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DOI: 10.3791/55234-v
Gurpreet Kaur1,2, Jaimo Ahn1, Kurt D. Hankenson1,3, Jason W. Ashley1,4
1Department of Orthopaedic Surgery,Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania, 2Department of Biological Sciences,University of the Sciences, 3The Department of Small Animal Clinical Sciences,College of Veterinary Medicine, Michigan State University, 4Department of Biology,College of Science, Technology, Engineering, & Mathematics, Eastern Washington University
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Notch de 'jove_content es una forma de comunicación celular que se basa en el contacto directo entre células. Para inducir correctamente la señalización de Notch in vitro, los ligandos de Notch deben presentarse a las células en un estado inmovilizado. Este protocolo describe los métodos para la estimulación in vitro de la señalización de Notch en precursores de osteoclastos de ratón.
El objetivo general de este procedimiento es observar los efectos de la estimulación de la señalización de muesca en diferentes puntos durante el proceso de diferenciación de los osteoclastos. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la biología celular, tales como:¿Cómo cambia el papel de la señalización de muesca durante un proceso celular? La principal ventaja de esta técnica es su marginalidad, lo que permite adaptarla a otras células o ligandos notch.
Si bien este método puede proporcionar información sobre la diferenciación de los osteoclastos, también se puede aplicar a otros procesos como la supervivencia celular, la proliferación o la diferenciación de otros tipos de células. Comience el procedimiento asegurando un ratón en posición supina y desinfectando la piel con etanol al 70 por ciento. A continuación, haga una incisión a lo largo de la superficie anterior de una extremidad posterior para exponer la tibia y el fémur.
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