La evaluación de resultado primaria en un modelo porcino de infarto agudo de miocardio

El objetivo general de esta metodología es obtener mediciones de resultados fiables y reproducibles para la evaluación de nuevas terapias en un modelo porcino de infarto agudo de miocardio. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo cardiovascular, como el efecto de las intervenciones terapéuticas en el esquema de una lesión de fusión y para modelar también un infarto agudo de miocardio. La principal ventaja de estas técnicas es que permiten una evaluación precisa y clínicamente relevante de la isquemia, la reperfusión y el remodelado cardíaco.

A través de este método, puede proporcionar información sobre la lesión por isquemia miocárdica y reperfusión. También se puede aplicar a otros estudios que impliquen la evaluación de la función cardíaca. El protocolo actual permite la adquisición de mediciones primarias de los resultados antes o después de un infarto agudo de miocardio.

El infarto se realiza mediante una oclusión transluminal con balón de 75 minutos de la arteria descendente anterior izquierda, que se detalla en el vídeo citado. Este video muestra cómo realizar una ecocardiografía transesofágica tridimensional y las mediciones de la presión del bucle de volumen para mediciones de seguimiento iniciales, a corto y largo plazo. El video también muestra cómo medir el tamaño del infarto y el área en riesgo de mancharse después de la terminación.

Prepare al cerdo con anestesia como se describe en el protocolo de texto y conecte el animal a la máquina de ecocardiografía usando los cables del electrocardiograma. Ahora, prepare la sonda de eco. Coloque un poco de gel de ultrasonido en la punta y desbloquéela para que quede flexible.

Ajuste el ángulo de imagen a 90 grados con la pieza de operación manual. Con el cerdo en posición lateral derecha, abra la boca e inserte con cuidado la sonda en el esófago. Tenga cuidado de no aplicar demasiada presión y evite la bolsa anatómica faríngea normal, que se asemeja a un divertículo de Zenker.

Luego, inserte la sonda de 50 a 60 centímetros, mida desde la punta del hocico y gire y flexione lentamente la cabeza a una posición anterolateral izquierda para visualizar el corazón. Asegúrate de que todas las paredes del corazón sean claramente visibles. Si es necesario, bloquee la punta de la sonda de eco para estabilizar las adquisiciones de imágenes.

En la pantalla, active la opción Volumen completo 3D para producir imágenes perpendiculares del ventrículo izquierdo. A continuación, maximice el ancho del sector que se está adquiriendo seleccionando FV Opt Volume. Ahora, pausa la ventilación y pulsa Adquirir para obtener las mediciones de volumen completo.

Después de obtener una medición completa, encienda la ventilación mecánica. Después de la adquisición del eco, desbloquee la sonda y retírela lentamente del animal. Luego, monitoree al cerdo hasta que se haya recuperado de la cirugía.

Como preparación, remoje las puntas de detección del catéter en solución salina al 0,9 % durante al menos 20 minutos. Después de preparar al cerdo para la cirugía, infundir 100 unidades internacionales de heparina por kilogramo y colocar una vaina introductora de 8F en la carótida y una vaina de 9F en la vena yugular. A continuación, inserte un catéter Swan Ganz a través de la vaina 9F, infle el globo en la punta del catéter y colóquelo en una pequeña arteria pulmonar.

Una vez colocado adecuadamente en la parte periférica del pulmón, desinfle el balón y conecte el catéter Swan Ganz a un dispositivo externo de gasto cardíaco. Tras la conexión, consulte el menú de gasto cardíaco en el dispositivo de gasto cardíaco externo. Introduzca el peso del animal en el sistema y calcule la longitud para que el IMC sea de 22,5.

Proceda cargando una jeringa de 20 mililitros con solución salina al 0,9% de temperatura ambiente y conectándola al puerto de inyección conectado a la lámpara con el debouchment más proximal. Apague la ventilación y espere cinco latidos del corazón. Primero, presione Manual, luego presione Inicio en el dispositivo de salida.

Luego, infunda rápidamente cinco mililitros de solución salina para medir el gasto cardíaco. En 15 segundos, se mostrarán las medidas del dispositivo. A continuación, encienda la ventilación.

