Name: Largo Plazo La cateterización de la linfa intestinal Tronco y colección de linfa en cerdos neonatales (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 25 s
Description: Aprenda la cateterización del tronco linfático intestinal en cerdos neonatales mediante abordaje ventral. Esta técnica quirúrgica permite recolectar linfa para investigar el metabolismo lipídico y farmacológico.

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El trabajo fue financiado en parte por la financiación de la Agencia de Ganadería y Carne de Alberta y la subvención Discovery del Consejo de Investigación y Ciencias Naturales a S. D. Proctor.

Todos los procedimientos descritos en animales de experimentación, tanto en el video y el manuscrito fueron aprobados por el Comité de Cuidado y Uso de Animales institucional y siguieron las directrices establecidas por el Consejo Canadiense de Cuidado de Animales. 1. La anestesia quirúrgica y la preparación quirúrgica de los cerdos recién nacidos <ol><li> En una antesala separada, premedicar 25 kg cerdos cerca de la base del cuello con un cóctel de fármacos sedantes anestesia intramuscular que contiene: azaperona (0,3 mg / kg), clorhidrato de ketamina (10 mg / kg), la dexmedetomidina (15 mg / kg). Nota: Añadir buprenorfina (0,005-0,02 mg / kg) en el cóctel de fármacos preanestésica para un mejor control del dolor intraoperatorio. </li><li> Anestesiar a los cerdos con la inhalación de gas isoflurano inhalado (4-5% de isoflurano en 500 ml-1000 ml / min de O2) usando una máscara facial. Visualizar las cuerdas vocales de la laringe usando un alcance de veterinaria (17-25 cm de longitud hoja recta), y aplicar un 10% de esterilización tópica de lidocaína al vocalcuerdas. Dejar que la lidocaína en aerosol para contactar las cuerdas vocales 30 a 60 seg antes de la intubación para reducir la posibilidad de espasmo de las cuerdas vocales y la obstrucción de las vías respiratorias. </li><li> Intubate los cerdos pasando un tubo endotraqueal con balón (5,0 a 7,0 mm de diámetro interno (ID)) entre las cuerdas vocales y mantener la anestesia con gas isoflurano (0,5 a 2,0% de isoflurano en 1.000-2.000 ml / min O 2) utilizando un cerrado circuito de respiración del aire exhalado sistema de anestesia durante la cirugía. Evaluar el nivel de anestesia por el tono de la mandíbula, y las dos respuestas reflejas del pedal y palpebrales. gas anestésico espirado se compactarse y ventilado fuera de la sala de cirugía. </li><li> Limpiar la superficie exterior de la oreja con una solución de lavado quirúrgico 2,0% de clorhexidina seguido de un enjuague con alcohol isopropílico al 70%. Con un catéter intravenoso 20 G, sondar una vena de la oreja para proporcionar líquidos por vía intravenosa (solución de Ringer lactato; 5-10 ml / kg / h) durante la cirugía. Asegurar un oxímetro de pulso a la superficie mucosa de la lengua con medcinta de iCal para monitorear el ritmo cardíaco y la saturación de oxigenación de la sangre periférica (SpO2). </li><li> Coloque el cerdo anestesiado en una posición de decúbito dorsal y afeitar el abdomen ventral desde la mitad del tórax caudalmente a la cara ventral del pubis. Limpiar esta área con dos alternando 2,0% de clorhexidina lavados quirúrgicos y lavados con agua estéril. </li><li> Transferir el cerdo anestesiado a la sala de cirugía y aplicar el lavado quirúrgico final de 70% de enjuague alcohol isopropílico, deje que se seque, y luego cubrir el animal. </li><li> Inserte una sonda de temperatura rectal aproximadamente 2-4 cm en el recto para controlar la temperatura del cuerpo. Coloque los cerdos de una almohadilla eléctrica de recirculación de agua para mantener la temperatura corporal normal (38-40 ° C) durante el procedimiento quirúrgico. </li><li> Coloque el cerdo