Name: Un modelo de ratón de subcrónica y leve estrés Derrota Social para Entender déficits conductuales y fisiológicos inducidos por el estrés (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 10 s
Description: Aprende a establecer un modelo de estrés por derrota social subcrónica y leve en ratones para estudiar mecanismos de síntomas inducidos por estrés. Este método permite investigar cambios conductuales y fisiológicos relacionados con la depresión.

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Los autores agradecen a los Dres. Kentaro Nagaoka (Universidad de Tokio de Agricultura y Tecnología) y Wataru Iio (prefectura de Ibaraki) para la discusión útil. Esta investigación fue financiada en parte por Ibaraki Cooperación Universitaria entre Agricultura y Ciencias Médicas (IUCAM) (El MEXT, Japón) y el Proyecto de Investigación sobre el Desarrollo de Productos y alimentos con beneficios para la salud, la promoción de la agricultura (NARO) (El MAFF, Japón) .

Los estudios con animales fueron aprobados por y cumplen las directrices tanto del Cuidado de Animales y el empleo Comisión de la Universidad de Ibaraki y el Ministerio de Educación, Cultura, Deportes, Ciencia y Tecnología (MEXT), Japón (No.71 Notificación). Una visión general completa del protocolo se muestra en la Figura 1. 1. Aparato <ol><li> Prepare dos tipos de jaulas: una sola jaula (ancho [W] x profundidad [D] × altura [H] = 143 mm × 293 mm × 148 mm), y una &quot;derrota sociales (SD)&quot; jaula (W × D × H = 220 mm × 320 mm × 135 mm). </li><li> Como se muestra en la Figura 2, dividir la jaula SD en dos compartimentos con un divisor de acrílico transparente de planchar (5 mm de espesor) con 15 agujeros circulares (3 × 5 matriz: 8 mm de diámetro). </li><li> Obtener las virutas de madera y afeitado a base de árboles de abeto, bolitas de comida purificada-dieta, y una botella de agua para beber. Además, obtener toallas de papel, una máscara y guantes de látex. </li&gt; <li> Para la prueba de la interacción social, preparar un escenario de campo abierto (W x D x H = 40 cm × 40 cm × 40 cm) hecho de cloruro de polivinilo de color gris, un peso de acero (190 g), y un cuadro de la interacción de plástico (W × D × H = 10 cm × 10 cm × 13 cm; 100 g) con tres ventanas de malla de alambre (W x D = 5 cm x 5 cm) (Figura 3). </li><li> Coloque una cámara CCD (2,8 a 12 mm; F ​​= 1: 1.4; 3.1 pulgadas CCD) y un sistema de seguimiento automatizado en la sala de pruebas de comportamiento en el animalario. Coloque una plataforma adecuada para las jaulas de ratón en la sala de pruebas de comportamiento para habituar a los ratones para el medio ambiente de la sala de pruebas por lo menos durante 30 minutos. </li></ol> 2. La habituación con el Medio Ambiente <ol><li> Utilice masculino C57BL / 6JJmsSlc (B6) ratones que son 7 semanas de edad y SLC masculina: ICR (ICR) ratones que son más de 5 meses de edad y entregar a la instalación de una compañía de la cría de animales. </li><li> Independientemente mover dos grupos de ratones B6 (n= 12 en cada grupo) para la instalación; utilizar un grupo (screener B6 ratones) para la selección de los ratones agresivos ICR y otro grupo (los ratones sujetos B6) para el desarrollo del modelo sCSDS. </li><li> Introducir ratones ICR (n = 12) a las instalaciones con el fin de defender sus comportamientos agresivos. </li><li> Casa los ratones individualmente en jaulas individuales durante 1 semana bajo un ciclo de luz-oscuridad de 12 horas (alrededor de 100 lux de luz fluorescente, luces encendidas a las 08:00) con la temperatura constante (alrededor de 23 ° C) y los niveles de humedad (alrededor de 40%) con el fin de habituar al entorno. Partición cada jaula mediante la colocación de placas de plástico de color blanco entre las jaulas para que los ratones que no están afectados por el comportamiento de los ratones vecinos. </li><li> Hacer bolitas de comida purificada-dieta y agua de ósmosis inversa disponible ad libitum. Utilice AIN-93G Chow porque los ingredientes de otras pastillas de dieta no purificados pueden variar. </li><li> Medir el peso corporal, la ingesta de alimentos (FI), y la ingesta de agua (WI) de los ratones cada día. Calcular la baumento de peso ody (BWG) desde el día inicial. </li></ol> 3. Proyección de agresivo ratones