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DOI: 10.3791/54162-v
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This article describes a method for assessing the competition between bacterial and fungal pathogens for adherence to virus-infected HeLa cell monolayers. The technique allows for the examination of interactions among various prokaryotes, eukaryotes, and viruses.
En este documento se describe un método para la determinación de la asociación y competencia entre reinos (bacteriana y fúngica) por la adherencia a las monocapas de células HeLa infectadas por virus. Este protocolo puede extenderse a múltiples combinaciones de procariotas, eucariotas y virus.
El objetivo general de este experimento es medir los efectos que las células preinfectadas con VHS tienen en la posterior adhesión de patógenos oportunistas bacterianos y fúngicos, por ejemplo, Staphylococcus aureus y Candida albicans. Este método puede ayudar a responder preguntas clave con respecto al papel que desempeña la infección viral crónica en la regulación de los respectivos miembros del microbioma huésped. La principal ventaja de esta técnica es que la interacción de múltiples organismos puede examinarse y cuantificarse en la etapa de iniciación para la formación de biopelículas, es decir, la adherencia.
Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia el control de patógenos oportunistas colonizadores, ya que la condición previa de la infección por VHS con excreción asintomática está presente en la mayoría de la población humana. Aunque este método puede proporcionar información sobre el control del VHS de la adhesión microbiana posterior, también se puede aplicar a otros sistemas, como la infección por CMV y la de adenovirus. Para empezar, determine la viabilidad y la multiplicidad de la infección de los virus HSV1 o HSV2, o MOI, mediante tinción x-gal para cada ensayo experimental ejecutado mediante un ensayo de entrada de virus reportero.
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