con cuatro cortinas toallas colocadas en un patrón cuadrante suprayacente alrededor del abdomen. Coloque la primera cortina a través de xiphisternum, la segunda cortina a lo largo de la cara lateral de abdomen aproximadamente 5 cm lateral a la línea media abdominal. Coloque la tercera cubrir a través de la cresta ileal de la pelvis y el cuarto cortina, como el segundo paño (aunque en el lado opuesto), se coloca a lo largo de la cara lateral del abdomen aproximadamente 5 cm lateral a la línea media abdominal. </li><li> Coloque un paño de mesa, con una abertura de ranura que permite el acceso a la zona quirúrgica, a través de las cortinas de toallas subyacentes y cubrir el cerdo y toda mesa de operaciones. La caída final es un Steri-paño desechable colocado sobre la mesa de cortina grande. </li></ol> 2. Cirugía abdominal y la cateterización de la linfático intestinal Tronco <ol><li> Hacer una incisión en la piel 20 cm con una cuchilla de escalpelo para exponer los músculos abdominales subyacentes. Incisión en las capas musculares abdominales con electrocauterio monopolar (20 ajuste de vatios) para exponer el peritoneo parietal. Abrir un segmento lineal de 20 cm de peritoneo parietal con tijeras Metzenbaum para acceder a las vísceras abdominales y vasos linfáticos. </li><li&gt; Coloque un retractor en el aspecto craneal de la incisión quirúrgica para mantener la cavidad abdominal abierta para la duración de la cirugía. </li><li> Humedecer todos los tejidos con agua caliente (37 ° C) solución salina estéril durante todo el procedimiento quirúrgico. Levante suavemente un gran segmento de intestino incluyendo el colon, intestino ciego, íleon y el yeyuno de la cavidad abdominal y exteriorizar que el flanco izquierdo del cerdo para acceder a la parte superior del abdomen, el hígado y vasos linfáticos. Asegurar el intestino exteriorizado en posición con cortinas de toallas adicionales para formar un cabestrillo para apoyar suavemente el intestino. </li><li> Localizar el vaso linfático, que establece unos 4 cm craneal-medial de la vena renal derecha, 6 cm ventral caudal-medial- de los capataces cava y por debajo de la cara visceral del lóbulo hepático derecho, cerca del páncreas 22,36,37. Identificar el vaso linfático como una estructura translúcida yuxtapuesto al segmento ventral derecha de la vena portal 36,37. </li><li> Se separa la Vess linfáticoel de la fascia que rodean por las burlas suavemente el tejido adjunto con aplicadores Q-tip. Una vez que las caras laterales de recipiente se separan del tejido circundante, crear una abertura &quot;túnel&quot; bajo el buque con finas punta roma fórceps. </li><li> Pasar tres suturas de seda 2-0 debajo del vaso linfático con unas pinzas finas. Ligar la sutura más caudal primero para ocluir, dilatar y llenar el recipiente con la linfa. A propósito dejar los extremos de este hilo de sutura relativamente largo (4 cm) para asegurar el catéter al vaso linfático. Colocan otros dos suturas separadas 1,0 cm entre sí y son aproximadamente 1,0-1,5 cm craneales a la sutura caudal garantizado. Deje estas dos suturas con una &#39;sola lazo de ligadura floja&#39; para permitir la obtención más rápida del catéter en el vaso. Nota: El segmento del vaso linfático situado entre la sutura de ligadura más caudal y la sutura media (de las dos suturas craneales) es el sitio para la cateterización. En cuanto a sutura de material, 2-0 poliglactina de sutura puede sustituir a 2-0 suturas de seda, si es necesario. </li><li> Corte un pequeño agujero en el vaso con tijeras iris y dilatar el vaso con unas pinzas finas romos. Inserto de aproximadamente 1,0 a 1,5 cm de tubo de catéter especializado (4,06 Diámetro exterior (OD) X 2,31 mm ID) con un extremo biselado en el recipiente y atar los dos