ICR <ol><li> Después de la habituación por 1 semana como se mencionó anteriormente, la pantalla los ratones ICR (residente) mediante pruebas de residente-intrusión para una prueba de 3 minutos con ratones B6 screener (intruso; 8 semanas de edad) en la tarde (14: 00-17: 00) bajo la iluminación de alrededor de 300 lux en la sala de la vivienda. <ol><li> Específicamente, probar cada ratón ICR para los tres ensayos por día durante 5 días consecutivos (15 ensayos en total) hacia diversos ratones B6 como sea posible para encontrar ratones ICR muestran alta agresión hacia los intrusos. Durante las pruebas, grabar la latencia ataque y duración de la conducta agresiva (movimientos rápidos con ataque mordaz). </li></ol></li><li> Identificar ratones ICR hiperagresivos marcando las heridas daños en ratones B6 intruso después de cada ensayo. </li><li> Calcular la relación de ensayos en los que la latencia de ataque es de menos de 30 seg como un primer índice de la puntuación de la agresión. </li><li> doalculate la relación de ensayos en los que la latencia de ataque es menos de 3 min como un segundo índice de la puntuación de la agresión. </li><li> Evaluar los resultados de agresión desde el primer índice. Utilice el segundo índice cuando el primer índice es igual. </li><li> Seleccione los ratones ICR que tenían puntuaciones altas agresión sin comportamientos hiper-agresiva como ratones agresivos ICR. Utilice los ratones agresivos ICR en repetidas ocasiones a lo largo de la siguiente serie de experimentos hasta aproximadamente 12 meses de edad; sin embargo, realizar el proceso de selección para los ratones ICR agresivos como se describe anteriormente antes de cada experimento para confirmar la agresividad de ratones ICR. </li><li> Después de cada sesión de la proyección, registrar el grado de lesión de los ratones B6 screener. Si un ratón está herido, aislar el ratón en una sola jaula y observar el progreso mediante la comprobación de su ganancia de peso corporal, la ingesta de alimentos y la ingesta de agua. En el caso de las heridas graves que afectan a la fisiología y el comportamiento en ratones, la eutanasia de acuerdo con I localesDirectrices ACUC. </li></ol> 4. sCSDS <ol><li> Introducir sujeto ratones B6 7 días antes (día -6) el día de la exposición inicial estrés (día 1) y la casa de los ratones individualmente en jaulas individuales para habituarse al entorno. </li><li> Tres días antes del día 1 (el día -2), mover los ratones ICR agresivos en un compartimiento de cada jaula SD, que se divide por un divisor de acrílico para dejar que los ratones establecen sus territorios en las jaulas SD (el mismo número de sujetos B6 ratones). </li><li> Dividir las jaulas SD mediante el uso de tablas de partición de color blanco, como en la condición de una sola jaula descrito anteriormente. </li><li> Para los ratones B6 no estresado de control, preparar jaulas SD (media del número de ratones) para mantener los ratones en pares; colocar dos ratones en cada compartimiento dividido por el divisor en una jaula de SD durante 10 días. </li><li> Después de las mediciones diarias BWG, FI y WI en el día 1, los ratones lugar sujeto B6 en uno de los compartimentos de las jaulas SD (casa-jaula de residente) en el faetrnoon (14: 00-16: 00) con la iluminación de alrededor de 300 lux en la sala de la vivienda y medir el tiempo de contacto físico desde el primer bocado de ataque para completar la prueba residente intruso. </li><li> El día 1, establecer el tiempo de contacto físico a 5 min de la primera mordida ataque y han observadores contar el número de picaduras de ataque por ratones ICR que se dirigen preferentemente en la parte posterior o flancos del oponente como lo describe Miczek et al. 20 a determinar el grado de estrés físico a ratones B6. </li><li> Después del tiempo de contacto físico, rescate sujetos ratones B6, y comprobar y registrar su estado y de las heridas de la piel. Luego, coloque los ratones B6 en otro compartimento junto a los ratones ICR en las jaulas SD hasta que la exposición al estrés físico al día siguiente. </li><li> Debido a que el divisor de acrílico en la jaula SD es transparente y contiene agujeros, exponer sujetos ratones B6 a diversas tensiones emocionales, incluyendo visuales, auditivas y estímulos olfativos, desde