Repita este procedimiento tres veces y calcule el volumen sistólico medio. Entre infusiones, espere uno o dos minutos para permitir que el dióxido de carbono al final de la espiración vuelva a los valores preexistentes. Ahora, retire el catéter Swan Ganz e inserte un catéter Fogarty 8F a través de la vaina 9F en la vena yugular y colóquelo en la vena cava inferior.

Mientras la punta permanece en solución salina al 0,9%, calibre la señal de presión del catéter de bucle PV lo más cerca posible de 0, utilizando los botones de curso y fino. A continuación, introduzca el volumen de brazada medido en el sistema. El siguiente paso es hacer avanzar el catéter de asa PV a través de la vaina 8F en la arteria carótida y, mientras se usa la fluoroscopia, avanzar y centrar la punta en el ventrículo izquierdo.

Ahora, trace la señal de conductancia bruta contra la señal de presión, que debería formar un bucle rectangular. Con este gráfico, seleccione el segmento más grande colocado adecuadamente. A continuación, detenga la ventilación mecánica y pulse Intro en el módulo de bucle de volumen de presión para realizar un escaneo de referencia y convertir la conductancia en volumen.

Cuando el módulo muestre la frecuencia cardíaca, la conductancia sistólica y diastólica, vuelva a activar la respiración. Antes de continuar, la frecuencia cardíaca medida debe ser igual al electrocardiograma o a la frecuencia cardíaca derivada de la presión. No puede haber arritmia y se debe detectar adecuadamente la conductancia sistólica y diastólica.

Si se determina que los datos de referencia son adecuados, acéptelos pulsando Intro y anote la frecuencia cardíaca y la conductancia sistólica y diastólica que se muestran en el módulo de bucle PV. A continuación, trace la señal de volumen frente a la señal de presión. Los bucles deben seguir siendo rectangulares.

Ahora, detenga la ventilación y adquiera el volumen de presión de referencia registrando de 10 a 12 latidos cardíacos consecutivos. A continuación, vuelva a encender la ventilación y permita que el nivel de dióxido de carbono al final de la espiración vuelva a los valores preexistentes. A continuación, bajo guía fluoroscópica, infle el catéter Fogarty para reducir la precarga.

Luego, registre de 10 a 12 latidos consecutivos sin ventilación como antes. La presión arterial sistólica debe permanecer por encima de los 60 milímetros de mercurio y ninguna arritmia puede interferir con las mediciones. Después de adquirir los datos, desinfle el catéter Fogarty, encienda la ventilación y espere a que el dióxido de carbono al final de la espiración vuelva a los niveles preexistentes.

Ahora, retire los catéteres de bucle Fogarty y PV mientras continúa registrando la presión arterial para corregir la deriva de presión. Por último, vigila al animal hasta que se haya recuperado antes de devolverlo a los demás animales. Después de preparar al animal para la cirugía, acceda a ambas arterias carótidas mediante una exploración quirúrgica del cuello.

A continuación, inserte una vaina introductora 7F y una 8F en la arteria carótida respectiva. Ahora, administrar heparina a 100 unidades por kilo. Para realizar una esternotomía, haga una incisión mediana de 30 a 40 centímetros desde justo debajo de la muesca supraesternal hasta un punto justo debajo de la apófisis xifoides.

Luego, avanza a través de la línea alba hasta el esternón. Use diatermia para dividir cuidadosamente el xifoides y use tijeras Klinkenberg para separar el esternón posterior del pericardio. Continúe la separación sin rodeos, moviéndose cranealmente.

Asegúrate de apuntar las puntas de las tijeras hacia arriba, hacia el esternón, para evitar daños cardíacos. Realizar una esternotomía con un martillo y un bisturí Lebsche. El sangrado de la médula ósea se puede minimizar frotando cera de médula ósea sobre la médula.

Abra el tórax con un retractor. Ahora, abra el pericardio con unas tijeras quirúrgicas. Conecte los catéteres Y estándar a los catéteres guía.

A continuación, conecte un grifo de tres vías con una extensión de 10 centímetros a ambos conectores Y. A continuación, coloque uno de los catéteres guía en el ostium del tronco de la arteria coronaria izquierda a través de una de las vainas. A continuación, mediante una guía insertada en la arteria descendente anterior izquierda, se avanza un catéter de dilatación coronaria a través del catéter de la arteria coronaria principal izquierda y se coloca el balón en el lugar donde se realizó la oclusión coronaria durante la inducción del infarto de miocardio.

