Name: Un All-láser Trasplante endotelial (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: Aprende un trasplante endotelial totalmente láser para cirugía de córnea utilizando láser femtosegundo y soldadura láser. Esta técnica minimamente invasiva mejora la adhesión del tejido donante y reduce el riesgo de desplazamiento postoperatorio.

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Los autores desean agradecer FORTE proyecto, financiado por la Región Toscana (POR CREO FESR 2007-2013, Bando Unico R &amp; S 2012), los de la UE 7PM ECHORD ++ Experimento LA-ROSAS que parcialmente apoyaron las actividades de investigación y el 7PM BiophotonicPlus Proyecto &quot;LITE&quot; otorgado por la Región Toscana.

El estudio se realizó con la aprobación del Comité de Ética prospectivamente del hospital; Se obtuvo el consentimiento informado. El estudio estaba en la adhesión a los principios de la Declaración de Helsinki. 1. Preparación de Donantes endotelio <ol><li> Utilice una córnea donante preparado por el banco de ojos local en la temperatura ambiente. </li><li> En la sala de cirugía, tire de la córnea del donante de su contenedor de entrega y apartado de la solución para la conservación de tejidos y la nutrición que se utiliza para el transporte de la córnea. </li><li> Coloque el borde corneo-escleral donante a través de una cámara anterior artificial, en el que un líquido puede fluir y crear una presión variable; cubrir la córnea con la cabeza de retención del tejido. </li><li> Conectar la cámara anterior artificial (AAC) a través de un conector de 3 vías a una jeringa llena con la preservación córnea y líquido nutrición. </li><li> Utilice el anillo de compresión para sostener el retén en su lugar. </li><li> Utilice la syrInge conectado a la AAC para mantener la presión intracameral: llenar la cámara anterior con la solución de preservación del tejido hasta alcanzar la presión óptima (ver 1.7). Cierre el conector. </li><li> Prueba de la presión dentro de la cámara anterior con un dedo. Cambiar la presión en el interior hasta alcanzar la presión interna derecha (en el rango de 60-70 mmHg). Cierre el conector de 3 vías. </li><li> Mida el espesor de la córnea donante con coherencia óptica Thomography (OCT). Mantenga la cámara anterior con esa córnea en una posición fija en el frente de la óptica del instrumento y luego tomar una adquisición de espesor completo-octubre. </li></ol> 2. Preparación láser femtosegundo del endotelio de los donantes <ol><li> Realizar aplanación de la córnea del donante bajo el dispositivo de láser de femtosegundo. Utilice el láser femtosec para cortar el tejido del donante con tres cortes posteriores: corte lateral posterior, llena laminar y cortar lado anterior. Ajuste los siguientes parámetros para los tres cortes.<ol><li> Para el corte completo lamelar (patrón de trama, empezar), ajustar la profundidad de corte correspondiente al punto de la córnea donante (medido con la OCT como se describe en 1.8) más delgado, siempre restando 95 micras. Establecer la energía de pulso en el rango de 0,8-0,9 mu J (dependiendo de la profundidad de trabajo). Ajuste el diámetro de 8,7 mm. Ajuste la separación punto tangencial a 2 micras. Ajuste la separación radial al punto 2 micras. </li><li> Para el corte de cara anterior, establezca la profundidad posterior 30 m más profundo que el corte lamelar completa anterior. Establezca la energía de impulso a 2,10 mu J; el diámetro a 8,6 mm; la separación lugar a 3 m, mientras que la separación de la capa a 3 micras. </li><li> Para el corte lateral posterior, localice la profundidad anterior de la cara posterior cortó 30 micras en sentido anterior de corte lamelar completa. Ajuste la profundidad posterior a 900 micras. Establezca la energía de impulso a 2,10 mu J; el diámetro a 8,3 mm; la separación lugar a 2 micras; la separación de la capa a 2 micras. </li></ol></li&gt; </ol> 3. Destinatario Preparación de ojos <ol><li> Preparar al paciente para la cirugía. Hacer una incisión corneal 4.00 mm a las 12 horas con 4,0 mm hoja precalibrados. Hacer una paracentesis limbal con una cuchilla precalibrado 1,2 mm, colocado en dos. Haz otra paracentesis limbal a las 6 horas con un cuchillo puñalada 30 °. </li><li> Insertar un mantenedor de cámara anterior en la cámara anterior del paciente, a través de las 2 en punto paracentesis. </li><li> Lleve a cabo una de diámetro 8,2 mm descemetorexis circular con el gancho dedicado. </li><li> Pele la membrana de Descemet y el endotelio de la estroma posterior y quitar los tejidos con un gancho de Descemet. </li></ol> 4. Preparación cromóforo <ol><li> Ponga 1 mg de polvo verde de indocianina en un tubo de microcentrífuga de 1,5 ml. </li><li> Añadir 9 mg de agua estéril (la solución de agua ICG es 10% w / w). </li><li> Mezclar manualmente el polvo de ICG y el agua con un agitador de metal. </li&gt; </ol> 5. La tinción de endotelio del donante <ol><li> Ponga el endotelio del donante sobre la parte más amplia de una Busin-inyector, con el lado interior en contacto con la superficie del inyector. </li><li> Teñir el lado interior del endotelio del donante con la solución de cromóforo, en su parte periférica, usando una espátula. El tejido manchado correctamente tiene un color verdoso homogénea. Espere 3 minutos antes de iniciar el paso 5.3. </li><li> Tire del endotelio de los donantes en la parte anterior de la Busin-inyector, laminado. </li></ol> 6. Insertar el endotelio de los donantes <ol><li> Sujete e inserte el endotelio donante plegado usando un fórceps atraumáticos coaxiales para lentícula endotelial. </li><li> Quite el mantenedor de cámara anterior. </li><li> Suturar la incisión corneal y la paracentesis (realizada en el paso 3.1) con un solo Stich Nylon 10.0. </li><li> Inyectar una burbuja de aire para desplegar el tejido del donante y presionar contra la córnea receptora. La burbuja de aire debe compensarmevisi- bles a llenar el espacio de la cámara anterior. </li></ol> 7. Soldadura Láser <ol><li> Coloque la lentícula donante en el centro de la córnea del receptor, desde el interior con un gancho o mover la burbuja de aire desde el exterior de la córnea con una espátula. </li><li> Usa un láser de diodo que emite a 810 nm, equipado con un diámetro de 300 micras núcleo de la fibra óptica estéril, con 0,22 como una apertura numérica (NA). </li><li> Mantenga la punta de la fibra fuera del globo ocular, y entregar la luz láser hacia el endotelio manchado, a través del tejido de la córnea transparente. La punta de la fibra está en la configuración sin contacto. </li><li> Utilice los siguientes valores para el láser: modo de emisión solo punto, 70-80 duración del impulso ms, 35-40 mJ por impulso. He-Ne con el objetivo de haz en. </li><li> Entregar puntos de láser individuales en la periferia manchado del endotelio donante. Entregar los puntos secuencialmente: el aspecto final es un anillo de puntos en la periferia de la lentícula donante. La distancia entre dos adjacentro manchas ciento es el doble de un diámetro de punto. </li><li> Aplicar una lente de contacto en el ojo del paciente, junto con 0,3% de tobramicina y dexametasona 0,1% suspensión oftálmica. </li></ol>