suturas craneales para asegurar el catéter en su lugar. Usa los extremos de la sutura largos de la sutura caudal para asegurar el catéter al vaso. </li><li> Lavar el intestino exteriorizado con cantidades copiosas de solución salina tibia y suavemente volver a la cavidad abdominal asegurar el posicionamiento anatómica correcta del intestino. </li><li> Exteriorizar el catéter en la mitad del flanco izquierdo (5-10 cm ventral desde la fosa paralumbar). Hacer una incisión en la piel con un bisturí y pasar un trocar de la cavidad abdominal a la superficie de la piel para crear una abertura para la exteriorización del catéter. Utilizar una gran pinza de Kelly para exteriorizar el catéter del cav abdominaldad a través del orificio de un trócar. </li><li> Cerrar el peritoneo parietal con un simple patrón de sutura continua de 2-0 sutura de poliglactina con una aguja redonda (cónica). Cierre las capas musculares abdominales con un simple patrón de sutura interrumpida con una sutura de poliglactina 2-0 en una aguja redonda. </li><li> Cerrar la piel en un patrón subcuticular con 2-0 sutura de poliglactina en una aguja de corte. Asegurar el catéter exteriorizada a la piel con un patrón de sutura en bolsa de tabaco y una sutura 2-0 nylon en una aguja de corte. </li><li> Colocar una chaqueta especializado en el cerdo mientras que todavía anestesiado para facilitar su colocación y reducir el estrés del cerdo durante la recuperación. </li></ol> 3. La recuperación post-quirúrgica y la linfa Colección <ol><li> Aproximadamente 10 minutos antes de la interrupción de la anestesia de inhalación, administrar bupenorphine (0,1 mg / kg) por vía intramuscular para proporcionar analgesia inmediata post-cirugía. Continuar bupenorphine (0,1 mg / kg) cada 12 h durante 24-48 horas para manteneranalgesia post-cirugía. </li><li> Monitorear los cerdos de complicaciones post-quirúrgicas cada 8-12 h durante un período de 7 días. </li><li> Recoger la linfa en botellas de 500 ml de lavado de polipropileno, revestidos con ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), y suplementado con antibióticos; penicilina (6.000 UI), estreptomicina (6 mg) y anfotericina B (3 mg) cada 12 horas durante un período de 7 días. </li></ol> 4. Cuantificación de lipoproteína APOB48, triglicéridos, colesterol y proteínas totales Recogidos de linfa <ol><li> Centrifugar la muestra de la linfa a 1.800 xg durante 5 min a 4 ° C. Recoger el sobrenadante y utilizarla para la cuantificación de triglicéridos, colesterol y proteínas totales. </li><li> Divida el sobrenadante en tres muestras: una muestra no diluida, un 1:20 de agua destilada muestra diluida y una muestra final se diluyó 1: 100 con agua destilada. </li><li> Usar el sobrenadante sin diluir para medir niveles de colesterol, con un kit disponible en el mercado. </li><li> Utilice la 1:20 y 1:100 muestras diluidas para medir niveles de triglicéridos y de proteína total con un kit disponible en el mercado y el ensayo de ácido bicinconínico total de proteína, respectivamente. </li></ol> 5. La cuantificación de la lipoproteína APOB48, recopilada a partir de nódulos 38 <ol><li> Determinar la concentración de lipoproteínas de APOB48 con un método de Western Blotting inmune adaptado 38. linfático total de separada con 3-8% de sodio dodecil electroforesis en gel de poliacrilamida con tris-etilo-(SDS-PAGE). </li><li> Transferir las proteínas separadas a una membrana de fluoruro de polivinilideno (0,45 micras) y se incuba con un anticuerpo policlonal de cabra a la ApoB (1: 4.000), y luego se unen con un anticuerpo secundario anti-cabra. </li><li> Cuantificar la lipoproteína APOB48 con quimioluminiscencia utilizando una comparación densitométrica lineal con el estándar de proteína APOB48 roedor purificada. </li></ol>