No infle todavía. Continúe colocando el otro catéter guía en el ostium de la arteria coronaria derecha utilizando la otra vaina. Ahora, realiza una angiografía coronaria.

Infundir agente de contraste bajo fluoroscopia. En primer lugar, confirmar la correcta colocación del catéter guía en el tronco coronario izquierdo con una vista anteroposterior. A partir de entonces, visualice la arteria coronaria derecha.

La infusión de contraste puede impulsar el balón más adentro de la arteria coronaria. Vuelva a colocarlo si es necesario. Luego, coloque jeringas con tinte Evans Blue al 2% recién hecho en los grifos de tres vías.

A continuación, mediante una angiografía coronaria, infle el balón y confirme que ocluye completamente parte de la arteria coronaria. La oclusión es crítica. Mientras se infla el balón, inyecte el tinte a través de ambos catéteres guía a 5 mililitros por segundo.

El corazón no debe volverse azul, excepto la parte del ventrículo izquierdo que está privada del flujo sanguíneo. Si el corazón no entra en fibrilación ventricular espontáneamente, toque una batería de nueve voltios con la parte no infartada del corazón cinco latidos después de la infusión del tinte. Luego, haga una incisión en la vena del cable para liberar la presión y use la succión para drenar la sangre.

Ahora, desinfla el globo. Retírelo junto con ambos catéteres guía. Luego, explanta el corazón diseccionando las membranas circundantes y haciendo un corte transversal a través de los vasos grandes.

Asegúrate de lavar toda la sangre y teñir con solución salina al 0,9%, tanto en el exterior como en el interior. Luego, disecciona cuidadosamente el ventrículo izquierdo. Luego, haz cinco secciones iguales de 10 milímetros de grosor desde el ápice hasta la base, en un plano paralelo al surco ventricular auricular.

Fotografíe ambos lados de las cinco rebanadas en condiciones de luz ambiental utilizando una regla en la imagen para la calibración. A continuación, tiñe las rodajas en TTC y vuelve a fotografiarlas. Se utilizó la ecocardiografía transesofágica 3D para la evaluación de la función cardíaca global.

Una semana después de un infarto agudo de miocardio, la función cardíaca global se deterioró en comparación con los valores basales sanos, según los resultados de 10 animales. Esto se explica por la reducción de la contracción de la pared anteroseptal. También se utilizaron bucles de volumen de presión, tanto para evaluar la función cardíaca global como para calcular las propiedades intrínsecas del músculo miocárdico.

Las mediciones de resultados de los primeros se calcularon fácilmente e incluyeron EDV en la esquina inferior derecha y ESV en la esquina superior izquierda. Estos valores proporcionan información importante sobre la geometría del ventrículo izquierdo. A partir de estas medidas, se calculó la fracción de rechazo del ventrículo izquierdo, una medida importante de la función de la bomba ventricular izquierda, junto con varios otros parámetros.

Para el rendimiento cardíaco intrínseco, se derivaron diferentes mediciones de los bucles PV, como la relación entre el volumen de la presión sistólica final y la presión diastólica final. Después del infarto de miocardio, la pendiente de la relación de presión del volumen sistólico final puede disminuir, lo que indica una disminución de la contractilidad. Finalmente, se utilizaron tinciones para identificar el miocardio remoto de la zona de riesgo y el miocardio infartado.

Alrededor del 22% del ventrículo izquierdo constituía el área en riesgo, la mayoría de los cuales estaban infartados. Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo realizar la ecocardiografía transesofágica en 3D, la adquisición de datos del bucle de volumen de presión y la tinción del tamaño del infarto al área de riesgo. Una vez dominada, la ecocardiografía transesofágica se puede realizar en 20 minutos.

Adquisición de datos de bucle de volumen de presión en 30 minutos. Y el tamaño del infarto y el área en riesgo de tinción en 60 minutos. Al intentar los bucles PV y el área del tamaño del infarto en riesgo de manchas, es importante recordar tener cuidado de no inducir arritmias.

Las técnicas mostradas en este vídeo pueden ayudar a los investigadores en el campo de las enfermedades cardiovasculares a explorar la isquemia y la lesión por reperfusión en modelos animales grandes.