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DOI: 10.3791/53059-v
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This article discusses the use of enzymatic microelectrode biosensors for real-time measurement of extracellular cell signaling. The protocols outlined extend the application of these biosensors to detect ATP and hydrogen peroxide in kidney tissues.
Los biosensores de microelectrodos enzimáticos permiten mediciones en tiempo real de la señalización de células extracelulares en concentraciones biológicamente relevantes. Los siguientes protocolos amplían las aplicaciones de los biosensores a la detección ex vivo e in vivo de ATP yH2O2en el riñón.
El objetivo general de estos procedimientos es medir en tiempo real las concentraciones intersticiales endógenas de un TP y peróxido de hidrógeno en riñones completos. Esto se logra primero rehidratando y calibrando los sensores para aplicaciones ex vivo e in vivo a concentraciones conocidas de un TP y peróxido de hidrógeno. Para la instalación del sensor ex vivo, el riñón se instrumentó quirúrgicamente y se limpió de la sangre.
Este procedimiento se realiza enjuagando el riñón a través de la aorta. Luego, el riñón de rata se aísla quirúrgicamente, se coloca en una cámara de registro y se perfunde con solución salina. El TP y el peróxido de hidrógeno se miden utilizando sensores ex vivo para el procedimiento in vivo.
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