La reprogramación de fibroblastos embrionarios de ratón con factores de transcripción para inducir un programa Hemogenic

El objetivo general de este protocolo de inducción hemogénica es instigar un proceso de desarrollo en fibroblastos de ratón a través de la sobreexpresión del factor de transcripción para generar células precursoras hematopoyéticas in vitro que produzcan células hematopoyéticas tras un cultivo prolongado. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la programación hematopoyética, como si se puede desarrollar o no un protocolo para obtener HSC de buena fe de novo que sean capaces de multilinaje e injerto. La principal ventaja de esta técnica es que a través de la sobreexpresión de un conjunto mínimo de factores de transcripción, se puede iniciar el proceso de desarrollo en células reprogramadas que no requieren viajar a través de un intermediario pluripotente.

Después de cultivar fibroblastos embrionarios de ratón o MEFS, y producir el virus de acuerdo con el protocolo de texto, use gelatina al 0,1 por ciento en PBS para pre-recubrir placas de 6 pocillos. Asegurándose de que la gelatina cubra toda el área del pocillo. Coloque las placas en la incubadora a 37 grados centígrados durante al menos 20 minutos.