéril bajo un microscopio quirúrgico, extraiga el riñón del donante, realice correctamente. El tiempo de cosecha será de 15 a 20 minutos. Retire el pelaje y luego sujete al animal.

Prepare el sitio quirúrgico lavando la piel con povidona yodada, cubra el ratón y comience la cirugía con una incisión abdominal de dos centímetros en la línea media. Retraiga el intestino sobre el pecho y envuélvalo en una gasa húmeda. Mantenga la gasa húmeda durante todo el procedimiento.

Ahora, encuentra los grandes vasos abdominales y actúralos. Cualquier rama lumbar debe cauterizarse o ligarse con sutura de nailon 10 zero. A continuación, diseccione una división de dos milímetros de la vena cava inferior y la aorta distal a los vasos renales izquierdos.

A continuación, se ligan y dividen las pequeñas ramas arteriales y venosas que se unen al vaso renal. Continuar la disección roma para separar la vena renal de la arteria renal, permitiendo así la creación posterior de un parche de Carroll en el extremo proximal de la vena renal, este parche se utilizará para la formación de la anastomosis venosa. A continuación, le gusta y divide los vasos suprarrenales izquierdos para acceder a la aorta suprarrenal.

Una vez accedido, lazo seis cero seda. Sutura alrededor de la aorta suprarrenal para su uso posterior. Ahora movilice los vasos renales y el uréter desde la fascia circundante.

Gire el riñón hacia la derecha en la parte posterior, lige y divida las ramas vasculares concentrándose en el uréter. Libere con cuidado el uréter de la fascia circundante. No alterar el hilio renal y preservar los vasos eréticos.

A continuación, divida el uréter a nivel del conducto interior. Ahora se puede recuperar el riñón. En primer lugar, inyectar lentamente 300 unidades de heparina en la VCI distal para heparinizar al donante.

En segundo lugar, ate la sutura de seis ceros alrededor del aa suprarrenal. A continuación, perfundir el riñón izquierdo desde la aorta abdominal, inyectando 0,8 mililitros de solución salina de heparina a 100 unidades por mililitro. Después de la perfusión, cree inmediatamente el parche carilo venoso, evitando así el reflujo hacia el riñón.

Retraiga la vena renal hacia el riñón para revelar la arteria AA y la arteria renal. Ahora divida la aorta adyacente a la arteria renal. Hacer un tacón y un puño.

Luego, si se requieren cero minutos de isquemia fría, transfiera el riñón recuperado a un recipiente preparado. Alternativamente, transfiera los órganos a una cámara de almacenamiento de cuatro grados centígrados y luego eutanasique a los donantes como se indica en el protocolo de texto. Este procedimiento durará de 35 a 45 minutos, tal como se realiza para la anestesia del donante.

El receptor también complementa el bolo inicial según sea necesario. Proporcionar al destinatario una crema oftálmica. A continuación, administrar al animal una inyección de buprenorfina y continuar su administración después del procedimiento, después de realizar la incisión inicial y desplazar el intestino como se hizo con el donante, proceder con una nefrectomía derecha, ligar la arteria y vena renal con ligado de seis suturas cero y dividir el uréter proximal al riñón con seis suturas cero.

A continuación, extirpar el riñón distal a la sutura vascular. Ahora por debajo de los vasos renales, se aísla el AA y la VCI superiores al sitio de la anastomosis. Coloque una brida de algodón de cuatro ceros alrededor de la aorta y la VCI haga lo mismo en la parte inferior del sitio.

Cualquier vaso lumbar que se encuentre en la región debe cauterizarse o ligarse con 10 suturas de nailon cero, no la sutura que es inferior y luego firme, no la sutura que es superior. Esto retendrá algo de sangre en la aorta, lo que facilitará la autotomía AOR. Realice el átomo con una aguja de calibre 30, luego extienda la incisión para que tenga unos dos milímetros de largo con unas microtijeras finas.

El siguiente paso es realizar una endoanastomosis desde el talón y el manguito del dedo del pie del donante hasta la aorta del receptor. En primer lugar, coloque un punto de sutura en el talón de la aorta donante con 10 suturas cero. Continúe esto a través del extremo inferior de la incisión en la aorta del receptor y átelo.

En segundo lugar, coloque una sutura de 10 cero en el extremo superior de la incisión aórtica y continúe a través de la punta del manguito donante y átelo. En tercer lugar, comenzando por el extremo superior, haga una sutura líquida en la pared lateral de la aorta y átela contra el punto de soporte inferior colocado anteriormente. A continuación, voltee el riñón y continúe con una sutura continua a lo largo de la pared medial y átelo contra el punto de soporte superior.

Complete la anastomosis venosa perforando la VCI con la aguja y luego extendiendo la incisión con microtijeras finas. Con 10 nailon cero, ate la vena renal donante a la esquina inferior de la VCI. Coloque otras 10 suturas cero en el extremo superior de la vena IVC y la vena donante y haga una sutura continua a lo largo de ambos lados.

Al igual que con la anastomosis arterial, la aversión de los bordes del tejido ayuda con el sellado y la cicatrización. Ahora, revisa tu trabajo. Las paredes opuestas no deben quedar atrapadas por los puntos de sutura o el flujo sanguíneo se constreñirá demasiado.

Otro factor de vital importancia es garantizar que la tensión de la línea de sutura anastomótica sea óptima, si se afloja demasiado y habrá fugas irreversibles, se apretará demasiado y habrá estenosis para el flujo. Si está en el lado arterial, esto dará como resultado una mala profusión del injerto. Si está en el lado venoso, se producirá un riñón congestionado.

Una vez completada la anastomosis, suelte la brida de algodón distal para establecer el flujo venoso. A continuación, afloje gradualmente el lazo proximal y lave para la hemostasia en la anastomosis arterial. Cuando se confirma que ambas anastomosis son seguras, aquí está la vejiga del receptor con una aguja de calibre 20 que hace dos orificios para pasar pinzas a través de los orificios y tirar del uréter del donante a través de la vejiga.

A continuación, ancle el extremo proximal del uréter a la pared de la vejiga con 2 10 0 suturas. Recorte el exceso de longitud del uréter que sobresale para que se retraiga dentro de la vejiga. A continuación, cierre el otro orificio de la vejiga con 10 suturas cero.

Complete la cirugía reemplazando el intestino, cerrando el abdomen en dos capas con sutura de seda continua de cinco cero e inyectando un microlitro de solución salina en el abdomen antes de cerrar. Después de cerrar el abdomen inyectar otros 0,8 mililitros de suero fisiológico por vía subcutánea y recuperar al animal en una manta tibia En un año de recolección de datos, esta técnica redujo significativamente la incidencia de trombosis arterial del 35% al 0% y esta tasa de trombosis del 0% se ha mantenido desde que se realizó inmunohistoquímica en un riñón no trasplantado y en un riñón trasplantado. Utilizando la técnica descrita, una tinción por desplazamiento de ácido peryódico reveló células tubulares proximales normales en el control y en el donante.

Las células son cuboidales con un citoplasma claro y un núcleo redondo y ligero en el centro de la célula para ambas flechas. Señale la evidencia de una lesión leve en el borde del cepillo, pero la mayoría de los bordes del matorral son regulares y están bien conservados. Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo realizar una anastomosis arterial del talón y la copa del pie que resultará en una reducción de los casos de trombosis y trasplantes de riñón más exitosos.