Humano vasto externo Esquelético biopsia muscular utilizando el Weil-Blakesley Conchotome

El objetivo general de este método es introducir una técnica segura, eficaz y bien tolerada de biopsia muscular del vasto lateral, con el fin de obtener tejido suficiente para la histoquímica y el análisis molecular tanto en estudios de diagnóstico como de investigación. Este método puede ayudar a los investigadores a obtener suficiente tejido muscular con un mínimo de molestias y traumatismos para el participante. La principal ventaja de esta técnica es que es segura y aceptable tanto en el ámbito clínico como en el de investigación.

Las complicaciones son bajas y las molestias se mantienen al mínimo cuando el procedimiento se realiza con una técnica estándar. Para comenzar, pida al participante que se acueste cómodamente en un sofá en posición supina. Exponga el muslo preferido del pliegue de la ingle y extienda una lámina absorbente desechable debajo del muslo expuesto.

Asegúrese de que la pierna permanezca recta y relajada durante todo el procedimiento, pero el muslo se tense momentáneamente para delinear el vasto lateral. Marque el sitio del procedimiento aproximadamente 2/3 hacia abajo en una línea imaginaria desde la espina ilíaca anterosuperior hasta la rótula. Para preparar la piel, use una cuchilla de afeitar estéril para afeitar aproximadamente cuatro centímetros de diámetro alrededor del sitio de la biopsia propuesto, en hombres, si es necesario.

Use un hisopo con alcohol para limpiar la piel. Use un anestésico local para infiltrar la piel y la fascia suprayacente, luego, con una aguja de calibre 25, levante una ampolla subcutánea de 2% de lidocaína. A continuación, utilice una aguja de calibre 23 para infiltrarse más profundamente en el tejido subcutáneo, con el objetivo de penetrar al menos 1/2 pulgada, dependiendo del contenido subcutáneo en el sitio de la biopsia.

Espere de dos a cinco minutos para que la anestesia actúe y confirme la anestesia usando una aguja o la punta de la hoja de un bisturí para sondear suavemente la piel. Para preparar un campo estéril, lávese las manos con agua y jabón, y mantenga las manos limpias hasta que se use una bata estéril. Cubra las manos con guantes estériles antes de crear un campo estéril en el carro de procedimientos.

Con una solución de alcohol isopropílico de clorhexidina al 2%, o un desinfectante cutáneo a base de yodo, esterilice el sitio de la biopsia. Aplique un paño estéril con una abertura adhesiva para exponer el sitio de la biopsia y mantener un campo estéril. El primer paso crítico es perforar la piel y hacer una pista lo suficientemente profunda dentro y más allá de la fascia.

Para realizar el procedimiento de biopsia, con un bisturí de tamaño 11, haga una incisión de cinco a 10 milímetros en la piel y a través de la fascia suprayacente. Mientras sostiene y sostiene el muslo que rodea el sitio de la biopsia, inserte la punta de mordida cerrada del concótomo a través de la incisión, en ángulo recto con el eje largo del fémur, aproximadamente de 1/2 a una pulgada de profundidad. A continuación, gire el conchotome de 90 a 180 grados para cortar el músculo, luego retire el conchotome y abra la punta sobre una gasa estéril humedecida con solución salina normal estéril.

Transfiera la gasa a un recipiente colocado sobre hielo. El segundo paso crítico es insertar el conchotome dentro de la pista, para maniobrar el conchotome y asegurarse de que se ha obtenido suficiente músculo. Si es necesario, el procedimiento se puede repetir dentro de la pista y en el sitio de una sola herida para obtener suficiente tejido muscular.

Después del procedimiento, aplique presión directa sobre la herida durante un máximo de cinco minutos. A continuación, coloque tiras estériles paralelas a la herida para cerrarla. Coloque un apósito absorbente estéril en las Steri-Strips y aplique un vendaje de dos capas para la compresión, usando cinta adhesiva para asegurar.

Explique el método de vendaje de la herida al participante para que lo realice tres o cuatro días después del procedimiento. Indique al participante que se quite el vendaje compresivo antes de acostarse más tarde esa noche. Explique que es común experimentar cierta rigidez en el muslo, que puede aliviarse con ejercicio suave, como caminar.

Explique que pueden usar acetaminofén para el dolor. Como se muestra en esta tabla, en el estudio de sarcopenia de Hertfordshire, la puntuación del dolor se mide utilizando la Escala Analógica Visual de dolor de cero milímetros para la ausencia de dolor, a 100 milímetros para el dolor tan fuerte como puede ser, típicamente bajo, con una mediana de siete milímetros durante el procedimiento, y cuatro milímetros un día después del procedimiento. Esto sugiere que los sujetos de este estudio de investigación encontraron el procedimiento mínimamente doloroso.

Aquí se muestran muestras de tejido representativo obtenidas a través de una biopsia muscular percutánea con el conchotoma de Weil-Blakesley. Las muestras obtenidas deben parecerse al tejido muscular de este panel. Sin embargo, existe una alta probabilidad de obtener tejido graso subcutáneo, como se observa en este panel.

Esta figura muestra una sección transversal en serie con tinción de fibra diferencial. Las fibras teñidas oscuramente representan fibras rápidas de tipo dos detectadas con un anticuerpo anti-miosina rápido. Una vez dominada, esta técnica se puede realizar en 20 minutos, si se realiza correctamente.

Al intentar este procedimiento, es importante recordar mantener un campo estéril y mantener al participante comprometido. Después de este procedimiento, se pueden realizar otros métodos como la histoquímica y la extracción de ADN o ARN, y todo eso responderá preguntas adicionales, como ¿cuáles son los cambios celulares y moleculares que ocurren en el músculo envejecido? Después de su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la biología muscular y el envejecimiento exploraran los cambios en el tejido muscular con sarcopenia, la disminución de la masa muscular y la función relacionada con la edad.

Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo realizar una biopsia muscular del vasto lateral, utilizando el conchotome de Weil-Blakesley, un procedimiento simple, efectivo y bien tolerado. No olvide que trabajar con agujas e instrumentos afilados puede ser peligroso, y siempre se deben mantener las precauciones de seguridad estándar, así como una asepsia estricta mientras se realiza este procedimiento.