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DOI: 10.3791/53250-v
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Este protocolo describe el uso de preparaciones de tejido intestinal extirpado o "sacos intestinales" como modelo ex vivo de la función de barrera intestinal. Este modelo se puede utilizar para evaluar la integridad tanto de la barrera epitelial como de la capa de gel mucoso en sitios intestinales específicos en modelos animales de enfermedad digestiva.
El objetivo general de este procedimiento es evaluar la integridad intestinal localizada en modelos animales de enfermedad gastrointestinal. Este método puede ayudar a responder preguntas clave sobre la enfermedad gastrointestinal, como si se pierde la integridad muscular o si hay un aumento en la absorción de una molécula o bacteria específica durante la enfermedad. La principal ventaja de esta técnica es que se puede utilizar para evaluar áreas específicas dentro del tracto gastrointestinal. Para preparar el tracto gastrointestinal, comience rociando el abdomen y el tórax del ratón con etanol al 70 por ciento y use tijeras para hacer una incisión horizontal en el medio del abdomen, para exponer el peritoneo. A continuación, corte la parte superior del intestino delgado del estómago en el esfínter pilórico y el intestino grueso en el borde anal. A continuación, utilice fórceps para extraer suavemente el mesenterio y coloque el tracto intestinal en un medio oxiginado precalentado. Identifique el área que se evaluará para determinar la permeabilidad, midiendo las secciones del duodeno y el yeyuno en relación con el estómago en las secciones del colon y el ilion en relación con el ciego para mantener la consistencia entre los animales de experimentación. Nótese la presencia de tejidos linfoides asociados a la mucosa, como las placas de Peyer, que pueden identificarse como pequeños nódulos en el lado sarosal de la luz. A continuación, corte la sección seleccionada y utilice una jeringa de 1 ml para enjuagar suavemente el contenido lumenal del segmento en una placa de Petri que contenga 37
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