Name: Modelo murino de isquemia-reperfusión intestinal Lesiones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-05-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 7 s
Description: Aprende a inducir lesión por isquemia-reperfusión intestinal en ratones mediante oclusión temporal de la arteria mesentérica superior. Este modelo reproducible permite estudiar mecanismos celulares y moleculares de daño y regeneración gastrointestinal sin causar mortalidad.

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Este trabajo fue apoyado por la Fundación Rusa de Ciencias, subvención no. 14-50-00060 y LLC RUSCHEMBIO. Este trabajo también fue apoyado por la Fundación Crohn`s y Colitis de América conceder 294.083 (a AVT), y por el NIH subvención RO1 DK47700 (CJ).

Se llevaron a cabo estudios con animales de acuerdo con el Instituto Nacional de Salud directrices y fueron aprobados por el Cuidado de Animales institucional y el uso comité del Instituto Trudeau. 8-12 semanas de edad C57BL / 6 ratones se utilizaron para el estudio. 1. Preparación para la Cirugía <ol><li> Preparar y esterilizar instrumentos quirúrgicos. </li><li> Preparar sistema de anestesia basada en isoflurano con el cono de la nariz y la almohadilla caliente. Asegúrese de que la almohadilla caliente no se ha recalentado (&lt;39 ºC). </li><li> Asegúrese de que el isoflurano recipiente de recogida de gases está colocado correctamente para asegurar que los orificios de escape en la parte inferior de la lata no se bloquean o ocluido de ninguna manera. Pesar recipiente de recogida de gases antes del procedimiento y el peso del documento en el cartucho. Deseche el cartucho cuando el peso del recipiente es superior a 50 g de peso acumulado (~ 12 h). </li></ol> 2. anestesia <ol><li> Anestesiar al ratón con 3% de isoflurano en una cámara de inducción (1 L / minO 2). <ol><li> Evaluar la profundidad anestésica por una incapacidad para permanecer en posición vertical, pérdida de movimiento intencional voluntaria, pérdida del reflejo de parpadeo, la relajación muscular y la pérdida de respuesta a la estimulación reflex (dedo del pie o pellizco de la cola con una presión firme). </li><li> Evaluar la frecuencia respiratoria y el patrón mediante la observación de los movimientos de la pared torácica y abdominal. Bajo anestesia óptima, la tasa de respiración debe ser ~ 55-65 respiraciones por minuto. </li><li> Retire ratón desde la cámara de inducción y afeitar rápidamente el área del abdomen del ratón. </li></ol></li><li> Para evitar la desecación de la córnea, colocar pomada oftálmica sosa en los ojos. </li><li> Coloca el ratón sobre la almohadilla caliente y conectarlo a través de cono de la nariz con el sistema de anestesia. Asegúrese de que la membrana cono de la nariz de látex se ajusta firmemente sobre la cabeza del ratón y no hay fugas de isoflurano. </li><li> Reducir la tasa de isoflurano al 1,5%, e inyectar buprenorfina (0,1 mg / kg) y ketamina (10 mg / kg) por vía subcutánea para prevenir wind-up del dolor en cascada. </li><li> limpie THe la piel de la zona de operación con un hisopo de algodón estéril empapada con una solución de Betadine quirúrgico seguido de etanol al 70%. </li></ol> 3. Cirugía <ol><li> Hacer una laparotomía cm de la línea media de 3-5 con tijeras de funcionamiento. Área de actividad de la cubierta con el cojín no adherente estéril humedecido con solución salina. Aislar ciego y el íleon y exponer la arteria mesentérica superior usando hisopos de algodón humedecidos en solución salina. </li><li> Para facilitar la aplicación de clips, hacer pequeñas muescas en el mesenterio que rodea la arteria mesentérica superior usando iris finas scissors.To ello, levante suavemente el intestino con una pinza vestidores y cortar mesenterio a ambos lados de la arteria mesentérica superior en la posición de corte deseada (Figura 1A). A continuación, añadir algunas gotas de solución salina estéril a la zona de la posición de clip deseado antes de aplicar clips. Nota: Para realizar la cirugía simulada, siga el procedimiento quirúrgico hasta el paso 3.2. No aplicar clips. En su lugar, mantener el tejido húmedo por el agregado s tibiaaline como se describe en 3.6 durante 1 h. Después, continúe en el paso 4.1, </li><li> Ocluir las primeras ramas de la orden de la arteria mesentérica superior con clips microvasculares (70 g de fuerza) utilizando un aplicador de clips para crear una región de 5-7 cm del íleon isquémica adyacente al ciego (Figura 1B). Aunque la posición de los vasos es conservadora, puede haber ligeras variaciones entre los ratones (ver ejemplos en la Figura 1). Por lo tanto, se requieren generalmente 2 o 3 clips (ver la situación de los clips en la Figura 1A, D, E, flechas negras). Nota: Utilice grapas de vaso de alta calidad. clips de alta presión puede dañar los vasos y evitar la regeneración mientras que los clips de baja presión (&lt;30 g) no puede bloquear completamente el flujo sanguíneo. </li><li> Bloquear el flujo sanguíneo colateral a través del intestino usando dos clips microvasculares través de los vasos (40 g fuerza), demarcación de la región del intestino isquémico (Figura 1). Se requiere la oclusión de vasos colaterales aimpide el suministro de sangre de los vasos sanguíneos adyacentes (ver la situación de los clips en la figura 1A, D, E, flechas verdes). </li><li> Opcional: Añadir solución de heparina (6 USP unidades / ml), para prevenir la coagulación de la sangre. Gota a gota añadir 0,5 ml de solución de heparina al intestino aislado. </li><li> Húmedos almohadilla no adherente delicados toallitas estériles con solución salina precalentada a 37 ° C y se aplican a la zona quirúrgica. Asegúrese de que las toallitas húmedas se mantiene durante todo el procedimiento. </li><li> Mantener la isquemia durante 60 minutos usando 1-1,5% a lo largo de la anestesia con isoflurano. Si la isquemia procedimiento se realiza correctamente, la región isquémica cambiará a rojo vino de color en aproximadamente 30 minutos. Tenga en cuenta que los vasos sanguíneos distales a la posición del clip se agrandan durante la isquemia (Figura 1, paneles de la derecha) que indica la oclusión exitosa. </li><li> Vigilar de cerca el ratón durante la etapa de la isquemia. Seguir aplicando una solución salina para la almohadilla no adherente que cubre el sitio de la cirugía. </li><li> marcalos bordes de la zona isquémica mediante pipeteo 20 l de Gill`s 3 hematoxilina sobre el tejido para facilitar la cosecha el tejido isquémico y el tejido sano adyacente de la misma para la comparación de ratón (Figura 1E, panel derecho). </li></ol> 4. Etapa de reperfusión <ol><li> Al final de la isquemia añadir unas gotas de solución salina en el área de clip y retire suavemente clips microvasculares con aplicador de clips. A continuación, empuje suavemente el intestino de nuevo a la cavidad abdominal con solución salina humedecido puntas de algodón. Retire la almohadilla no adherente y cierre de la pared abdominal y la piel utilizando acero inoxidable grapas para heridas 9 mm. Si la reperfusión se lleva a cabo durante más de 3 horas, utilice una sutura absorbible vicryl para cerrar la pared abdominal antes de la aplicación de grapas de heridas en la piel. </li><li> Mantener los ratones en una jaula limpia calentó durante cantidad deseada de tiempo (30 min, 60 min, 120 min, o 180 min) para la fase de reperfusión. </li><li> Compruebe los animales al menos cada 30 minutos para asegurar la estabilidad. </li></ol><pclass = &quot;jove_title&quot;&gt; 5. La necropsia y recolección de intestino delgado <ol><li> La eutanasia a los ratones por CO 2 sobredosis seguido por dislocación cervical en el momento deseado después de la reperfusión. </li><li> Abra cavidad abdominal y recoger el tejido intestinal isquémica para su posterior análisis. Cosecha tejido normal sano adyacente al tejido lesionado como un control interno para dar cuenta de cualquier reacción sistémica a la lesión. Nota: Este control es más apropiada que la operación simulada ratones de control porque los ratones con operación simulada no se someten a una reacción sistémica a la lesión inducida por IR. </li><li> Lave el contenido intestinal mediante jeringa de 30 ml con aguja de sonda unida llena con solución salina y luego se corta el intestino longitudinalmente. Si se requiere una muestra de intestino para el análisis de la expresión génica, cortar un fragmento de 1,5 mm en sentido longitudinal, y el uso de la pieza restante para el análisis histológico. </li><li> Para el análisis histológico, preparar un rollo suizo usando un par de pinzas para hacer rodar la intestine. </li><li> Para mantener la forma enrollada, colocar las piezas de intestino entre almohadillas de espuma de biopsia en cassettes de tejido (Figura 2). Coloque los cassettes en 10% de formalina tamponada. </li><li> Fijar el tejido en formalina durante al menos 24 h. Reemplazar formol con un 70% de etanol durante 24 horas más. tejido de la tienda en 70% de etanol indefinidamente a temperatura ambiente. </li><li> Incrustar en parafina, se cortaron secciones de 5 micras y se tiñen con hematoxilina y eosina utilizando un protocolo estándar (Figura 3). </li></ol> 6. Scoring <ol><li> Puntuación de la lesión por isquemia-reperfusión murino tal como se resume en la Tabla 2. Elija un método de puntuación apropiada. </li><li> Opcional: Se divide el campo de visión en cuatro secciones ya que la gravedad de la lesión varía a lo largo de la sección. </li><li> Calcular la nota media de cada sección de las puntuaciones obtenidas a ciegas. </li><li> Comparar el grado del tejido lesionado entre los casos y de control, así como a the ileso tejido utilizando una prueba de Kruskal-Wallis, seguido de la prueba de comparaciones múltiples de un Dunn. </li></ol>