los ratones ICR en el compartimiento vecinoción de la jaula SD durante 24 horas todos los días. </li><li> Mida la BWG, FI y WI de ratones B6 de control de todos los días y luego colocarlos en cada compartimiento en las jaulas SD durante 1 día. </li><li> El día 2, después de las mediciones diarias de BWG, FI y WI, introducir sujetos ratones B6 en los territorios de otros ratones ICR para exponerlos al estrés físico. </li><li> Establezca la duración del contacto físico en 4.5 minutos de la primera mordida ataque en el día 2, y contar el número de picaduras de ataque. </li><li> Mueva ratones B6 de control en diferentes compartimentos y cambiar las combinaciones de pares con el fin de mezclar la colocación y socio de los pares de todos los días. </li><li> Disminuir la duración de contacto físico por 0.5 min por día, de modo que la duración en día 10 se establece en 0,5 min desde el primer bocado ataque. </li><li> El día 7, reemplazar aproximadamente la mitad de las virutas de madera en todos los compartimentos en las jaulas SD. </li><li> Después de la exposición a la última tensión física en el día 10, mueva sujetos ratones B6 en jaulas individuales. Al igual que en los sujetos ratones B6, mueva ratones B6 de control en jaulas individuales en el día 10. </li><li> Si un ratón ICR no muestra picaduras de ataque hasta 5 minutos en cada ensayo el día 1 al 10, dar por terminado el juicio. Vuelva a colocar el ratón ICR con ratones ICR agresivos piezas y llevar a cabo un ensayo alternativo para el ratón sujetos B6. </li><li> Si un ratón está herido, aislar el ratón en una sola jaula y observar el progreso mediante la comprobación de su ganancia de peso corporal, la ingesta de alimentos y la ingesta de agua. Siga las directrices de su IACUC para la analgesia. En el caso de las heridas graves que afectan a la fisiología y el comportamiento en ratones, la eutanasia de acuerdo a las directrices locales IACUC. </li></ol> 5. Prueba de Prevención Social (Interacción Social Test) <ol><li> Realizar pruebas de comportamiento de evitación social por la mañana (09: 00-12: 00) en el día 11. </li><li> Treinta minutos antes de la prueba, la transferencia de las jaulas de los ratones de control y sujeto B6 en un estante (tenue luz de menos de 1 lux) en el comportamientosala de pruebas en condiciones de iluminación de menos de 20 lux para que puedan habitúan al medio ambiente. </li><li> Para reducir los efectos de la orden, la prueba alterna ratones control y sujeto B6. </li><li> Limpie una arena de campo abierto (que se ilumina con una luz de 20 lux en el centro del campo) y una caja de interacción plástico usando toallas de papel empapadas con etanol al 70% antes de la prueba de comportamiento para cada ratón para eliminar las heces, la orina y los olores . </li><li> Coloque un ratón ICR desconocida (no se utiliza como un agresor) desde una sola jaula cerca del aparato de campo abierto. </li><li> Coloque un ratón B6 en el campo abierto de la caja interacción vacante como se muestra en la Figura 4. Monitorear y analizar su comportamiento durante 2,5 min usando el sistema de análisis automático (descrito en la etapa 5.10). </li><li> Después de la primera prueba, retire el ratón B6 desde el campo y colocarlo en su jaula. </li><li> A raíz de esto, coloque el ratón ICR desconocida masculina (objetivo social) en el cuadro de la interacción y luego introducir la B6en ratón del campo abierto y monitorear su comportamiento durante 2,5 minutos. </li><li> Después de la segunda prueba, devuelva tanto el B6 y ratones ICR a sus jaulas, y limpiar el campo y el cuadro de la interacción como se mencionó anteriormente. </li><li> Repita estos pasos para cada ratón B6 para probar su comportamiento social. Durante cada ensayo, ficha películas de primera visión usando una cámara CCD. <ol><li> Después de las pruebas de comportamiento, calcular el tiempo pasado en la zona de interacción (en segundos) y en la zona de esquina (en segundos) para cada ensayo como se muestra en Goto et al. 13. Juzgar la posición del ratón basado en el centro del ratón. </li><li> Calcular los puntajes de interacción social como 100 × (tiempo de interacción, con el objetivo) / (tiempo de interacción, sin objetivo), siguiendo los métodos publicados en Krishnan et al. 21. </li></ol></li></ol>