<ol><li>Tan, D. T., Dart, J. K., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Corneal transplantation.</a> Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li>
<li>El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol+Ther%22%5BJournal%5D)">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmol Ther. , (2014).</li>
<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+tissue+welding+in+ophthalmic+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Laser tissue welding in ophthalmic surgery.</a> J Biophotonics. 1 (4), 331-342 (2008).</li>
<li>Pini, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combining+femtosecond+laser+ablation+and+diode+laser+welding+in+lamellar+and+endothelial+corneal+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+SPIE+Ophthalmic+Technologies+XVIII%22%5BJournal%5D)">Combining femtosecond laser ablation and diode laser welding in lamellar and endothelial corneal transplants.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XVIII. 6 (844), 684411-1-684411-7 (2008).</li>
<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((All-laser%27+endothelial+corneal+transplant+in+human+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+SPIE+Ophthalmic+Technologies+XXII%22%5BJournal%5D)">All-laser' endothelial corneal transplant in human patients.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XXII. 8209, 82091O-1-82091O-3 (2012).</li>
<li>Rossi, F., Pini, R., Menabuoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+model+analysis+on+the+temperature+dynamics+during+diode+laser+welding+of+the+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Opt%22%5BJournal%5D)">Experimental and model analysis on the temperature dynamics during diode laser welding of the cornea.</a> J Biomed Opt. 12 (1), 014031-1-014031-7 (2007).</li>
<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+corneal+welding+in+cataract+surgery%3A+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted corneal welding in cataract surgery: retrospective study.</a> J Cataract Refract Surg. 33 (9), 1608-1612 (2007).</li>
<li>Buzzonetti, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+Welding+in+Penetrating+Keratoplasty+and+Cataract+Surgery+in+Pediatric+Patients.+Early+Results%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Laser Welding in Penetrating Keratoplasty and Cataract Surgery in Pediatric Patients. Early Results.</a> J Cataract Refract Surg. 39 (12), 1829-1834 (2013).</li>
<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%27anvil%27+profile+in+femtosecond+laser-assistedpenetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The 'anvil' profile in femtosecond laser-assistedpenetrating keratoplasty.</a> Acta Ophthalmol. 91 (6), e494-e495 (2013).</li>
<li>Canovetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+penetrating+keratoplasty%3A+one+year%E2%80%99s+results+in+patients%2C+using+a+laser-welded+%E2%80%9Canvil%E2%80%9D-profiled+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted penetrating keratoplasty: one year’s results in patients, using a laser-welded “anvil”-profiled graft.</a> Am J Ophthalmol. 158 (4), 664-670 (2014).</li>
</ol>

Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos.

El &quot;todo láser&quot; trasplante endotelial es un enfoque original de invasión mínima trasplante de córnea. Todos los procedimientos descritos en el protocolo se realizaron en la sala de cirugía, observando el procedimiento de higiene y esterilización que son prácticas comunes durante las cirugías, tales como el uso de esterilizar los guantes, bata, mascarilla y gorro. La solución de ICG se preparó de la sala de cirugía, poco antes de su aplicación en la tinción del endotelio del donante...

En este trabajo se presenta un enfoque original de la queratoplastia endotelial, basado en el uso de un láser de femtosegundo para preparar tejido del donante y un láser de diodo de infrarrojo cercano para soldar sobre la cama destinatario. Medición intraoperatoria de la córnea donante es necesario diseñar correctamente las dimensiones del tejido donante. Queratoplastia endotelial se ha propuesto en los últimos años para sustituir a la queratoplastia penetrante en el tratamiento de la enfermedad de 1,2 endotelial. La principal ventaja de esta técnica es una recuperación más rápida visual, con respecto a la queratoplastia penetrante, la anestesia durante la cirugía reducido, una disminución del riesgo de rechazo del injerto y la preservación de la integridad de los ojos. El principal factor de riesgo es la luxación postoperatoria lentícula donante. La técnica estándar se realiza mediante la inserción del endotelio del donante en su posición final donde se mantiene mediante la inyección de una burbuja de aire: no hay suturas se utilizan debido a la chara mecánica, biofísica y dimensionalcteristics del endotelio. Por otra parte, la recuperación de la agudeza visual puede estar limitada principalmente a causa de una falta de coincidencia entre los tejidos del donante y del receptor debido a un tejido grueso trasplantado. Aquí presentamos un procedimiento en la realización de la queratoplastia endotelial que puede superar los principales problemas. El endotelio del donante se puede asegurar en su posición final mediante el uso de la técnica de soldadura láser. Este es un proceso fototérmico controlada y localizada: puede ser inducida en la interfase con el donante / receptor. Se ha estudiado en los últimos diez años y se propone en la queratoplastia penetrante y en el trasplante de endotelio 3-5. La luz casi infrarroja (longitud de onda: 810 nm) emitida por un láser de baja diodo de potencia se entrega hacia el tejido biológico en el sitio de la herida. La córnea es naturalmente transparente a esta longitud de onda: con el fin de hacer de este tejido para absorber la luz del láser, es necesario para teñir con un cromóforo. El tinte propuesto es una saturar estérild solución acuosa de indocianina verde (ICG). Hemos demostrado que cuando el tejido de la córnea se tiñe correctamente con esta preparación ICG, que muestra un pico de absorción a 810 nm 6. Además, el ICG se utiliza ampliamente en el diagnóstico clínico y su seguridad ha sido ya demostrado en sujetos humanos. La córnea manchado absorbe la energía de la luz láser de diodo y el efecto resultante principal es un aumento de la temperatura controlada en el lugar de soldadura. No hay efectos térmicos son inducidas en los tejidos sin teñir. La mejora de la temperatura induce la desnaturalización térmica reversible en el colágeno del estroma, con un closuring inmediata de las paredes de la herida tras el enfriamiento. Este efecto de la soldadura láser se demostró en primer lugar en la cirugía de cataratas 7,8 y queratoplastia penetrante 9,10. Un enfoque optimizado que presentamos en este trabajo se ha estudiado para su aplicación en la queratoplastia endotelial. En la cirugía propuesta, puntos de láser individuales (decenas duraderos de mseg) are entregado al tejido, resultando en un efecto fototérmica localizada dentro de la dimensión punto (unos pocos cientos de micras de diámetro): el efecto inducido es una soldadura láser duro, que consiste en una fotocoagulación del colágeno confinado en la interfase con el donante / host. El resultado de la desnaturalización del colágeno en el sitio soldada es una fuerte adhesión entre los tejidos del donante y del huésped, proporcionando así un efecto de sutura que es imposible de obtener con la técnica estándar (puntos). El tejido recupera su aspecto natural en un seguimiento corto (1 mes) y la adhesión entre tejidos de donantes / receptores se mejora la soldadura proporcionado en la etapa muy temprana de la fase de curación. Para evitar el otro riesgo principal de la queratoplastia endotelial, es decir, el trasplante de un tejido de donante de espesor, intraoperatorio tomografía de coherencia óptica (OCT) se utiliza: un dispositivo comercial mide el grosor de la córnea del donante, de modo que un perfil de corte correcta puede ser diseñado con laláser femtosec. Así pues, la propuesta de &quot;todo láser&quot; trasplante endotelial parece mejorar los resultados clínicos de este tipo de cirugía mínimamente invasiva.