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<li>Victoni, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+and+remote+tissue+injury+upon+intestinal+ischemia+and+reperfusion+depends+on+the+TLR%2FMyD88+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Microbiol+Immunol%22%5BJournal%5D)">Local and remote tissue injury upon intestinal ischemia and reperfusion depends on the TLR/MyD88 signaling pathway.</a> Med Microbiol Immunol. 199, 35-42 (2010).</li>
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<li>Bianciardi, P., Scorza, R., Ghilardi, G., Samaja, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xanthine+oxido-reductase+activity+in+ischemic+human+and+rat+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radic+Res%22%5BJournal%5D)">Xanthine oxido-reductase activity in ischemic human and rat intestine.</a> Free Radic Res. 38, 919-925 (2004).</li>
<li>Yandza, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pig+as+a+preclinical+model+for+intestinal+ischemia-reperfusion+and+transplantation+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">The pig as a preclinical model for intestinal ischemia-reperfusion and transplantation studies.</a> J Surg Res. 178, 807-819 (2012).</li>
</ol>

Los autores declaran no tener conflicto de intereses

El desarrollo de modelos de ratón de IR lesión intestinal han mejorado en gran medida la comprensión de los mecanismos de lesión tisular y ayudado en el desarrollo de estrategias terapéuticas potenciales para minimizar los daños 7,9,11,34. Los pasos críticos de este protocolo son la colocación apropiada de las grapas microvasculares, la coordinación correcta de la evaluación histológica isquemia y adecuada de la lesión IR. La duración de la isquemia es crítica para daño epitelial ...

