Name: Enfoques y Protocolos para la Integral ecocardiográficos Caracterización fenotípica en las valvulopatías en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-02-14T12:30:00.000+00:00
Duration: 12 min 12 s
Description: Aprenda a realizar ecocardiografía integral en ratones para caracterizar fenotípicamente la función cardíaca y valvular. Este protocolo estandarizado permite detectar disfunciones valvulares múltiples y comprender la interacción entre la función cardíaca y valvular.

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<li>Liu, J. H., Jeng, G. S., Wu, T. K., Li, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ECG+triggering+and+gating+for+ultrasonic+small+animal+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans+Ultrason+Ferroelectr+Freq+Control%22%5BJournal%5D)">ECG triggering and gating for ultrasonic small animal imaging.</a> IEEE Trans Ultrason Ferroelectr Freq Control. 53, 1590-1596 (2006).</li>
<li>Monin, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-gradient+aortic+stenosis%3A+operative+risk+stratification+and+predictors+for+long-term+outcome%3A+a+multicenter+study+using+dobutamine+stress+hemodynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Low-gradient aortic stenosis: operative risk stratification and predictors for long-term outcome: a multicenter study using dobutamine stress hemodynamics.</a> Circulation. , 319-324 (2003).</li>
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Los autores no tienen nada que revelar.

La inducción de la anestesia adecuado de inducción y mantenimiento de la anestesia es fundamental para la evaluación precisa de los cambios en las válvulas del corazón y la función cardiaca en ratones. Dada la rápida inducción de la anestesia con isoflurano y provocada por el tiempo relativamente largo de lavado de este anestésico después de la anestesia profunda, no utilizamos una cámara de anestesia autónomo para la inducción. En su lugar, como se ha indicado en detalle anter...

El envejecimiento se asocia con aumentos progresivos en la formación de calcificaciones cardiovasculares 1. La estenosis de la válvula aórtica hemodinámicamente significativa afecta al 3% de la población mayor de 65 años 2, y los pacientes con estenosis de la válvula aórtica, incluso moderada (velocidad pico de 3-4 m / s) tienen una supervivencia libre de eventos a los 5 años del 40% menos de 3. En la actualidad, no existen tratamientos eficaces para frenar la progresión de la calcificación de la válvula aórtica, y el reemplazo de la válvula aórtica quirúrgica es el único tratamiento disponible para la estenosis de la válvula aórtica avanzada 4. Estudios dirigidos a obtener una comprensión más profunda de los mecanismos que contribuyen a la iniciación y progresión de la calcificación de la válvula aórtica son un primer paso clave en el camino hacia métodos farmacológicos y no quirúrgicos para tratar la estenosis de la válvula aórtica 5, 6. Genéticoratones alterados-ly han jugado un papel importante en el desarrollo de nuestra comprensión de los mecanismos que contribuyen a una variedad de enfermedades y ahora están llegando a la vanguardia de los estudios sobre los mecanismos destinados a comprender la biología de la estenosis de la válvula aórtica 6, 7, 8. A diferencia de otras enfermedades cardiovasculares tales como la aterosclerosis y la insuficiencia cardíaca, donde protocolos estándar para evaluar la función vascular y ventricular son en su mayor parte bien establecidos-hay retos únicos asociados con el fenotipo in vivo de la función de válvula de corazón en ratones. Aunque recientes han proporcionado discusiones exhaustivas sobre las ventajas y desventajas de numerosas imágenes y modalidades invasivas utilizadas para evaluar la función de la válvula de roedores 9, 10, 11, hasta la fecha, no tenemos conocimiento de una publicación que proporciona una comprehensive, paso a paso protocolo para la función de la válvula del corazón fenotipificación en ratones. El propósito de este manuscrito es describir los métodos y protocolos al fenotipo función de válvula de corazón en ratones. Todos los métodos y procedimientos han sido aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Clínica Mayo. Los componentes clave de este protocolo incluyen la profundidad de la anestesia, la evaluación de la función cardíaca, así como la evaluación de la función de las válvulas cardíacas. Esperamos que este informe no sólo servirá para guiar a los investigadores interesados ​​en seguir la investigación en el campo de la enfermedad de las válvulas del corazón, sino que también se iniciará un diálogo nacional e internacional relacionada con el protocolo de estandarización para asegurar la reproducibilidad y validez de datos en este campo de rápido crecimiento. Es importante destacar que el uso de imágenes exitosa a los sistemas de ultrasonido de alta resolución requiere un conocimiento práctico de los principios de la ecografía (y la terminología de uso común en la ecografía), una comprensión fundamental de la principles de la fisiología cardiaca, y la experiencia significativa con la ecografía para permitir una evaluación precisa y eficiente en el tiempo de la función cardiaca en los roedores.