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</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Recogida linfático intestinal es un excelente método para investigar los mecanismos que participan en los lípidos 8-12 y 13-15 de drogas metabolismo, metástasis de cáncer de 16,17, el tráfico de células y la función inmune 18-26, en varios modelos animales experimentales. De hecho, la capacidad para cosechar grandes cantidades de cualquiera periférica (aferente) y central (eferente y los grandes vasos del tronco) linfático durante un período prolongado ha sido especialmente im...

El sistema linfático es un área poco estudiada de la fisiología. Los modelos preclínicos de cateterismo linfático se producen en diferentes especies animales 1-8 y son utilizados por las industrias farmacéuticas e instituciones de investigación para investigar los mecanismos implicados en lípidos y metabolismo de los fármacos 8-12 13-15, 16 metástasis del cáncer con el tratamiento experimental de 17, 18 y la función inmune -26. Este estudio explora el uso de cateterismo intestinal linfático tronco en un modelo de cerdo doméstico para medir los componentes del metabolismo de las lipoproteínas. metabolismo de las lipoproteínas está implicada en la producción y secreción de quilomicrones, así como cambios en los lípidos asociados y proteína total. Estas consideraciones son importantes, ya que hay grandes diferencias en el metabolismo de los lípidos entre los modelos de roedores y humanos utilizados habitualmente y, como tal, empleando modelos porcinos para recoger la linfa intestinal podría proporcionar información comparable para el estudio de lípidos mímetabo- en las personas 27-31. Varias técnicas quirúrgicas se utilizan para recoger la linfa intestinal en grandes especies animales: un enfoque hombro craneal (es decir, torácica cateterización del conducto) 5, una aproximación lateral flanco superior 32-34, y una línea media ventral o enfoque paramedian 22,35. Este video describe en detalle el procedimiento quirúrgico en los cerdos utilizando un enfoque quirúrgico línea media ventral para la cateterización del tronco linfático intestinal. Cuidadosas permisos técnica quirúrgica este método de cateterismo linfático para recoger grandes cantidades de la linfa y de sus componentes durante períodos prolongados de tiempo. Esta técnica abre una gran variedad de aplicaciones en muchas disciplinas que examinan diversas funciones fisiológicas. Las aplicaciones podrían incluir, pero no se limitan a, las lipoproteínas de todo el cuerpo y el metabolismo de los lípidos, la inmunovigilancia, génesis tumoral y la metástasis, la función intestinal, y la DESARROLLOent y la progresión de la enfermedad inflamatoria intestinal.