El intestino es muy sensible a la interrupción del flujo de sangre que provoca isquemia y daño epitelial. Reperfusión después de la isquemia proporciona re-oxigenación del tejido, y puede promover aún más la patología. Por lo tanto, la lesión por isquemia y reperfusión intestinal se asocia con una amplia gama de patologías, incluyendo enterocolitis necrotizante, rechazo de aloinjertos en el trasplante de intestino delgado, las complicaciones de la cirugía de aneurisma de aorta abdominal, derivación cardiopulmonar, y 1,2 enfermedad inflamatoria intestinal. IR lesión intestinal, isquemia mesentérica aguda sobre todo, es una condición que amenaza la vida como resultado de la morbilidad y la mortalidad 3. Aunque poco entendido, se cree que intestinal por isquemia-reperfusión (IR) daño a estar asociado con cambios en la microflora intestinal, así como la producción de especies reactivas del oxígeno y citoquinas inflamatorias y quimiocinas 1,4-6. Esto conduce a la activación de ambos enNate y mecanismos inmunes adaptativas, que promueven la inflamación y el tejido 1,7,8 lesión. Los modelos animales son fundamentales para la comprensión de los mecanismos de la lesión por IR, ya que permiten una fácil ganancia y la pérdida de experimentos genéticos de la función. Varios modelos animales de IR se han desarrollado, que incluyen la oclusión vascular completa, bajo la isquemia de flujo, y segmentada de oclusión vascular (que se resumen en una revisión exhaustiva reciente 9). La isquemia intestinal causado por la oclusión vascular completa de la arteria mesentérica superior (SMA) es un modelo sencillo y de uso común de IR en animales grandes y roedores 9-11. Sin embargo, las diferentes áreas del intestino tienen diferente susceptibilidad a la lesión. Además, la diversa gama de anestésicos, analgésicos, técnicas de oclusión de la arteria, así como la inconsistencia en la duración de la lesión isquémica y resultado de recuperación en grados variables de lesión de confusión nuestra comprensión de la biología de IR a través de múltiples studies. La Tabla 1 muestra estas inconsistencias en los estudios de IR murino. El mayor inconveniente del uso de los tiempos de isquemia más cortos (30-45 min) se dirige a la ventana de la recuperación sobre la cual se pueden observar diferencias discernibles entre los casos y controles. lesión leve en el epitelio puede ser resuelto de una hora después de la reperfusión, por lo tanto, se especializó métricas patológicos pueden ser necesarios para encontrar las diferencias en la restitución epitelial. Por el contrario, un daño excesivo, como se ve por 100 min de la lesión isquémica puede resultar en la denudement completa del epitelio, cuando la restitución ya no es posible, el aumento de la tasa de mortalidad y el tiempo de recuperación. Por lo tanto, aquí se describe el procedimiento detallado de la RI intestinal en ratones que produce lesiones reproducibles sin mortalidad para fomentar la estandarización de esta técnica a través de nuestro campo. Este modelo de lesión intestinal IR se puede utilizar para estudiar los mecanismos celulares y moleculares de la lesión y regeneración.