<table><tbody><tr><td>Ecógrafo de alta resolución</td><td>VisualSonics, Fujifilm</td><td>Vevo 2100&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Difusor de isoflurano (capaz de suministrar entre un 1 % y un 1,5 % de isoflurano mezclado con 1 L/min 100 % O2</td><td>VisualSonics, Fujifilm</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Transductores para ratones pequeños (550D) o ratones más grandes (400)</td><td>MicroScan, VisualSonics, Fujifilm</td><td>MS 550D, MS 400</td><td></td></tr><tr><td>Plataforma animal</td><td>VisualSonics, Fujifilm</td><td>11503</td><td></td></tr><tr><td>Unidad</td> <td>de monitorización fisiológica avanzadaVisualSonics, Fujifilm</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Terrell</td><td>NDC 66794-019-10</td><td></td></tr><tr><td>Cono de nariz y tubo conectados a un difusor de isoflurano y 100% O2</td><td>Diseñado internamente</td><td>--Maquinilla de</td><td></td></tr> <tr><td>afeitar para el cabello</td><td>Andis Super AGR+ Vet pack clipper</td><td>AD65340</td><td></td></tr><tr><td>Gel de ultrasonido</td><td>Parker Laboratories</td><td>REF 01-08</td><td></td></tr><tr><td>Gel de electrodos&nbsp;</td><td>Parker Laboratories</td><td>REF 15-25</td><td></td></tr><tr><td>Cintas adhesivas</td><td>Fisher Laboratories</td><td>1590120B</td><td></td></tr><tr><td>Toallas de</td><td></td><td></td><td></td> papel</tr></tbody></table>

enfoques y protocolos para la integral ecocardiográficos caracterización fenotípica en las valvulopatías en ratones

Echocardiographic Approaches and Protocols for Comprehensive Phenotypic Characterization of Valvular Heart Disease in Mice

El objetivo de este manuscrito y el video que lo acompaña es proporcionar una visión general de los métodos y enfoques utilizados para obtener imágenes de la función de las válvulas cardíacas en roedores, con descripciones detalladas de los métodos apropiados para la anestesia, las ventanas ecocardiográficas utilizadas, los planos de imagen y las orientaciones de las sondas para la adquisición de imágenes, los métodos para el análisis de datos y las limitaciones de las tecnologías emergentes para la evaluación de la función cardíaca y valvular. Es importante destacar que también destacamos varias áreas futuras de investigación en imágenes cardíacas y de válvulas cardíacas que pueden aprovecharse para obtener información sobre la patogénesis de la enfermedad valvular en modelos animales preclínicos. Proponemos que el uso de un enfoque sistemático para evaluar la función cardíaca y de las válvulas cardíacas en ratones puede dar lugar a datos más robustos y reproducibles, así como facilitar el descubrimiento de fenotipos previamente subestimados en ratones genéticamente alterados y/o estresados fisiológicamente.

Los ejemplos de las imágenes que se obtienen de forma rutinaria a partir de imágenes de ultrasonido cardiaco animales se incluyen en este manuscrito. Se proporciona una ilustración de la colocación del transductor en el pecho del animal para dar al lector una comprensión clara de que el transductor se coloca para obtener las imágenes como se describe. Una fotografía del laboratorio de ultrasonido puesta a punto también se incluye para destacar la importancia de los equipos adecuados, en ...

Este protocolo proporciona una descripción detallada del enfoque ecocardiográfico para el fenotipado completo del corazón y la función de las válvulas cardíacas en ratones.

Enfoques y Protocolos para la Integral ecocardiográficos Caracterización fenotípica en las valvulopatías en ratones

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in ...