<table><tbody><tr><td>Hoja de laringoscopio Miller</td><td>Welch Allyn</td><td>68044</td><td>182 mm de longitud</td></tr><tr><td>Surgivet advisor: Monitor de constantes vitales</td><td>Surgivet</td><td>V9203</td><td></td></tr><tr><td>Sonda de temperatura rectal</td><td>Surgivet</td><td>V3417</td><td></td></tr><tr><td>Generador de electrocirugía monopolar</td><td>Valley Lab</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tijeras Metzenbaum</td><td>Fine Science</td><td>14518-18</td><td></td></tr><tr><td>Retractor Tuffier</td><td>Stevens</td><td>162-11-676</td><td></td></tr><tr><td>Pinza</td> para <td>mosquitos Stevens</td><td>162-7-10</td><td></td></tr><tr><td>Pinza Kelly curva (14cm)</td><td>Stevens</td><td>162-7-38</td><td></td></tr><tr><td>Pinza de tejido Allis</td><td>Stevens</td><td>162-7-38</td><td></td></tr><tr><td>Pinza de ojo (10,2cm)</td><td>Stevens</td><td>162-18-780</td><td></td></tr><tr><td>Apósito para pinzas-Adison (12,1cm)</td><td>Stevens</td><td>162-17-2510</td><td></td></tr><tr><td>Destornilladores de aguja</td><td>Stevens</td><td>162-V98-42</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de iris</td><td>Fine science</td><td>14058-11</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de circulación de agua</td><td>Jorvet</td><td>J-783X</td><td></td></tr><tr><td>Maxitherm-Manta de vinilo</td><td>Jorvet</td><td>J-784C</td><td></td></tr><tr><td>Aplicadores de punta</td><td>Q Fisher Scientific</td><td>22-037-960</td><td></td></tr><tr><td>Cateterismo&nbsp; tubos (4,06 OD X 2,31 ID)</td><td>Braintree Scientific Inc.</td><td>MRE-160</td><td>Tubo de implantación de micro-renetano</td></tr><tr><td>2-0 sutura de seda</td><td>Ethicon</td><td>LA556</td><td></td></tr><tr><td>2-0 sutura de poliglactina</td><td>Ethicon</td><td>J443H</td><td>2-0 vicryl</td></tr><tr><td>Chaqueta para animales grandes</td><td>Lomir Biomedical Inc.</td><td>SSJ2YC</td><td></td></tr><tr><td>Botellas de polipropileno</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-409-22C</td><td>500 ml</td></tr><tr><td>Penicilina-Estreptomicina</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D4333</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Sigma Aldrich</td><td>60-00-4</td><td></td></tr><tr><td>Anfotericina B</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A2411</td><td></td></tr><tr><td>Azaperona</td><td>Elanco Salud Animal</td><td></td><td>Stresnil</td></tr><tr><td>Clorhidrato de dexmedetomidina</td>, <td>Zoetis</td><td>6295</td>, <td>Dexdomitor</td></tr><tr><td>Isoflurano,</td><td>Abbott Animal&nbsp; Salud</td><td>05260-5</td><td></td></tr><tr><td>Clorhidrato de ketamina</td> IsoFlo <td>Zoetis</td><td>2626</td><td>Ketaset</td></tr><tr><td>Clorhidrato de bupenorfina</td><td>Champion Alstoe Animal Health</td><td></td><td>DIN:02347510</td></tr><tr><td>Tubo endotraqueal de 6 mm</td><td>Jorvet</td><td>J-165d</td><td></td></tr><tr><td>10% Lidocaína spray</td><td>AstraZeneca</td><td></td><td>DIN:02003767</td></tr><tr><td>4 % Exfoliante</td> <td>quirúrgico de clorhexidinaPartnar Animal Health</td><td>PCH-011</td><td>Diluido: Solución al 2,0%</td></tr><tr><td>3M Steri- paño</td><td>quirúrgico 3M Health Care</td><td>1040</td><td></td></tr><tr><td>SDS page gel</td><td>Invitrogen EA0375BOX</td><td></td><td>3-8 % acetato de tris</td></tr><tr><td>Membrana de fluoruro de polivinilideno</td><td>Millipore</td><td>IPVH00010</td><td>0,45 &mu; m tamaño de poro</td></tr><tr><td>anticuerpo ApoB &nbsp;</td><td>EMD Millipore</td><td>AB742</td><td>dilución 1:4000</td></tr><tr><td>Burro anti-cabra IgG-HRP</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>Sc-2304</td><td></td></tr><tr><td>ECL Prime Western Blotting Reagent</td><td>GE Healthcare LifeSciences</td><td>RPN2232&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Kit de Triglicéridos</td><td>Wako Pure Chemicals</td><td>998-40391/994-40491</td><td></td></tr><tr><td>Kit de Colesterol Total</td><td>Wako Pure Chemicals</td><td>439-17501</td><td></td></tr><tr><td>Proteína Total</td><td>&nbsp; Perforar &nbsp;</td><td>23225</td><td>Ensayo de ácido bicinconínico</td></tr></tbody></table>

largo plazo la cateterización de la linfa intestinal tronco y colección de linfa en cerdos neonatales