<table><tbody><tr><td>Indocianine Green</td><td>Pulsion Medical Systems, Alemania</td><td>ICG-PULSION (http://www.pulsion.com/international-english/perfusion/icg-pulsion/)</td><td>Producto alternativo: IC-GREEN, Akorn&nbsp; Inc., Lake Forest, Illinois- EE. UU. (http://www.icginjection.com/)</td></tr><tr><td>Láser de femtosegundo&nbsp;</td><td>Óptica médica de Abbott,&nbsp; Abbott Laboratories Inc. Abbott Park, Illinois, EE. UU</td>. <td>iFS150 (http://www.abbottmedicaloptics.com/products/refractive/ilasik/ifs-advanced-femtosecond-laser)</td><td></td></tr><tr><td>Tomografía de coherencia óptica (OCT)</td><td>Carl-Zeiss Meditec, Dublín, California- EE. UU. (http://www.zeiss.com/meditec/en_de/home.html)</td><td>Láser</td> de diodo Visante <td></td></tr><tr><td></td><td>E.l.En. Grupo s.pa., Calenzano-FI, Italia (http://www.elengroup.com/en/divisions/medical)</td><td>Mod. WELD 800</td><td></td></tr><tr><td>Cámara Anterior Artificial</td><td>CORONET, productos de injerto de córnea. Network Medical Products Ltd. Coronet House, Kearsley Road, Ripon, North Yorkshire, HG4 2SG, Reino Unido</td><td>Cámara anterior artificial (A.A.C.) con cabezas de retención de tejidos grandes y pequeñas. Código 51-935 (http://www.networkmedical.co.uk/ophthalmic_artificial_ anterior_chamber.html)</td><td></td></tr><tr><td>Solución para la conservación y nutrición de tejidos&nbsp; &nbsp;</td><td>AL. CHI.MI.A. Srl, Viale Austria 14, 35020 - Ponte S. Nicol&ograve; - PD &nbsp; ITALIA</td><td>Medios Carry-C para la destrucción corneal y el transporte a temperatura ambiente - 12 x 50 ml (http://www.alchimiasrl.com/en/organ-culture-at-31&deg;-c-eb/carry-c-eb)</td><td></td></tr></tbody></table>