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</ol>

Los autores declaran que no tienen intereses financieros en competencia.

Hubo diferencias definitivas en el peso corporal entre sCSDS ratones y ratones sometidos a CSDS el protocolo CSDS estándar (5 a 10 min de contacto físico con los agresores por día) 19. Los ratones mostraron una mayor sCSDS BWG durante el periodo de estrés, mientras que los ratones estándar CSDS mostraron una disminución en el peso corporal durante el período de estrés 21,22,23. Hay una diferencia sustancial entre los dos protocolos en cuanto a la duración total del contacto físico con los agresores...

Hay muchos tipos de eventos estresantes ocurren a través de las vidas de los seres humanos. El estrés excesivo a menudo conduce a consecuencias fisiológicas nocivos en los seres humanos y los animales. En los seres humanos, los acontecimientos estresantes son los principales factores de riesgo de precipitación de trastornos psiquiátricos como la depresión 1. Una Carga Global de Enfermedad de estudios indicó que la depresión es uno de los trastornos más discapacitantes en términos de años de vida ajustados por discapacidad (AVAD) y los años vividos con discapacidad 2. Además, la depresión representa la mayor proporción de AVAD suicidas 3. Las personas que sufren de depresión tienen dificultades para manejar sus vidas, y como consecuencia, su calidad de vida a menudo empeora. Por lo tanto, existe una fuerte necesidad de desarrollar productos terapéuticos eficaces para mejorar la calidad de vida de estos pacientes. Muchos estudios se han realizado en los trastornos depresivos mayores, y han puesto de manifiesto que la contribución genética a la enfermedad susceptibility es de aproximadamente 30-40%, que se explica por los efectos de múltiples loci de efectos pequeños 4. Debido a los complejos mecanismos patogénicos subyacentes depresión, la etiología detallada de la enfermedad sigue siendo difícil de alcanzar. Informes clínicos indican que hay subtipos de depresión como la depresión melancólica y atípico 5, que muestran una reducción y aumento del peso corporal, respectivamente 6. Aunque el 25-30% y el 15-30% de los pacientes con depresión representan características melancólicas y atípicos puros, respectivamente, la mayoría de ellos tienen características mixtas de ambos subtipos 7. Por lo tanto, la depresión mayor tiene una amplia gama de síntomas. Con el fin de encontrar biomarcadores y desarrollar terapias objetivas para los diversos tipos de depresión en los seres humanos, es importante establecer varios modelos animales diferentes de la depresión 8. Los modelos animales de depresión se han establecido usando varios métodos incluyendo aprendidoimpotencia, estrés leve crónico impredecible, y el estrés derrota sociales crónica (DCV) 9-12. Toyoda y colegas establecieron los modelos CSDS de ratas y ratones 13-17 con el fin de dilucidar el metabolismo y comportamientos que están asociados con la depresión. Dado que los modelos animales de depresión son evaluados por la validez aparente 18, el contexto en el que se establece el modelo es importante. Por otra parte, Golden et al. 19 informó los métodos para la creación de ratones DCV de detalle. Se sabe que las deficiencias en el comportamiento social de los ratones CSDS pueden ser recuperados por el tratamiento crónico, pero no por el tratamiento agudo, con antidepresivos, y que comparten síntomas similares a los de los pacientes con depresión en cuanto a la regulación de neurotrófico derivado del cerebro factor de 6. Goto et al. 13 desarrollaron anteriormente el estrés derrota social, subcrónica y leve (sCSDS) modelo de ratón mediante la modificación de los métodosde Golden et al. 19. Los ratones sCSDS muestran síntomas polydipsia- y hiperfagia como siguientes aumentos en el peso corporal y el contenido de agua incrementado cuerpo 13. En este informe, se proporciona el protocolo para establecer el modelo de ratón sCSDS y discutimos la utilidad de este modelo.