<table><tbody><tr><td>Almohadilla calefactada</td><td>Sunbeam</td><td>E12107-819</td><td>Alternativa: Almohadilla térmica Braintree Scientific</td></tr><tr><td>Máquina de anestesia de investigación de sobremesa Vasco</td><td></td><td>UCAP 0001-0000171</td><td>Alternativa: Parkland Scientific,</td></tr><tr><td>cono de nariz</td><td>de V3000PS Parkland Scientific</td><td>ARES500</td><td></td></tr><tr><td>Bote de carroñero y cartucho de repuesto</td><td>Parkland Scientific</td><td>80000, 80120</td><td></td></tr><tr><td>Cámara de inducción</td><td>Surgivet</td><td>V711802</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Piramal Healthcare</td><td>NDC 66794-013-10</td><td>Sustancia controlada, póngase en contacto con IACUC</td></tr><tr><td>Cortadora de animales&nbsp;</td><td>Oster&nbsp;</td><td>Oster Golden A5 078005-050-003</td><td></td></tr><tr><td>Pomada oftálmica</td><td>Webster</td><td>8804604</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>McKesson 562766</td><td></td><td>Sustancia controlada, contacto IACUC</td></tr><tr><td>Ketaset (Ketamina HCl)</td><td>Pfizer</td><td>NADA 45-290</td><td>Sustancia controlada, contacto IACUC</td></tr><tr><td>Puntas de algodón</td><td>Productos médicos puritanos</td><td>806-WC</td><td>Autoclave antes de usar</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Purdue Products</td><td>67618-150-17</td><td>10% Povidona-Yodo</td></tr><tr><td>Solución salina estéril</td><td>Aspen</td><td>46066-807-60</td><td>Ajustar a la temperatura ambiente antes de usar</td></tr><tr><td>termómetro para roedores IR</td><td>BIOSEB</td><td>BIO-IRB153</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas microvasculares, 70 g</td><td>Roboz Surgical&nbsp;</td><td>RS5424, RS5435</td><td>Alternativa: WPI 14121, para oclusión SMA</td></tr><tr><td>Pinzas microvasculares, 40 g</td><td>Roboz Quirúrgico&nbsp;</td><td>RS6472</td><td>Alternativa:WPI 14120, para la oclusión de vasos colaterales</td></tr><tr><td>Pinza de aplicación de pinzas</td><td>World Precision Instruments</td><td>14189</td><td>Alternativa: Roboz #RS-5410 o&nbsp; #RS-5440</td></tr><tr><td>Gill's 3 hematoxilina</td><td>Thermo Scientific</td><td>14-390-17</td><td></td></tr><tr><td>Grapas quirúrgicas, Reflex 9 mm</td><td>Cell Point Scientific</td><td>201-1000</td><td></td></tr><tr><td>Aplicador de autoclip</td><td>Beckton Dickinson</td><td>427630</td><td></td></tr><tr><td>Almohadilla de espuma Byopsy</td><td>Simport</td><td>M476-1</td><td></td></tr><tr><td>Casete de pañuelos</td><td>Fisher Healthcare</td><td>15182701A</td><td>Histosette II tapa y base</td></tr><tr><td>combinadas 10% formalina tamponada</td><td>Fisher Scientific</td><td>245-684</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras quirúrgicas para iris World</td><td>Precision Instruments</td><td>501263-G SC</td><td>Alternativa: Roboz RS6816</td></tr><tr><td>Tijeras de operación</td><td>World Precision Instruments</td><td>501219-G</td><td>Alternativa: Roboz RS6814</td></tr><tr><td>Pinza de vendaje</td><td>Roboz Surgical&nbsp;</td><td>RS-5228, RS-8122</td><td>Alternativa: World Precision Instruments 1519-G</td></tr><tr><td>Heparina, libre de endotoxinas, 300 unidades USP/vial, 50 mg</td><td>Sigma</td><td>2106</td><td></td></tr><tr><td>Reflex clip de remoción pinza para quitar pinzas</td><td>Roboz Surgical&nbsp;</td><td>RS-9263</td><td>Alternativa: World Precision Instruments: 500347</td></tr><tr><td>ratones ratones C57BL/6J&nbsp;</td><td>Código</td><td>RS de Jackson Laboratory 0664</td><td></td></tr><tr><td>Apósitos no adherentes Telfa, 3 x 4, estériles</td><td>Coviden</td><td>1050</td><td></td></tr><tr><td>Pipetas de transferencia Fisherbrand</td><td>Fischer Scientific</td><td>13-711-5AM</td><td>Utilice las pipetas para añadir solución salina gota a gota</td></tr></tbody></table>