un &quot;all-láser&quot; trasplante endotelial

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

La queratoplastia endotelial asistida por "todo láser" es un procedimiento que se realiza con un láser de femtosegundo utilizado para cortar el tejido del donante a una profundidad prevista, y un láser de diodo de infrarrojo cercano para soldar el tejido corneal. La técnica propuesta permite alcanzar los tres objetivos principales de la queratoplastia endotelial: un control preciso del grosor del tejido donante; su fácil inserción en el lecho receptor y un menor riesgo de luxación del lentículo del donante. El grosor de la córnea del donante se mide en el quirófano con tomografía de coherencia óptica (OCT), con el fin de diseñar correctamente las dimensiones del tejido del donante. Se utiliza un láser de femtosegundo para cortar la córnea del donante. El ojo receptor se prepara mediante la extracción manual de la membrana descemética. El endotelio del donante se inserta en un inyector de busina, la cara interna periférica se tiñe con un cromóforo adecuado (una solución acuosa de verde de indocianina) y luego se extrae en la cámara anterior. El tejido trasplantado se coloca en la ubicación final y correcta y luego se induce la soldadura con láser de diodo desde el exterior del globo ocular. El procedimiento se ha realizado en más de 15 pacientes evidenciando una mejoría en el rendimiento quirúrgico, con una buena recuperación de la agudeza visual y un menor evento de luxación de lentículo del donante.

Se propone el procedimiento quirúrgico &quot;todo laser&quot; para realizar mínimamente invasiva trasplante de córnea. El procedimiento es fácil de realizar (véase la Figura 1): con respecto a un trasplante endotelial estándar sólo las etapas de medir el grosor corneal, manchando el tejido de donante y la entrega de la luz láser se añaden. Las ventajas conseguidas compensan en gran medida un mayor tiempo quirúrgico de unos pocos min. El uso de intraoperatoria octubre para medir el espesor de la córnea d...

Se propone un procedimiento totalmente láser en el trasplante endotelial. La técnica quirúrgica se basa en el uso de un láser de femtosegundo para preparar el tejido del donante. A continuación, se utiliza la técnica de soldadura láser para asegurar el endotelio del donante en la posición correcta.