Long-Term Catheterization of the Intestinal Lymph Trunk and Collection of Lymph in Neonatal Pigs

La cateterización del tronco linfático intestinal en cerdos neonatos es una técnica que permite la recolección a largo plazo de grandes cantidades de linfa eferente intestinal (central). Es importante destacar que la recolección de linfa central del intestino permite a los investigadores estudiar tanto los mecanismos como las constituciones lipídicas asociadas con el metabolismo de los lípidos, la inflamación intestinal y la metástasis del cáncer, así como las células involucradas en la función inmune y la inmunovigilancia. Un abordaje quirúrgico ventral de la línea media permite una excelente exposición quirúrgica al abdomen craneal y un acceso relativamente fácil al vaso del tronco linfático intestinal que se encuentra cerca del páncreas y al segmento ventral derecho de la vena porta debajo de la cara visceral del lóbulo hepático derecho. El vaso se disecciona meticulosamente y se libera de la fascia circundante y luego se dilata con suturas que permiten la inserción y posterior fijación del catéter en el vaso. El catéter se exterioriza y se recolecta aproximadamente 1 L/24 horas de linfa durante un período de 7 días. Si bien esta técnica permite la recolección de grandes cantidades de linfa central durante un período prolongado de tiempo, el éxito depende de una disección quirúrgica cuidadosa, el manejo de los tejidos y la atención cercana a la técnica quirúrgica adecuada. Esto es particularmente importante con las cirugías en animales jóvenes, ya que los vasos linfáticos pueden desgarrarse fácilmente, lo que puede provocar un fracaso quirúrgico y experimental. El video muestra una excelente técnica quirúrgica para la recolección de linfa intestinal.

<html> cateterismo linfático del tronco linfático intestinal de cerdos recién nacidos permite colección de aproximadamente 1 l / 24 h de la linfa central sobre un período de 7 días. La linfa recogida en estos experimentos contenía componentes del metabolismo de los lípidos, la proteína es decir, total de la linfa, la lipoproteína de APOB48, triglicéridos, proteínas totales, y el colesterol. La Tabla 1 destaca cantidades representativas de estos componentes lipídicos de muestras ganglios a...

Presentamos un procedimiento quirúrgico para cateterizar el tronco linfático intestinal en cerdos neonatos para recolectar grandes cantidades de componentes del metabolismo lipídico de la linfa eferente.

Largo Plazo La cateterización de la linfa intestinal Tronco y colección de linfa en cerdos neonatales

Catheterization of the intestinal lymph trunk in neonatal pigs is a technique allowing for the long-term collection of large quantities of intestinal ...

