El uso de un sistema de bajo flujo Anestesia digital para ratones y ratas

Este protocolo demuestra el uso de un vaporizador de inyección directa accionado por jeringa como parte de un sistema de anestesia digital de bajo flujo. El vaporizador de inyección directa administra anestesia con precisión a caudales muy bajos en comparación con un vaporizador tradicional, lo que lo convierte en una alternativa prometedora para la administración controlada de anestésicos a roedores. Hay muchos vaporizadores de precisión disponibles para uso veterinario que funcionan entre 5 y 10 litros por minuto.

Estos caudales no son ideales para los roedores, ya que el rango está muy por encima de su pequeño volumen respiratorio por minuto. La principal ventaja de este vaporizador es que un animal puede mantenerse con un cono de nariz utilizando un caudal tan bajo como 1 1/2 veces el volumen minuto del animal. Por lo tanto, un ratón de 30 gramos se puede mantener a un caudal tan bajo como 52 mililitros por minuto.

Primero, seleccione una fuente de gas portador. Para utilizar la bomba de aire interna, desenrosque el puerto de entrada trasero, permitiendo que la bomba interna tome aire de la habitación. Luego, conecte un recipiente de carbón al puerto de escape.

A continuación, conecte el tubo de administración al sistema de anestesia. Utilice los clips codificados por colores para designar las ramas para el cono de la nariz y la cámara de inducción. Abra las abrazaderas para dirigir el flujo de aire a la cámara.

Para el monitoreo fisiológico, conecte el sensor de pata del oxímetro de pulso a la parte posterior del sistema de anestesia de bajo flujo. Encienda el sistema de anestesia de bajo flujo para configurar los ajustes. Navegue hasta el menú Configuración de anestesia y elija isoflurano.

A continuación, establezca el tamaño de la jeringa presionando Configuración para resaltar Tamaño de la jeringa. Use los botones de dirección para seleccionar una jeringa de dos mililitros. Es importante utilizar la jeringa del tamaño adecuado para su animal y la duración del procedimiento.

Este sistema es compatible con jeringas de dos, cinco y 10 mililitros para adaptarse a una variedad de aplicaciones. Después de seleccionar el tamaño de la jeringa, establezca la posición vacía de la jeringa. Ahora, asegure la jeringa de vidrio vacía y completamente presionada en el bloque de retención de la jeringa.

Coloque la jeringa de modo que la pinza de sujeción quede asentada en el collar metálico de la jeringa. Ajuste el bloque de empuje para que haga un ligero contacto con la parte superior del émbolo de la jeringa. Guarde la posición vacía.

Retire la jeringa. Y luego, llene con isoflurano usando el adaptador de la tapa de la botella. Después de llenar, vuelva a colocar la jeringa en el bloque de retención y conecte el tubo de administración.

A continuación, cebe el tubo de administración de anestésico presionando los botones de dirección. El sistema presionará la jeringa hasta que el anestésico viaje hacia el bloque vaporizador. Es importante no cebar demasiado la jeringa.

Una vez que se hayan realizado todos los ajustes, habilite la administración de anestesia. Ahora, seleccione el suministro de aire a la habitación y el volumen por minuto a 250 mililitros por minuto. Para la monitorización fisiológica, establezca la frecuencia cardíaca mínima detectada en Mouse.

Comience el flujo de aire para inducir la anestesia en el ratón. Coloque el ratón en la cámara de inducción, cierre bien la tapa y ajuste el dial de concentración de agente anestésico para administrar el 3%Supervise el ratón hasta que alcance el plano deseado de anestesia, determinado por la pérdida del reflejo de enderezamiento. Una vez que el animal esté suficientemente anestesiado, gire el dial de concentración del agente anestésico para administrar 0%Luego, abra las pinzas para dirigir el flujo de aire al cono de la nariz y cierre las pinzas que conducen a la cámara de inducción.

Retire el ratón de la cámara y colóquelo inmediatamente en el cono de la nariz. A continuación, centre al animal en una almohadilla térmica infrarroja, configurada para mantener la temperatura corporal a 37 grados centígrados a través de una sonda rectal en un circuito de retroalimentación. Con el ratón colocado en el cono de la nariz, ajuste la concentración de isoflurano al 1,5%Ahora, reduzca el volumen minuto para apoyar el mantenimiento anestésico.

Confirmar la profundidad de la anestesia determinada por la falta de reflejo de retirada durante un pellizco interdigital. Aplique ungüento oftálmico en los ojos para prevenir la sequedad durante la anestesia. Comience el monitoreo fisiológico colocando el sensor sobre la almohadilla de la pata trasera.

Coloque el sensor de modo que la luz roja ilumine la pata. Visualice la oxionda para visualizar la señal del sensor. Gire el dial de concentración de agente anestésico al mínimo para administrar 0% y retire al animal del cono de la nariz.

Vigile de cerca al ratón durante la recuperación de la anestesia. Una vez que el ratón esté completamente ambulatorio, devuélvalo a la jaula. Esta figura muestra la cantidad de isoflurano utilizada en mililitros para tres ratones hembra C57 Black 6 de seis a siete semanas de edad durante una hora de mantenimiento de anestesia utilizando el sistema de anestesia digital de bajo flujo.

Debido a los bajos caudales, el vaporizador digital de bajo flujo impulsado por jeringa consumió menos de un mililitro de isoflurano en el transcurso de una hora. Aquí se muestra la frecuencia cardíaca de los tres ratones, medida en latidos por minuto mediante oximetría de pulso entre cinco y 60 minutos después de la inducción. La frecuencia cardíaca de los animales se mantuvo relativamente estable y constante durante el período de mantenimiento.

Esta figura muestra los niveles de saturación de oxígeno de los tres ratones durante el mismo período de tiempo. Por último, aquí se muestra la tasa de respiración de los ratones en respiraciones por minuto entre cinco y 60 minutos después de la inducción con el sistema digital de anestesia de bajo flujo. La bomba de aire interna ofrece a los usuarios la opción de anestesiar a los animales sin necesidad de una fuente de gas comprimido.

Para procedimientos que requieren gas comprimido u oxígeno suplementario, el usuario tiene la opción de conectar una fuente de gas al vaporizador de bajo flujo en lugar de usar aire. Los vaporizadores de jeringa de bajo flujo son capaces de alcanzar caudales tan bajos como 10 mililitros por minuto, al tiempo que proporcionan concentraciones de anestésico precisas. Por lo tanto, esta técnica será beneficiosa para los grupos que realizan anestesia en roedores debido a la mayor seguridad, eficacia y precisión en comparación con los sistemas tradicionales.