<table><tbody><tr><td>jaula simple</td><td>Charles River Laboratories Japón</td><td></td><td>anchura [W] y veces; profundidad [D] y veces; altura [H] = 143 &veces; 293 &veces; 148 mm</td></tr><tr><td>Jaula M</td><td>Natsume Seisakusho</td><td></td><td>W &veces; D y veces; H = 220 y veces; 320 y veces; 135 mm</td></tr><tr><td>Whiteflake</td><td>Charles River Laboratories Japón</td><td></td><td>Astillas de afeitar de madera hechas de abetos</td></tr><tr><td>AIN-93G</td><td>Levadura</td><td></td> oriental <td>Pellets de alimentos dietéticos purificados</td></tr><tr><td>Kimtowel</td><td>Nippon Paper Crecia Co.</td><td></td><td>Toallas de papel</td></tr> arena <tr><td>de campo abierto</td><td>O' Hara & Co.</td><td></td><td>fabricado en cloruro de polivinilo gris</td></tr></tbody></table>

un modelo de ratón de subcrónica y leve estrés derrota social para entender déficits conductuales y fisiológicos inducidos por el estrés

A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits

Los acontecimientos estresantes de la vida a menudo aumentan la incidencia de depresión en los seres humanos. Para estudiar los mecanismos de la depresión, es esencial el desarrollo de modelos animales de depresión. Debido a que hay varios tipos de depresión, se necesitan varios modelos animales para una comprensión más profunda del trastorno. Anteriormente, se estableció un modelo de ratón de estrés de derrota social subcrónico y leve (sCSDS) utilizando un paradigma de estrés de derrota social crónica modificado (CSDS). En el paradigma, para reducir las lesiones físicas de los agresores, la duración del contacto físico entre el agresor y un subordinado se redujo en comparación con el paradigma original de CSDS. Los ratones sCSDS mostraron un aumento del aumento de peso corporal, la ingesta de alimentos y la ingesta de agua durante el período de estrés, y sus comportamientos sociales se suprimieron después del período de estrés. En términos de la validez aparente de la sobrealimentación y el consumo excesivo inducidos por el estrés después del aumento de peso corporal, los ratones sCSDS pueden mostrar algunas características relacionadas con la depresión atípica en los seres humanos. Por lo tanto, un modelo de ratón de sCSDS puede ser útil para estudiar los mecanismos patogénicos que subyacen a la depresión. Este protocolo ayudará a establecer el modelo de ratón sCSDS, especialmente para estudiar los mecanismos subyacentes al aumento de peso inducido por el estrés y los síntomas similares a la polidipsia y la hiperfagia.

Para controlar el grado de estrés físico durante más de los períodos de 10 días, el número de picaduras de ataque por los ratones ICR se contó manualmente por un investigador. Figura 5A indica los valores individuales para el número de picaduras de ataque recibidos. Hubo una considerable variabilidad en la etapa temprana (aproximadamente 10 a 120 picaduras en día 1), pero esta variabilidad se redujo en la etapa posterior (aproximadamente 5-20 picaduras en día 10). La Figura 5B indica qu...

Aquí, los métodos para el desarrollo de un modelo de ratón de estrés derrota social, subcrónica y leves se describen y se utilizan para investigar las características patogénicas de la depresión, incluyendo hyperphagia- y síntomas como polidipsia siguientes aumento del peso corporal.