Un &quot;All-láser&quot; Trasplante endotelial

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

El objetivo general de este procedimiento es realizar una cirugía mínimamente invasiva con láser para el trasplante de ententes corneales delgados. Esto se logra midiendo primero la córnea del donante y cortándola con un segundo láser Femato. A continuación, se realizan incisiones en el lecho corneal del receptor y se retiran la membrana deseminente y el endotelio en preparación para el tejido del donante.A continuación, se tiñe el colgajo donante y se inserta en su posición final. Por último, la acua prestada por el donante se suelda con láser a la córnea receptora. En última instancia, la adherencia del endotelio del donante se puede ver un día después de la cirugía.La principal mejora de esta técnica con respecto al método estándar existente es que con el uso láser del colgajo se reduce el riesgo de luxación después de la cirugía. Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia la cirugía de trasplante de córnea debido a que la aplicación del procedimiento de soldadura láser también se ha estudiado en neurocirugía y otorrinolaringología. Por lo general, las personas nuevas en este método no tendrán dificultades porque es muy fácil de realizar.Para comenzar en el quirófano, retire la córnea del donante de su recipiente de entrega a temperatura ambiente y reserve la solución de transporte de la córnea. Conecte la cámara anterior artificial o a a c a través de un conector de tres vías a una jeringa llena de preservación y nutrición de la córnea. Líquido. Coloque el borde escleral corneal del donante sobre una cámara artificial en la que pueda fluir un líquido y crear una presión variable.Luego, con la cabeza de retención de tejido, cubra la córnea. A continuación, utilice un anillo de compresión para sujetar el retenedor de forma segura en su lugar. A continuación, con la jeringa conectada al A A C, para mantener la presión intracameral, utilice solución de preservación de tejido para llenar la cámara anterior hasta alcanzar la presión óptima.A continuación, cierre el conector de tres vías con un dedo. Pruebe la presión dentro de la cámara anterior, ajustándola hasta alcanzar la presión interna correcta. Para medir el grosor de la córnea del donante, mantener la cámara anterior con una córnea en posición fija y con tomografía de coherencia óptica o OCT.Tome una medida OCT de espesor completo para cortar el tejido donante Después de su explicación en la aplicación, comience con un lam completo o corte ajustando la profundidad de corte correspondiente al punto más delgado de la córnea donante menos 95 micras. Ajuste la energía del pulso en el rango de 0,8 a 0,9 micro julios. Ajuste el diámetro a 8,7 milímetros.Establezca la separación de puntos tangenciales en dos micrómetros y establezca la separación de puntos radiales en dos micrómetros donde corte el lado anterior. Ajuste la profundidad posterior, 30 micrómetros más profunda que la lama completa anterior. Cortar. Ajuste la energía del pulso a 2,10 microjulios, el diámetro a 8,6 milímetros para el lado posterior. Cortar.Localice la profundidad anterior de la cara posterior y corte 30 micrómetros anteriormente hasta la lama o corte completo. Establezca la profundidad posterior en 900 micrómetros. Ajuste la energía del pulso a 2,10 micro julios.El diámetro a 8,3 milímetros, la separación de puntos a dos micrómetros y la separación de capas a dos micrómetros. A continuación, realice el corte para preparar al paciente para la cirugía con una cuchilla precalibrada de 1,2 milímetros. Hacer una paracentesis limbal a las dos en punto a través de la paracentesis de las dos en punto.Inserte un mantenedor de cámara anterior en la cámara anterior del paciente. Luego, usando una cuchilla de 30 grados. Realice una segunda paracentesis limbal a las seis en punto.Utilice una cuchilla precalibrada de 2,0 milímetros para realizar una incisión corneal de 2,00 a las 12 en punto. Luego, con un gancho dedicado, realice un desme o eje circular de 8,2 milímetros de diámetro. Retire la membrana de desme y el endotelio del estroma posterior y use un gancho de desme para extraer los tejidos.Para preparar el cromóforo para teñir el tejido donante, agregue un miligramo de verde de indocianina o polvo ICG a un tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitros. Luego agregue nueve miligramos de agua estéril con un agitador de metal. Mezcle manualmente la solución de ICG para suspender el polvo.Coloque el endotelio del donante en la parte más ancha de un abuso e inyector con el lado interno en contacto con la superficie del inyector. Con una espátula, agregue la solución de cromo cuatro en la cara interna del endotelio donante para teñirlo de un color verde homogéneo. Después de esperar tres minutos, enrolle el endotelio e insértelo en la parte anterior del inyector de busina.Con una pinza coaxial atraumática, agarre e inserte el endotelio donante doblado con una sola puntada de nailon 10.0. Suturar la incisión corneal y la paracentesis. Inyecte una burbuja de aire que llene completamente el espacio de la cámara anterior para desplegar el tejido donante y presionarlo contra la córnea receptora.A continuación, retire el mantenedor de la cámara anterior desde el interior con un gancho o utilizando una espátula para mover la burbuja de aire desde el exterior. Coloque el lenti donado en el centro de la córnea receptora. Configure una emisión de láser DDE a 810 nanómetros con un diámetro de núcleo de 300 micrómetros, fibra óptica estéril y una apertura numérica de 0,22 utilizando la configuración enumerada aquí para el láser y, mientras mantiene la fibra óptica fuera del globo ocular y en configuración sin contacto secuencialmente, proporcione puntos láser individuales a lo largo de la periferia del endotelio teñido a través del tejido corneal transparente.El aspecto final es un anillo de manchas en la periferia del liti donante. La distancia entre los centros de dos puntos adyacentes es el doble del diámetro de un punto. Una vez finalizada la soldadura láser, aplique una suspensión oftálmica de tobramicina al 0,3% y dexametasona al 0,1% en el ojo del paciente.A continuación, colóquese una lente de contacto. Este procedimiento quirúrgico con láser realiza un trasplante de córnea mínimamente invasivo con respecto a un trasplante endotelial estándar. Solo se añaden los pasos de medición del grosor de la córnea, tinción del tejido donante y administración de la luz láser.Las ventajas conseguidas compensan en gran medida el aumento del tiempo quirúrgico de unos pocos minutos. El uso de OCT intraoperatoria para medir el grosor de la córnea del donante y el láser de femtosegundo utilizado para personalizar las dimensiones del lentículo del donante permite mejorar la adhesión de la interfaz del huésped donante en comparación con no realizar la medición del grosor de la córnea del donante como se muestra aquí, lo que resulta en una mala adhesión en la periferia. De este modo, la cirugía se diseña siguiendo las necesidades y características morfológicas de cada paciente.En una técnica estándar, no es posible suturar el tejido del donante de ninguna manera debido a sus características biomecánicas y localización. Sin embargo, el procedimiento de soldadura láser proporciona un anillo completo de puntos que cubren el diámetro externo de la interfaz donante-receptora y proporciona un cierre inmediato de la interfaz. Un día después de la cirugía, un endotelio parcialmente soldado muestra una dislocación del óculo del donante, excepto en los sitios de soldadura.Siguiendo este procedimiento, se pueden realizar otros métodos como la otoplastia ular anterior con el fin de preguntarse adicionalmente cómo evitar el uso de la demanda estándar después de su desarrollo. Esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la microcirugía exploraran la sutura en tejidos delgados, sitios inaccesibles, como en la anastomosis de extremo a extremo en la cirugía cerebral. Después de ver este video, debería tener una buena idea de cómo realizar una quetoplastia endotelial con un bajo riesgo de desplazamiento linical después de la cirugía.Este material nos proporciona un material muy fino que se adhiere al medicamento receptor con una buena satisfacción de nuestro paciente.