La cateterización linfática es una técnica importante utilizada para investigar los mecanismos implicados en el metabolismo de lípidos y fármacos, la metástasis del cáncer y la función inmunitaria, y la recolección de grandes cantidades de linfa de diversos modelos animales, lo que permite a los investigadores estudiar estos procesos. El video demuestra en detalle el procedimiento quirúrgico empleado para cateterizar el tronco linfático intestinal en cerdos neonatos mediante un abordaje ventral en línea media. Todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Alberta.Para acceder al vaso linfático, se abrió la cavidad abdominal. Se utilizó electrocauterio en el modo de corte para abrir la capa muscular. Se colocó un retractor para mantener la pared abdominal abierta durante toda la intervención.Se identifican los órganos abdominales clave para ayudar en la localización del vaso linfático. Para mejorar el acceso, los segmentos del vaso linfático del intestino delgado y del colon se exteriorizan hacia el lado izquierdo del cuerpo. El vaso linfático se identifica como punto de referencia mediante la localización del hígado y del segmento ventral derecho de la vena porta.En los cerdos neonatos, los vasos linfáticos son delicados y se rompen fácilmente, por lo que se requiere una disección minuciosa con torundas e instrumentos romos. Aquí está el vaso linfático intestinal. Ahora se está pasando la sutura por debajo del vaso linfático con pinzas romas.Ahora hay tres suturas de seda 2-0 pasadas por debajo del vaso linfático. La sutura más caudal se utiliza para dilatar el vaso y asegurar el catéter al vaso. Las suturas craneales se utilizan para fijar el catéter dentro del vaso.Una pequeña incisión en el vaso linfático permite que las pinzas romas dilaten el vaso. Se inserta el catéter en el vaso. Esto debe hacerse con suavidad para asegurar que el vaso linfático no se rompa.Es necesario avanzar la cánula más allá de la sutura más craneal para asegurar que quede bien colocada. Tres suturas de seda 2-0 fijan la cánula dentro del vaso linfático. Es importante que primero se utilicen las dos suturas craneales para asegurar la cánula dentro del vaso, y luego se use la sutura más caudal para anclarla, añadiendo estabilidad.Es importante asegurar un buen flujo linfático antes de cerrar la cavidad abdominal. El catéter se exterioriza en la región media lateral izquierda del cerdo. Se utilizan fórceps grandes para extraer el catéter desde la cavidad abdominal hasta la superficie externa del flanco del cerdo.Las capas musculares se cierran con sutura de vicryl 2-0 en aguja cónica mediante un patrón de puntos simples interrumpidos. La piel se cierra con sutura de vicryl 2-0 en aguja cortante mediante un patrón de sutura subcuticular continua. En la incisión de salida, el catéter atraviesa la piel y se cierra con sutura de nylon 2-0 en aguja cortante mediante un patrón de sutura en bolsa de confección.Este cierre ayuda a prevenir infecciones ascendentes que se propaguen hacia adentro a lo largo del catéter. La funda que sostiene los frascos de recolección de linfa se coloca en el cerdo mientras este aún está bajo anestesia. El catéter se inserta en el frasco de recolección y se verifica un buen flujo linfático antes de despertar al cerdo.Los cerdos se recuperan bien del procedimiento y se mantiene un excelente flujo linfático durante todo el experimento. La tabla muestra los componentes de la linfa recogida del vaso linfático. Estos componentes incluyen Apolipoproteína B48, Triglicéridos y Colesterol.La figura del inmunotransferencia de proteínas muestra la presencia de ambas apolipoproteínas B48 y pequeñas cantidades de apolipoproteína B100 de origen plasmático dentro de la muestra de linfa recolectada. Aunque la cateterización linfática en cerdos jóvenes puede ser técnicamente desafiante, ya que los vasos linfáticos son delicados y frágiles, este video demuestra que el uso de una técnica quirúrgica adecuada y cuidadosa en cerdos jóvenes puede proporcionar a los investigadores un excelente modelo para la recolección de linfa intestinal.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Se describe un nuevo método quirúrgico para la cateterización "asas intestinales" en el íleon de los ovinos. Una vez que los animales se han recuperado de la cirugía y han limpiado los antibióticos y analgésicos, múltiples tratamientos pueden ser depositados directamente en los bucles a través de los catéteres.

La cateterización de asas intestinales en rumiantes

Este video muestra una técnica para canular el conducto linfático mesentérico en ratas. Este método permite el acceso directo a todo el volumen de componentes presentes en el líquido linfático.

Canulación del conducto linfático mesentérico en un modelo de rata para recolectar líquido linfático

Aquí describimos una técnica para canular el conducto linfático mesentérico en ratas que permite cuantificar el transporte de lípidos y fármacos a través del sistema linfático después de la administración intestinal. La técnica se puede adaptar para evaluar las concentraciones de linfa mesentérica y/o el transporte de líquidos, células inmunitarias, péptidos, proteínas y moléculas lipofílicas.

