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DOI: 10.3791/54969-v
Isabelle R. Miousse1, Igor Koturbash1, Marie-Cécile Chalbot2, Martin Hauer-Jensen3, Ilias Kavouras2, Rupak Pathak3
1Department of Occupational and Environmental Health,University of Arkansas for Medical Sciences, 2Department of Environmental Health Sciences,University of Alabama at Birmingham, 3Division of Radiation Health,University of Arkansas for Medical Sciences
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol describes techniques for the quantification and characterization of chromosomal aberrations in vitro in RAW264.7 mouse macrophages after treatment with ambient air particulate matter. The method allows for direct visualization of chromosomal damage induced by particulate matter exposure.
Este protocolo describe las técnicas para la cuantificación y caracterización de aberraciones cromosómicas in vitro en macrófagos de ratón RAW264.7 después del tratamiento con la materia en partículas del aire ambiente.
El objetivo general de este experimento es detectar el daño cromosómico inducido por la exposición de las células a material particulado, extraído del aire ambiente. Este método puede ayudar a responder una pregunta clave en el campo de la materia particulada, y es si la exposición a la materia particulada induce daño cromosómico. La principal ventaja de esta técnica, es que permite la visualización directa del daño inducido en el material genético.
Después de recolectar y analizar partículas de acuerdo con el protocolo de texto, lleve a cabo la exposición a las partículas calentando el medio de crecimiento completo, tripsina al 0,25% y PBS en un baño de agua a 37 grados centígrados, durante al menos 30 minutos antes del inicio del cultivo. Después de lavar 264,7 células crudas, agregue un mililitro de la solución tibia de tripsina a la placa y desaloje las células del fondo del recipiente de cultivo de tejidos raspando. A continuación, recoja las células y haga una suspensión unicelular mediante pipeteo repetido.
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