Un modelo de ratón de subcrónica y leve estrés Derrota Social para Entender déficits conductuales y fisiológicos inducidos por el estrés

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of ...

El objetivo general de este procedimiento es establecer un modelo murino de estrés por derrota social subcrónico y leve, o S-C-S-D-S, para estudiar los mecanismos de los síntomas inducidos por el estrés. Esto se logra primero habituando ratones macho individuales de cepa black six y ratones ICR al ambiente. El segundo paso consiste en seleccionar y evaluar ratones ICR agresivos.A continuación, los ratones S-C-S-D-S se exponen individualmente a ratones black six, repetidamente durante varios días. Las puntuaciones de comportamiento social, el peso corporal, la ingesta de alimento y la ingesta de agua, medidas finalmente, revelan todos los cambios inducidos por el estrés en el modelo de ratón S-C-S-D-S. Con el fin de encontrar biomarcadores y desarrollar indicadores objetivos para los diversos tipos de depresión en humanos, es importante establecer varios modelos animales diferentes de deterioro.Para esta demostración, se utilizan ratones macho negros seis de siete semanas de edad y ratones macho ICR mayores. Forme dos grupos de una docena de ratones negros seis y un grupo de una docena de ratones ICR. Mueva independientemente los grupos a la instalación de alojamiento. Un grupo de ratones negros seis es para la selección de los ratones ICR y el otro es para desarrollar el modelo S-C-S-D-S.Mantenga a los ratones individualmente durante una semana en condiciones estándar con aproximadamente 40% de humedad relativa entre las jaulas. Coloque barreras blancas opacas para que los ratones no puedan verse entre sí diariamente. Mida la ingesta de alimento y agua de cada animal, así como la masa corporal de cada uno.Después de la semana de habituación, realice pruebas de intruso residente utilizando los ratones ICR como residentes durante las horas de la tarde. Lleve a cabo la prueba durante tres minutos bajo 300 lux en la sala de alojamiento; durante la prueba, registre la latencia al ataque y la duración de los movimientos rápidos con mordeduras, lo que define un ataque. Después de cada ensayo, revise los ratones Black Six en busca de laceraciones. Utilice esto como un índice de comportamiento hiperagresivo en los ratones ICR para el primer índice de agresión.Utilice la proporción de ensayos con una latencia de ataque menor a 30 segundos. Seleccione los ratones ICR más agresivos que no sean hiperagresivos. Utilice estos ratones en el modelo S-C-S-D-S.Repita la prueba tres veces al día durante cinco días consecutivos. Cada uno de los 12 ratones ICR debe encontrarse con cada uno de los 12 ratones black six al menos una vez. Introduzca los ratones de prueba black six en la sala de alojamiento.Aislados de la vista de los ratones vecinos. Dejar que se habitúen así durante siete días. Se necesitan dos ratones negros seis por cada ratón ICR agresivo en el estudio.Tres días antes de comenzar el experimento, traslade los ratones ICR agresivos a un compartimento de cada jaula SD. Una jaula SD contiene un divisor de acrílico móvil. Todas las jaulas SD deben estar bloqueadas de manera que no se puedan ver los animales vecinos.A continuación, aloje los ratones hembra C57BL/6 no sometidos a estrés como control, de modo que cada pareja ocupe compartimentos opuestos de jaulas SD todos los días del estudio. Monitoree el peso, y cambie el agua y la ingesta de alimento de todos los ratones el primer día del ensayo. Después de tomar las mediciones rutinarias, coloque un ratón hembra C57BL/6 en el compartimento ocupado por un ratón ICR.Realice esto por la tarde y bajo 300 cerrojos en la sala de alojamiento. Una vez que se produzca el primer ataque, comience a registrar los ataques durante cinco minutos. Cuente el número de ataques dirigidos hacia