La linfa mesentérica Conducto canulado Rata Modelo: Aplicación de la Evaluación de Intestinal Linfático Transporte de Drogas

Aquí, describimos un método preciso para recoger linfocitos de conductos torácicos y observar la migración de linfocitos trópicos intestinales en parches de rata Peyer durante 3 horas utilizando fotografía de lapso de tiempo. Esta técnica puede aclarar cómo la dinámica de los linfocitos se ve afectada en condiciones inflamatorias.

Observación microscópica de la dinámica de linfocitos en los parches de Rat Peyer

El presente protocolo describe un protocolo quirúrgico detallado para aislar la linfa intestinal que fluye en respuesta a infusiones de nutrientes intraduodenales en ratones. Esto permite la determinación fisiológica de la absorción total de lípidos intestinales y la síntesis y secreción de quilomicrones en respuesta a diversos nutrientes experimentales.

El aislamiento de la linfa mesentérica fluida en ratones para cuantificar la cinética in vivo de la absorción de lípidos en la dieta y la secreción de quilomicrones

Se describe un enfoque fiable y reproducible para la inserción y el mantenimiento de un catéter Hickman tunelizado para el acceso vascular a largo plazo en cerdos. La colocación de un catéter venoso central permite la toma de muestras diarias de sangre entera de animales despiertos y la administración intravenosa de medicamentos y líquidos.

Uso del catéter Hickman para el acceso vascular a largo plazo en un modelo porcino preclínico

Este protocolo describe el desarrollo de un modelo de lechón neonatal de lesión pulmonar aguda que modela los eventos patogénicos tempranos que ocurren en el pulmón prematuro, incluida la cantidad de surfactante subadecuada, hiperoxia, ventilación a alta presión e inflamación, para facilitar la comprensión de los desencadenantes moleculares de la displasia broncopulmonar y mejorar la traducción terapéutica.

Desarrollo de un modelo de lesión pulmonar aguda de lechones neonatales que recrea el entorno temprano de los pulmones de los lactantes prematuros

Este protocolo experimental demuestra un modelo de rata con canulación de conducto linfático cervical profundo que permite una evaluación directa y cuantitativa del drenaje linfático desde la región de la cabeza. El modelo facilita un análisis detallado de solutos derivados del sistema nervioso central (SNC), poblaciones de células inmunitarias y la distribución y eliminación de terapias dirigidas al SNC.

Modelo de rata canulada por conducto linfático cervical para evaluar el transporte linfático desde la cabeza y el cerebro

Este protocolo experimental describe un modelo de rata canalizada por conducto linfático hepático que permite una evaluación directa y cuantitativa del drenaje linfático y vascular hepático. El modelo permite el muestreo simultáneo de sangre linfa hepática y sistémica para investigar el transporte hepático, el metabolismo y la señalización inmunitaria, apoyando estudios de farmacocinética de fármacos y biología específica del hígado.

Un modelo integral de ratas para evaluar las vías de transporte hepático mediante muestreo simultáneo de vasculedades linfáticas y hematobacterias

Imagen de fluorescencia es una técnica prometedora para la innovadora cirugía guiada por imagen en cirugía oncológica. En este video se describe el procedimiento técnico para la detección del ganglio centinela utilizando imágenes de fluorescencia mostró como en ginecología oncologicy. Un sistema multiespectral cámara de fluorescencia, junto con el agente fluorescente verde de indocianina, se aplica.

Multiespectrales en tiempo real imágenes de fluorescencia para la detección intraoperatoria del ganglio centinela en Oncología Ginecológica

Aprenda la cateterización del tronco linfático intestinal en cerdos neonatales mediante abordaje ventral. Esta técnica quirúrgica permite recolectar linfa para investigar el metabolismo lipídico y farmacológico.

Largo Plazo La cateterización de la linfa intestinal Tronco y colección de linfa en cerdos neonatales

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