Largo Plazo La cateterización de la linfa intestinal Tronco y colección de linfa en cerdos neonatales

El cateterismo linfático es una técnica importante que se utiliza para investigar los mecanismos implicados en el metabolismo de los lípidos y los fármacos, la metástasis del cáncer y la función inmunitaria, y la recogida de grandes cantidades de linfa de varios modelos animales permite a los investigadores estudiar estos procesos. El video muestra en detalle el procedimiento quirúrgico empleado para cateterizar el tronco linfático intestinal en cerdos neonatos utilizando un abordaje de línea media ventral. Todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Alberta.

Para acceder al vaso linfático se abrió la cavidad abdominal. Se utilizó electrocauterio en la configuración de corte para abrir la capa muscular. Se colocó un retractor para mantener abierta la pared abdominal durante todo el procedimiento.

Se identifican los órganos abdominales clave para ayudar a localizar el vaso linfático. Para mejorar el acceso a los vasos linfáticos, los segmentos del intestino delgado y el colon se exteriorizan hacia el lado izquierdo del cuerpo. El vaso linfático se marca identificando el hígado y el segmento ventral derecho de la vena porta.

En los cerdos recién nacidos, los vasos linfáticos son delicados y se desgarran fácilmente, por lo que se requiere una disección meticulosa con hisopos e instrumentos contundentes. Aquí se encuentra el vaso linfático intestinal. Ahora la sutura se pasa por debajo del vaso linfático con pinzas romas.

Ahora hay tres suturas de seda 2-0 que se pasan por debajo del vaso linfático. La sutura caudal se utiliza para dilatar el vaso y asegurar el catéter al vaso. Las suturas craneales se utilizan para asegurar el catéter dentro del vaso.

Una pequeña incisión en el vaso linfático permite que unas pinzas romas dilaten el vaso. El catéter se inserta en el vaso. Esto debe hacerse con cuidado para garantizar que el vaso linfático no se desgarre.

El catéter debe avanzar más allá de la sutura más craneal para garantizar que esté bien asentado. Las tres suturas de seda 2-0 aseguran el catéter en el vaso linfático. Es importante destacar que las dos suturas craneales se utilizan primero para asegurar el catéter en el vaso y la sutura más caudal se utiliza para atar el catéter, lo que añade estabilidad.

Es importante asegurarse de que haya un buen flujo linfático antes de cerrar la cavidad abdominal. El catéter se exterioriza en el flanco medio izquierdo del cerdo. Se utilizan pinzas grandes para tirar del catéter desde la cavidad abdominal hasta la superficie externa del flanco del cerdo.

Las capas musculares se cierran con una sutura de vicryl 2-0 en una aguja cónica en un patrón de sutura interrumpido simple. La piel se cierra con una sutura de vicryl 2-0 en una aguja de corte en un patrón de sutura subcuticular continuo. Con la incisión de salida, el catéter pasa a través de la piel y se cierra con una sutura de nailon 2-0 en una aguja de corte en un patrón de sutura de cuerda de bolsa.

Este cierre ayuda a prevenir infecciones ascendentes que se desplazan hacia adentro a lo largo del catéter. La chaqueta que contiene los frascos de recolección de linfa se coloca sobre el cerdo mientras el cerdo aún está bajo anestesia. El catéter se inserta en el frasco de recolección y se asegura un buen flujo linfático antes de despertar al cerdo.

Los cerdos se recuperan bien del procedimiento y se mantiene un excelente flujo linfático durante todo el experimento. La tabla muestra los componentes de la linfa recolectados del vaso linfático. Estos componentes incluyen la apolipoproteína B48, los triglicéridos y el colesterol.

La figura del Western Blot muestra la presencia de apolipoproteína B48 y pequeñas cantidades de apolipoproteína B100 derivada del plasma dentro de la muestra linfática recolectada. Aunque el cateterismo linfático en cerdos jóvenes puede ser técnicamente desafiante, ya que los vasos linfáticos son delicados y friables, este video demuestra que el uso de una técnica quirúrgica adecuada y cuidadosa en cerdos jóvenes puede proporcionar a los investigadores un modelo excelente para recolectar linfa intestinal.