la espalda o el flanco del ratón intruso.Después de cinco minutos, retire al ratón negro seis y revíselo en busca de heridas. Luego coloque al ratón negro seis en el compartimento opuesto al del mismo ratón ICR hasta el siguiente día de prueba. De este modo, el ratón negro seis seguirá pudiendo ver, oír y oler al ratón ICR para experimentar un estrés acumulativo durante las 24 horas.Al segundo día después de tomar las mediciones de peso, introduzca cada ratón black six en un territorio diferente de ratón ICR. Tras el primer ataque, permita que los ratones interactúen durante cuatro minutos y medio. Tome las mismas mediciones que el día uno.Después de la interacción, revise la presencia de heridas en el ratón negro seis. Devuélvalo a la misma jaula, pero al lado opuesto del ratón agresivo. Esto cada día consecutivo de prueba.Reduzca el tiempo de interacción entre los ratones en 30 segundos durante la última sesión. El tiempo de interacción es únicamente de 30 segundos después del primer ataque. Si en cualquier día, tras cinco minutos, un ratón ICR no realiza un ataque, retírelo del estudio y sustitúyalo por uno de repuesto.Introduzca el ratón black six a ese ratón sobrante en la misma prueba el día de hoy por la mañana del día 11, realice una prueba con todos los ratones black six en un campo abierto media hora antes de que comience. Coloque las jaulas del ratón black six control y del ratón black six sujeto en un estante bajo menos de una llave de iluminación; la iluminación de la habitación debe ser de aproximadamente 20 llaves cerca de la arena. Mantenga un solo ratón ICR agresivo no familiar.Comience el ensayo colocando un ratón negro seis en una caja de campo abierto con una caja de interacción vacía durante dos minutos y medio. El comportamiento debe ser monitoreado por un sistema automatizado. Después de dos minutos y medio, regrese el ratón negro seis a su jaula de alojamiento y coloque el ratón ICR en la caja de interacción dentro del campo abierto.Este ratón es el objetivo y representa el punto central de la zona objetivo en el campo abierto. A continuación, reintroduzca el ratón negro seis al campo abierto junto con el objetivo durante dos minutos y medio. Una vez finalizada la prueba, regrese ambos ratones a sus jaulas de origen y limpie la arena del campo abierto.Continúe proporcionando a cada ratón negro seis esta experiencia posteriormente. Determine el tiempo que los ratones negros seis pasan en cada zona de interacción y en las zonas de esquina a partir de estos valores. Calcule la puntuación de interacción social utilizando el protocolo descrito.Los ataques se puntuaron durante un período de 10 días. Hubo una variabilidad considerable al principio, pero esto condujo a la consistencia. Los ratones tuvieron menos tiempo para interactuar cada día.Por lo tanto, la tendencia descendente. El número promedio de mordeduras de ataque recibidas disminuyó gradualmente con el tiempo porque la duración del contacto físico disminuyó de cinco minutos a 30 segundos. Los ratones estresados parecieron ganar más peso durante los 10 días que los ratones control.No hubo mucha diferencia en el consumo de alimento. Sin embargo, los ratones estresados consumieron el doble del volumen de agua, y esto fue bastante significativo en la prueba de interacción social realizada después del régimen de estrés de 10 días. Hubo una diferencia significativa entre los ratones control y los estresados, como cabría esperar.Los ratones de control fueron mucho más exploradores cuando el ratón objetivo estaba presente. El uso del modelo de estrés social subcrónico en ratones es ventajoso porque estos ratones modelo pueden ayudarnos a comprender mejor el mecanismo subyacente al aumento de peso inducido por el estrés, así como a la polidipsia y la hiperfagia, síntomas característicos.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