El objetivo general de este protocolo de ecocardiografía es mostrar los métodos y enfoques utilizados para obtener imágenes de la función de las válvulas cardíacas en roedores. Los métodos que le mostraremos hoy pueden responder preguntas clave en el campo de las enfermedades cardíacas, con un énfasis específico en la evaluación del corazón como unidad integrada en condiciones de enfermedad de las válvulas cardíacas. Las implicaciones de este enfoque son bastante profundas para el campo de las enfermedades de las válvulas cardíacas, ya que la evaluación ecocardiográfica completa del corazón no solo permitirá la detección de la disfunción valvular en múltiples válvulas cardíacas, sino que también permitirá a los investigadores comprender la compleja interacción entre la función cardíaca y varias medidas de la función de las válvulas cardíacas.Aunque este método se puede aprovechar para caracterizar modelos animales en los que la enfermedad de las válvulas cardíacas es nuestro defecto principal, también se puede aplicar a otros sistemas en los que la disfunción de las válvulas cardíacas puede parecer secundaria a otras agresiones, como la insuficiencia cardíaca o un aneurisma de la a

echocardiographic-approaches-protocols-for-comprehensive-phenotypic

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La ecocardiografía transtorácica ofrece un método no invasivo para la evaluación de la función cardiaca en ratones. Una combinación de ultrasonido y las modalidades de Doppler puede ser usado para obtener mediciones dimensionales del corazón y el flujo sanguíneo intracardíaco, que en conjunto proporcionan una evaluación de la presión sistólica y el rendimiento cardiaco diastólico.

Ecocardiografía transtorácica en ratones

Este video demuestra el uso de un carril montado en alta frecuencia de la sonda de ultrasonido para realizar un ecocardiograma en un ratón anestesiado. Los métodos de describir tanto las mediciones convencionales de dos dimensiones y en modo M de la función cardíaca, además de nuevos y más potentes herramientas como el color de Doppler, análisis de las cepas, así como imágenes de contraste general y específica.

Ecocardiografía murino y la ecografía

Este video describe un protocolo para realizar ecocardiografía en un ratón de laboratorio.

Ecocardiografía de ratón: una técnica no invasiva para evaluar la morfología cardíaca

Este artículo proporciona un protocolo para la evaluación ecocardiográfica del tamaño ventricular derecha e hipertensión pulmonar en los ratones. Las aplicaciones incluyen la determinación del fenotipo y la evaluación de serie en modelos de ratón inducido por la toxina de la cardiomiopatía y la enfermedad vascular pulmonar transgénicos y.

Evaluación ecocardiográfica de la parte derecha del corazón en ratones

El objetivo de este protocolo es evaluar de forma no invasiva los cambios estructurales y funcionales cardiacas en un modelo de ratón de la enfermedad cardíaca creado por constricción de la aorta transversal, utilizando B y en modo M ecocardiografía y color / de pulso Doppler de onda.

Evaluación de la cardíaco morfológica y funcional Los cambios en el modelo de ratón de la constricción de la aorta transversa por ecocardiográfico Imaging

El siguiente protocolo describe la metodología para la adquisición y análisis de imágenes ecocardiográficas utilizadas para obtener el volumen de la aurícula izquierda (LAV) de diámetro, aorta (Ao), y el diámetro de la arteria pulmonar (AP) en ratones. Esta técnica es un procedimiento no invasivo, no terminal que permite la evaluación de la función cardiopulmonar.

Murino de Ecocardiografía del atrio izquierdo, la aorta y arteria pulmonar

La examinación ecocardiográfica se utiliza con frecuencia en los ratones. Dispositivos de ecografía de alta resolución caro han sido desarrollados para este propósito. Este protocolo describe un procedimiento ecocardiográfico asequible combinado con análisis de morfometría histológica para determinar la morfología cardiaca.

Examen ecocardiográfico e histológico de la morfología cardiaca en el ratón

Aquí describimos y comparamos dos posiciones para obtener la vista apical de cuatro cámaras en ratones. Estas posiciones permiten la cuantificación de la función ventricular derecha, proporcionan resultados comparables y se pueden utilizar indistintamente.

Medición ecocardiográfica de parámetros diastólicos ventriculares derecho en ratón

El presente protocolo describe la evaluación ecocardiográfica de la morfología, función y flujo sanguíneo coronario del ventrículo izquierdo en ratones neonatos de 7 días de edad.

Caracterización ecocardiográfica de la estructura, función y flujo coronario del ventrículo izquierdo en ratones neonatos

Este artículo detalla los métodos de diagnóstico de cardiopatía congénita (CHD) murina mediante ecocardiografía fetal, necropsia y captura de imágenes de fluorescencia episcópica (EFIC) mediante microscopía confocal episcópica (ECM) seguida de reconstrucción tridimensional (3D).

Una tubería para caracterizar defectos cardíacos estructurales en el ratón fetal

Aprenda a realizar ecocardiografía integral en ratones para caracterizar fenotípicamente la función cardíaca y valvular. Este protocolo estandarizado permite detectar disfunciones valvulares múltiples y comprender la interacción entre la función cardíaca y valvular.

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