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Para algunos pacientes, la única opción para la preservación de la fertilidad es la criopreservación de tejido ovárico. Desafortunadamente, la revascularización tardía socava la viabilidad folicular. Aquí, presentamos un protocolo de co trasplante de tejido ovárico humano con células endoteliales para utilización como una estrategia basada en celda combinando acelerada la perfusión con una entrega de paracrina directa de moléculas bioactivas.

Co el trasplante de tejido ovárico humano con células endoteliales Ingeniería: una combinación de estrategia basado en la célula acelerada perfusión con entrega directa paracrina

Stripping Only de Descemet es un procedimiento experimental en el que a los pacientes con guttas corneales centrales resultantes de la distrofia corneal endotelial de Fuchs se les extirpa la membrana de Descemet para que las células periféricas regeneren la capa endotelial. Presentamos una novedosa metodología simulando DSO en córneas humanas distróficas ex vivo con curación acelerada estimulada por eFGF1 (NM141).

Un modelo de cultivo de órganos corneales humanos de la extracción de Descemet solo con curación acelerada estimulada por el factor de crecimiento de fibroblastos diseñado 1

Aquí, describimos una plataforma que permite la obtención de imágenes in vivo no invasivas de esferoides hepáticos injertados en la cámara anterior del ojo del ratón. El flujo de trabajo abarca desde la generación de esferoides a partir de células hepáticas primarias hasta el trasplante en el ojo del ratón y la obtención de imágenes in vivo a resolución celular mediante microscopía confocal.

Obtención de imágenes in vivo de esferoides hepáticos injertados en la cámara anterior del ojo de ratón

Este protocolo describe un modelo de trasplante intestinal basado en ratas con ileostomía para la evaluación de la evolución temporal de la intervención farmacológica en el rechazo del injerto.

Un modelo de rechazo de injerto de rata para trasplante intestinal con ileostomía exteriorizada para la evaluación del pronóstico longitudinal

En este artículo se presenta un protocolo para la administración precisa guiada por ultrasonido de células madre vasculares a la pared del vaso aórtico. La técnica se dirige eficazmente a la pared del vaso y promueve la reparación vascular en aneurismas y disecciones aórticas.

Administración de células madre guiadas por ultrasonido de precisión para la reparación vascular en enfermedades aórticas

Presentamos un modelo reproducible de ratón de alotrasplante compuesto vascularizado de extremidades posteriores a cuello heterotópico. Este protocolo supermicroquirúrgico, que implica anastomosis de vasos de 0,3-0,5 mm, integra guía con filamento de nailon y esposas venosas. Proporciona una plataforma fiable para estudios traslacionales sobre tolerancia, lesiones por isquemia-reperfusión y mecanismos inmunológicos en alotrasplantes compuestos vascularizados.

Trasplante heterotópico de extremidad posterior a cuello en ratón: un modelo supermicroquirúrgico de alotrasplante compuesto vascularizado

Determinación de quimerismo de células donantes presenta un reto en modelos de ratón trasplante de médula ósea que carecen bien definidos marcadores fenotípicos. Se presenta una metodología para cuantificar injerto macho donante de células en ratones hembras receptoras de trasplante. Este método se puede utilizar en todas las cepas de ratón para el estudio de funciones HSC.

Usando cuantitativa en tiempo real PCR para determinar quimerismo de células donantes en un modelo competitivo Trasplante de médula ósea murina

Aprende un trasplante endotelial totalmente láser para cirugía de córnea utilizando láser femtosegundo y soldadura láser. Esta técnica minimamente invasiva mejora la adhesión del tejido donante y reduce el riesgo de desplazamiento postoperatorio.

Un "All-láser" Trasplante endotelial

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