El protocolo de estrés crónico leve impredecible (UCMS) es un método validado para estudiar los cambios conductuales y fisiológicos asociados con el estrés crónico y los síntomas depresivos. Ocho semanas de imposición del protocolo UCMS induce cambios de comportamiento y malos resultados de salud en roedores de ambos sexos.

Un protocolo de estrés leve crónico impredecible para los síntomas depresivos, instigar cambios de comportamiento y los resultados de salud negativos en los roedores

Aquí presentamos el protocolo de estrés leve crónico impredecible en ratones. Este protocolo induce un depresivo-como el fenotipo a largo plazo y permite evaluar la eficacia de los antidepresivos putativos en la reversión de los déficits depresivos-como comportamiento y neuromolecular.

El protocolo de estrés leve crónico impredecible para inducir la Anhedonia en ratones

La tarea de barrera del laberinto Y es una prueba de comportamiento que examina la motivación para gastar esfuerzo para recompensar. Aquí, discutimos la prueba de múltiples factores de estrés crónicos bien validados, incluyendo la corticosterona crónica y el estrés de derrota social con este comportamiento, así como el nuevo estrés crónico crónico de la derrota social no discriminatorio (CNSDS), que es eficaz en las mujeres.

El estrés crónico cambia el comportamiento de la elección relacionada con el esfuerzo en una tarea de barrera del laberinto Y en ratones

Aquí se presenta un modelo de ratón de ansiedad inducida por aislamiento social (SI) que utiliza ratones salvajes tipo C56BL / 6J para inducir estrés y comportamiento similar a la ansiedad con un manejo mínimo y sin procedimientos invasivos. Este modelo refleja los patrones de vida modernos de aislamiento social y es ideal para estudiar la ansiedad y los trastornos relacionados.

Modelo de aislamiento social: un modelo no invasivo de estrés y ansiedad para roedores

La prueba de seguridad y amenaza social permite una evaluación simultánea del desarrollo de la evitación social como una medida del aprendizaje condicionado aversivo y la capacidad de discriminación de la seguridad y la amenaza social, ambas utilizadas para identificar individuos susceptibles al estrés y resistentes al estrés dentro de un solo grupo de ratones machos crónicamente derrotados socialmente.

Una prueba de seguridad y amenaza social descubre fenotipos relacionados con el estrés psicosocial

Desarrollamos un modelo de estrés de derrota social acelerado para ratones C57BL/6 adolescentes, que funciona tanto en machos como en hembras y permite la exposición durante períodos discretos de la adolescencia. La exposición a este modelo induce la evitación social, pero solo en un subconjunto de ratones machos y hembras derrotados.

Modelo de Estrés de Derrota Social para Ratones Adolescentes C57BL/6 Machos y Mujeres

Este protocolo detalla cómo realizar el estrés de derrota social crónica de 10 días en ratones machos adolescentes tempranos para producir una evitación social duradera en la edad adulta en más del 60% de los ratones.

Estrés crónico de derrota social en ratones machos adolescentes tempranos

Mediante la integración de cuatro estresores sociales diarios, el presente estudio describe un modelo de estrés social integrado múltiple (MISS) para trastornos psiquiátricos en ratones hembra C57BL/6J. Después de diez días de exposición repetida a MISS, los ratones desarrollaron fenotipos depresivos y similares a la ansiedad, proporcionando así un modelo animal natural basado en la etiología para estudiar los trastornos psiquiátricos en sujetos femeninos.

Un modelo de estrés social integrado múltiple para trastornos psiquiátricos en ratones hembra C57BL/6J

Este video muestra el paradigma residente-intruso en ratas. Esta prueba es un método estandarizado para medir la agresión ofensiva, conducta defensiva y la violencia en un ambiente semi-natural. El uso del paradigma de estrés experimentos sociales se explica así.

El Paradigma Residente intruso: una prueba estandarizada para la agresión, la violencia y el estrés social

En este artículo se describe el uso de residente intruso estrés social crónico como paradigma etológico relevante para la depresión posparto modelo y la ansiedad en roedores lactantes.

Usando estrés social crónico de Modelo depresión posparto en vacas roedores

Aprende a establecer un modelo de estrés por derrota social subcrónica y leve en ratones para estudiar mecanismos de síntomas inducidos por estrés. Este método permite investigar cambios conductuales y fisiológicos relacionados con la depresión.

Un modelo de ratón de subcrónica y leve estrés Derrota Social para Entender déficits conductuales y fisiológicos inducidos por el estrés (Video) | JoVE Journal

Un modelo de ratón de subcrónica y leve estrés Derrota Social para Entender déficits conductuales y fisiológicos inducidos por el estrés

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