modelo murino de isquemia-reperfusión intestinal lesiones

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

La isquemia intestinal es una afección potencialmente mortal asociado con una amplia gama de condiciones clínicas que incluyen la aterosclerosis, trombosis, hipotensión, enterocolitis necrotizante, trasplante de intestino, el trauma y la inflamación crónica. lesión intestinal por isquemia-reperfusión (IR) es una consecuencia de isquemia mesentérica aguda, causada por el flujo inadecuado de sangre a través de los vasos mesentéricos, lo que resulta en el daño intestinal. Reperfusión después de la isquemia puede exacerbar aún más el daño del intestino. Los mecanismos de la lesión IR son complejos y poco conocidos. Por lo tanto, los modelos experimentales de animales pequeños son fundamentales para la comprensión de la fisiopatología de la lesión IR y el desarrollo de nuevas terapias. Aquí se describe un modelo de ratón de lesión IR intestinal aguda que proporciona lesión reproducible del intestino delgado sin mortalidad. Esto se consigue por la isquemia inducir en la región del íleon distal por temporalmente ocludinag las ramas colaterales periféricos y terminales de la arteria mesentérica superior durante 60 minutos con clips microvasculares. Reperfusión durante 1 hora, o 2 horas después de la lesión resulta en lesión reproducible del intestino examinado por análisis histológico. La correcta posición de las pinzas microvasculares es crítica para el procedimiento. Por lo tanto el clip de vídeo proporciona una detallada descripción visual paso a paso de esta técnica. Este modelo de lesión intestinal IR se puede utilizar para estudiar los mecanismos celulares y moleculares de la lesión y regeneración.

Hemos optimizado el protocolo experimental de la cirugía de infrarrojos para obtener la lesión inducida reproducible IR del íleon en ratones. Los resultados representativos se manifestaron en esta sección. La Figura 1 muestra ejemplos de posición clips microvasculares para inducir isquemia del íleon. Las flechas negras indican la posición de los principales clips que ocluyen las ramas de primer orden de la art...

A continuación se describe el procedimiento detallado de isquemia-reperfusión intestinal en ratones que produce lesiones reproducibles sin mortalidad para fomentar la estandarización de esta técnica a través del campo. Este modelo de lesión de isquemia-reperfusión intestinal puede ser utilizado para estudiar los mecanismos celulares y moleculares de la lesión y regeneración.

Modelo murino de isquemia-reperfusión intestinal Lesiones

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

El objetivo general de este procedimiento es realizar una lesión inducida por isquemia-reperfusión intestinal reproducible en la región del íleon distal del ratón, mediante la oclusión temporal de las ramas colaterales periféricas y terminales de la arteria mesentérica superior. Este método puede ayudar a comprender métodos básicos en el campo de la gastroenterología y la inmunología, como el mecanismo de lesión y regeneración de la rótula. La ventaja de esta técnica es que puede ser realizada por cualquier persona entrenada en un laboratorio.Otra ventaja es que el procedimiento en sí no causa mortalidad en los ratones. Prepare el sitio quirúrgico según se especifica en el protocolo escrito. A continuación, use tijeras quirúrgicas para realizar una laparotomía de tres a cinco centímetros en la línea media.Luego, cubra el área quirúrgica con una gasa estéril no adherente humedecida con solución salina. Aísle el ciego e íleon, y utilice torundas de algodón humedecidas con solución salina para exponer la arteria mesentérica superior. A continuación, para facilitar la colocación del clip, use fórceps de tracción para elevar suavemente el intestino y use tijeras de iris para cortar el m

murine-model-of-intestinal-ischemia-reperfusion-injury

Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

Medicina

El trauma quirúrgico induce una respuesta inflamatoria. Las citocinas y los ligandos endógenos se sabe que modulan el tamaño del infarto de miocardio después de la isquemia y la reperfusión. Se presenta una versión modificada de tórax cerrado, el modelo murino de isquemia y reperfusión con pesas colgantes para minimizar los efectos de la toracotomía.

Un murino tórax cerrado modelo de isquemia y reperfusión miocárdica

Se introduce un método quirúrgico para inducir experimental de isquemia / reperfusión (I / R) lesión para simular el infarto de miocardio (MI) en modelos de ratón que permite una mayor claridad en el posicionamiento de la ligadura en la arteria descendente anterior izquierda (LAD) para aumentar la reproducibilidad de experimentos en ratones MI.

Un modelo murino de isquemia-reperfusión miocárdica lesión a través de la ligadura de la arteria descendente anterior

Este protocolo permitirá a los lectores a establecer con éxito un modelo porcino de isquemia intestinal segmentaria y posteriormente aislar células madre intestinales para el estudio de la reparación epitelial después de lesión de la cultura.

Aislamiento de células madre intestinales y de la cultura en un modelo porcino de isquemia Intestinal pequeño segmentaria

Un modelo murino de isquemia-reperfusión cerebral es establecido para investigar la patofisiología del accidente cerebrovascular. Distal, ligar la arteria cerebral media derecha y la arteria carótida común derecha y restablecer el flujo sanguíneo después de 10 o 40 min de isquemia.

Oclusión de los vasos dos ratón modelo de isquemia-reperfusión Cerebral

Aquí se describe un procedimiento quirúrgico que muestra cómo lograr la ligadura permanente de la arteria coronaria descendente izquierda-anterior en ratones. Este modelo es de gran relevancia para investigar la fisiopatología del infarto de miocardio y los procesos biológicos concomitantes.

Modelo de infarto de miocardio murino usando ligadura permanente de la arteria coronaria descendente anterior izquierda

Describimos en detalle un modelo de tumor de metástasis hepáticas de cáncer colorrectal clínicamente relevante (CRLM) y la influencia de la reperfusión de isquemia hepática (I/R) en el crecimiento tumoral y la metástasis. Este modelo puede ayudar a entender mejor los mecanismos subyacentes promoción inducida por cirugía del crecimiento metastásico hepático.

Modelo murino de tumores hepáticos metastásicos en el escenario de la lesión por reperfusión de isquemia

La lesión por isquemia-reperfusión renal se asocia con una alta morbilidad y mortalidad en pacientes hospitalizados. Aquí, presentamos un modelo de ratón simple y efectivo de lesión unilateral por isquemia-reperfusión renal y proporcionamos una visión general secuencial de los cambios patológicos representativos observados en el riñón.

Un modelo de ratón eficaz de lesión unilateral por isquemia-reperfusión renal

En este trabajo describimos un método sencillo y reproducible que puede inducir infarto de miocardio o lesión por isquemia-reperfusión miocárdica en ratones mediante ligadura de precisión de la arteria coronaria descendente anterior izquierda mediante micromanipulación.

Inducción de infarto de miocardio y lesión por isquemia-reperfusión miocárdica en ratones

Describimos cómo generar un modelo quirúrgico ampliamente utilizado de lesión por isquemia-reperfusión intestinal (IRI) en roedores. El procedimiento consiste en la oclusión de la arteria mesentérica superior seguida de la restauración del flujo sanguíneo. Este modelo es útil para los estudios que investigan las causas oclusivas de la IRI intestinal tanto en medicina veterinaria como humana.

Modelo en roedor de lesión por isquemia-reperfusión intestinal por oclusión de la arteria mesentérica superior

El protocolo describe un método factible, fiable y reproducible de pinzamiento del hiliar pulmonar izquierdo que puede utilizarse para estudiar la lesión por isquemia-reperfusión pulmonar en modelos de ratón.

Modelo murino de pinzamiento del hiliar pulmonar izquierdo de lesión por isquemia pulmonar y reperfusión

Este protocolo presenta un método para inducir la lesión por isquemia-reperfusión mesentérica y visualizar trampas extracelulares (TNE) de neutrófilos en vénulas mesentéricas mediante microscopía intravital. El flujo sanguíneo en la arteria mesentérica superior se restringió durante 1 h, seguido de reperfusión, lo que permitió cuantificar directamente la adhesión leucocitaria y la NETosis.

Visualización de trampas extracelulares de neutrófilos en vénulas mesentéricas después de una lesión por isquemia-reperfusión mesentérica mediante microscopía intravital

Aprende a inducir lesión por isquemia-reperfusión intestinal en ratones mediante oclusión temporal de la arteria mesentérica superior. Este modelo reproducible permite estudiar mecanismos celulares y moleculares de daño y regeneración gastrointestinal sin causar mortalidad.

Modelo murino de isquemia-reperfusión intestinal Lesiones

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